（鐵嶺縣現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展中心，遼寧 鐵嶺 112000）

1 試驗(yàn)材料

1.1 微生物培養(yǎng)設(shè)備

鮮血營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、恒溫箱、細(xì)菌接種環(huán)、無(wú)菌棉簽及滅菌柜等設(shè)備。

1.2 藥敏紙片

購(gòu)于上海金穗生物科技有限公司和自制藥敏紙片。

1.3 試驗(yàn)菌種

從發(fā)病豬場(chǎng)典型病豬分離到的致病性鏈球菌。

表1 豬敗血型鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2 試驗(yàn)過(guò)程

2.1 豬敗血型鏈球菌的菌種分離

在濕熱的夏季，豬場(chǎng)出現(xiàn)發(fā)病豬，其癥狀符合敗血型鏈球菌病的特征。豬死亡后通過(guò)剖檢發(fā)現(xiàn)疑似敗血型豬鏈球菌病[2]。取病死豬心血和脾臟病料，實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌操作接種于鮮血瓊脂平板培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h，取出觀察。菌落為淡黃色圓形，有溶血現(xiàn)象，染色，顯微鏡下為5～10個(gè)連結(jié)成鏈、革蘭氏染色呈陽(yáng)性的球狀桿菌。取菌落置于生理鹽水混懸液中，分別給仔豬口服和肌肉注射，均出現(xiàn)感染。從仔豬心血和脾臟中分離出鏈球菌，保留菌種，作為藥敏試驗(yàn)野毒菌種。

2.2 藥敏紙片的制作

除購(gòu)買(mǎi)的藥敏紙片外，還自制部分抗菌藥物紙片，取有效濃度的抗菌藥物制劑1 mL，充分浸濕直徑6 mm的圓形滅菌濾紙片100張，37℃風(fēng)干備用。

2.3 藥敏試驗(yàn)的操作

依據(jù)紙片法藥敏試驗(yàn)操作規(guī)程，進(jìn)行以下試驗(yàn)[3]。

取鮮血瓊脂培養(yǎng)基，在滅菌柜內(nèi)使用滅菌棉簽涂布接種鏈球菌生理鹽水菌液，保證培養(yǎng)基表面被涂抹均勻形成菌膜。

從每類(lèi)抗菌藥物中選取1～3種代表性藥物紙片進(jìn)行試驗(yàn)，均勻粘貼藥敏紙片，每片間隔10 mm以上，置于恒溫箱內(nèi)，37℃培養(yǎng)18～24 h。

3 試驗(yàn)結(jié)果

本地區(qū)連續(xù)2年的藥敏試驗(yàn)結(jié)果：

體外瓊脂擴(kuò)散藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，阿莫西林、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺嘧啶鈉及頭孢噻呋鈉最為敏感。在試驗(yàn)中，以阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻呋鈉的抑菌圈最為明亮且邊緣整齊，說(shuō)明抑菌或殺菌效果顯著。

4 討論

從本地分離到的野毒致病性鏈球菌，對(duì)阿莫西林、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺嘧啶鈉和頭孢噻呋鈉最為敏感，說(shuō)明上述藥物適于在發(fā)病時(shí)使用?？紤]到豬敗血型鏈球菌病死亡速度較快，在用藥治療時(shí)應(yīng)選擇作用迅速、敏感性高的藥物。實(shí)踐表明，阿莫西林和復(fù)合磺胺有較好的治療效果。