安立斌

（沈陽醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000）

血常規(guī)為臨床最為基本的一種血液檢驗方法，液體與有形細胞組成血液，采取血常規(guī)檢驗?zāi)軌驅(qū)ρ寒斨械募毎煞诌M行檢驗，與此同時在血液當中存在三種功能存在差異的細胞，即：紅細胞、白細胞以及血小板。通過血常規(guī)檢測，進一步對血液細胞的數(shù)量變化及形態(tài)分布情況，對疾病進行分析判斷[1]。在臨床診療工作中，血常規(guī)檢查是常規(guī)檢測手段，能夠為患者相關(guān)疾病患者的病情提供客觀、科學的有效依據(jù)。近年來，臨床研究表明：在臨床血常規(guī)檢測過程中，容易受到冷凝集干擾因素的影響。對于冷凝集素來說，屬抗紅細胞抗原的IgM抗體；當冷凝集素處于0～5 ℃條件下，會和人紅細胞產(chǎn)生凝集作用，通過加溫處理在超過25 ℃的情況下凝集會消除，當溫度降低則凝集會再次出現(xiàn)，對患者的自身血清與紅細胞根據(jù)比例混合之后，基于0～5 ℃的條件下，能夠觀察到凝集現(xiàn)象[2]。此外，國內(nèi)有學者經(jīng)研究表明，嚴重冷凝集標本會對血常規(guī)檢測的結(jié)果產(chǎn)生很大程度的影響，因此便有必要采取有效處理方法，確保血常規(guī)檢測結(jié)果的準確率[3]。鑒于此，本課題針對本次將我院于2017年1月至2018年1月收集的嚴重冷凝集血常規(guī)標本36份作為研究的對象（來自36例患者），其目的是分析探討嚴重冷凝集標本對血常規(guī)檢測結(jié)果的影響，具體研究成果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本次將我院于2017年1月至2018年1月收集的嚴重冷凝集血常規(guī)標本36份作為研究的對象（來自36例患者），均知情簽署相關(guān)診療同意書，且均經(jīng)醫(yī)學倫理委員會審批通過；其中，男性20例、女性16例；年齡9～72歲，平均為（46.8±1.3）歲；疾病類型為：8例為肺炎支原體感染患者、8例為肝硬化患者、10例為自身免疫性溶血性貧血患者、7例為系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者、3例為白血病患者。首次進血常規(guī)檢測，結(jié)果顯示存在顯著異常的問題，儀器顯示紅細胞凝集，且獲得血涂片證明。此外，因為嚴重冷凝集標本發(fā)生較少，所收集的標本在時間上存在差異，難以集中進行處理，所以在臨床工作過程中針對這些嚴重冷凝集標本采取了及時檢測的方法，并進一步對檢測數(shù)據(jù)進行詳細記錄。

1.2 方法：針對本次36份嚴重冷凝集血常規(guī)標本，考慮到擇優(yōu)選擇處理方法，因此采取了四種方法進行處理，起到對比的作用，包括：直接上機法，37 ℃水浴法，血漿置換法，預稀釋法。具體檢測方法步驟如下：①儀器及試劑的選取：本次在全自動血細胞分析儀方面，選擇由日本SYSMEX公司生產(chǎn)的XN-1000型號全自動血細胞分析儀，同時配套相應(yīng)的試劑及質(zhì)控品。針對儀器需每天進行常規(guī)維護保養(yǎng)處理措施，對于高、中、低質(zhì)控結(jié)果都在可控范圍內(nèi)。此外，選擇使用珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的瑞氏染液，并使用美國BD公司生產(chǎn)的真空采血管。②初步處理：于清晨空腹狀態(tài)，抽取患者外周靜脈血2 mL，采血過程選擇使用乙二胺四乙酸二鉀抗凝真空采血管，進一步進行完全混勻處理；對每1例患者分別采集標本2管，然后選擇上述提到的四種方法進行分別處理。③直接上機處理法：對每1例患者的2管標本采取直接上機檢測，最終檢測結(jié)果以平均值為標準。④37 ℃水浴處理法：選擇當中的1管血標本，置入37 ℃水浴箱當中，0.5 h之后及時進行上機檢測。

此外，采取上述方法對嚴重冷凝集標本進行檢測處理過程中，還需進行血涂片的制作，然后使用瑞氏染色后鏡檢，對血細胞凝集有無徹底解除進行觀察判斷。

1.3 評價標準：比較四種處理方法的血常規(guī)指標水平情況，包括：①紅細胞；②血紅蛋白；③白細胞；④血小板；⑤紅細胞壓積（HCT）；⑥平均紅細胞體積（MCV）；⑦紅細胞平均血紅蛋白量（MCH）；⑧紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）[4]。

1.4 統(tǒng)計學分析：本次使用統(tǒng)計學軟件SPSS21.0處理本次涉及的計量數(shù)據(jù)，計量數(shù)據(jù)使用（）表示，并用t檢驗，P＜0.05表示兩組數(shù)據(jù)具備明顯差異，具備統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 直接上機檢測結(jié)果分析：對于嚴重冷凝集標本，在沒有通過任何處理的情況下，采取直接上機檢測方法，出現(xiàn)儀器提示紅細胞凝集報警信號，其中紅細胞直方圖存在異常的大紅細胞波峰。與37 ℃水浴法、血漿置換法、預稀釋法比較，在紅細胞與HCT兩項指標方面均明顯更低（P＜0.05）；紅細胞與血紅蛋白之間的比重存在顯著差異，即判斷為異常（P＜0.05）；對于MCV、MCH、MCHC三項指標，和其他三種處理方法比較則明顯更高（P＜0.05）。此外，在鏡下進行觀測，發(fā)現(xiàn)血涂片存在大量紅細胞顯著聚集成團狀，在標本管內(nèi)壁經(jīng)肉眼能夠看到凝集顆粒，呈粗沙樣。見表1、表2。

2.2 37 ℃水浴處理方法檢測結(jié)果分析：血常規(guī)標本通過37實施的水浴處理方法在0.5 h之后進行及時上機檢測，結(jié)果顯示：儀器未發(fā)出警報信號，紅細胞與HCT結(jié)果接近正常水平，但是MCH與MCHC兩項指標水平與血漿置換法、預稀釋法比較均顯著更高（P＜0.05）。通過處理之后的血常規(guī)標本，經(jīng)圖片染色之后，通過鏡檢發(fā)現(xiàn)依然存在少量的紅細胞聚集，在血常規(guī)標本管內(nèi)壁，存在少量的凝集顆粒，呈現(xiàn)細沙樣。見表1、表2。

2.3 血漿置換法與預稀釋法結(jié)果對比分析：通過血漿置換法與預稀釋法處理之后的標本，在紅細胞凝集現(xiàn)象方面徹底消除，紅細胞、血紅蛋白、白細胞、HCT、MCV、MC、MCHC均接近正常水平；但是，血漿置換法基于操作期間有血小板丟失的ent存在，致使檢測結(jié)果與預稀釋法比較顯著更低，兩組數(shù)據(jù)差異具備統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1、下表2。

表1 四種方法的紅細胞、血紅蛋白、白細胞、血小板指標水平情況對比（，n＝36）

表1 四種方法的紅細胞、血紅蛋白、白細胞、血小板指標水平情況對比（，n＝36）

表2 四種方法的HCT、MCV、MC、MCHC指標水平情況對比（，n＝36）

表2 四種方法的HCT、MCV、MC、MCHC指標水平情況對比（，n＝36）

3 討論

對于冷凝集素綜合征來說，指的是因自身反應(yīng)性紅細胞在凝集的作用，同時受到外部溫度下降等原因的影響，進一步誘發(fā)的以慢性溶血性貧血疾病為主要特征的疾病，或以微循環(huán)栓塞為主要特征的疾病[5-6]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，大部分人的血清當中均具備冷凝集素，在效價上偏低，通常不會導致自身紅細胞的凝集[7]。然而，基于特定病理條件下，如自身免疫性溶血性貧血或者多發(fā)性骨髓瘤等病理作用下，冷凝集素的效價便會呈現(xiàn)劇烈上升的現(xiàn)象，進而導致病灶的出現(xiàn)。值得注意的是，對于冷凝集素，如果具備比較高的效價，其血液在離體之后隨著溫度的下降，冷凝集素和紅細胞抗原之間發(fā)生作用，會導致紅細胞自身產(chǎn)生凝集反應(yīng)，且此類凝集存在可逆的特點；如果溫度上升到一定的高度，所凝集的紅細胞便會發(fā)生自動解聚的現(xiàn)象。然而，如果冷凝集素的效價偏高，血常規(guī)標本就算處于37 ℃的水浴，然后經(jīng)過半小時的處理，還是會存在紅細胞平均血紅蛋白量（MCH）和紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）水平偏離正常水平的情況，使血細胞分析儀的檢測結(jié)果受到很大程度的影響；此次得出了與之較為相似的研究成果[8-9]。

近年來，國內(nèi)有學者對嚴重冷凝集標本對血常規(guī)檢測的結(jié)果影響進行分析，除直接上機進行血常規(guī)分析以外，還納入了三種處理方法，即37 ℃水浴法和血漿置換法還有預稀釋法，結(jié)果顯示，37 ℃水浴法的效果不理想，但是血漿置換法和預稀釋法的效果更為理想；最后，通過對比分析發(fā)現(xiàn)，血漿置換法和預稀釋法比較，血漿置換法存在血小板丟失的問題，因此綜合考慮選擇預稀釋法，從而使嚴重冷凝集標本得到有效處理，進一步使血常規(guī)檢測的質(zhì)量得到有效提高[10]。

在此次研究過程中，37 ℃水浴法、血漿置換法、預稀釋法比較，預稀釋法最優(yōu)，該方法需在1：7預稀釋條件下及時進行檢測處理，結(jié)果顯示能夠很好地解決血漿置換法血小板丟失的問題，從而保證后續(xù)血常規(guī)檢測結(jié)果的質(zhì)量水平。綜上所述：在臨床中，針對嚴重冷凝集標本血常規(guī)檢測方法較多，相對于直接上機法、37 ℃水浴法以及血漿置換法，預稀釋法在操作上更為便捷，進一步更能確保血常規(guī)檢測結(jié)果的準確率；因此，可擇優(yōu)選擇預稀釋法。