李利

（山東省萊西市店埠鎮(zhèn)衛(wèi)生院外科，山東 萊西）

0 引言

胃癌為起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，患病率在我國(guó)人群消化系統(tǒng)惡性腫瘤疾病中位居首位，多見(jiàn)于40-70歲的人群，具有治療難度大、復(fù)發(fā)率高、病死率高的特點(diǎn)[1]。手術(shù)治療長(zhǎng)期以來(lái)一直為我國(guó)臨床治療胃癌的常用方法，也是最有效的方法，但并不是所有胃癌患者均具有接受手術(shù)治療的機(jī)會(huì)，主要是因?yàn)槲赴┌l(fā)病早期的臨床癥狀不明顯和缺乏特征，確診時(shí)疾病多已發(fā)展至中晚期[2，3]。因此，有必要探索對(duì)胃癌臨床診治具有輔助價(jià)值的指標(biāo)，以進(jìn)一步提高疾病的早期確診率，指導(dǎo)疾病治療的及時(shí)開(kāi)展。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

研究對(duì)象為2018年9月至2020年2月在本院確診為胃癌的58例患者和同期來(lái)本院接受體檢的60例健康體檢者。將胃癌患者設(shè)為病患組，本組患者均具有手術(shù)治療指征，且均接受手術(shù)治療，其中男33例，女25例，年齡38-76歲，平均（57.85±3.29）歲，腫瘤TNM分期：Ⅰ期17例；Ⅱ期25例；Ⅲ期16例。將健康體檢者設(shè)為參照組，其中男32例，女28例，年齡35-75歲，平均（57.91±3.18）歲。對(duì)病患組和參照組的性別比例和年齡進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。研究對(duì)象均為自愿參與。

1.2 方法

病患組術(shù)前、術(shù)后1周各檢測(cè)一次血清P53、PCNA抗體，參照組僅檢測(cè)一次血清P53、PCNA抗體，兩種指標(biāo)的檢測(cè)方法均為間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，采集研究對(duì)象肘靜脈血3ml，離心機(jī)分離血清，保存在-80℃的冰箱中待測(cè)。血清P53和血清PCNA抗體檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海撫生實(shí)業(yè)有限公司，酶標(biāo)儀品牌為邁瑞（MR系列）。

1.2.1 血清P53檢測(cè)

按1∶5的比例使用稀釋液稀釋血液標(biāo)本，每孔中加入50μl，且各孔均做復(fù)孔，在37℃的溫度中溫育30min，甩出孔內(nèi)液體后，于每孔中加滿(mǎn)洗滌液，震蕩洗滌30s，棄洗滌液，使用吸水紙拍干，重復(fù)進(jìn)行上述操作4次。于每個(gè)反應(yīng)孔中加入50μl酶標(biāo)工作液，再次放置在37℃的溫度中溫育30min，甩出孔內(nèi)液體后，再次加滿(mǎn)洗滌液進(jìn)行洗滌、拍干。向反應(yīng)孔中加入顯色劑A液50μl，再加入顯色劑B液50μl，避光顯色15min，再向每個(gè)反應(yīng)孔中加入終止液，終止反應(yīng)，于450nm波長(zhǎng)測(cè)量各個(gè)反應(yīng)孔的吸光度。

1.2.2 血清PCNA抗體檢測(cè)

血液標(biāo)本稀釋方法及布孔均同血清P53，在37℃的溫度中溫育120min，甩出孔內(nèi)液體后，在每孔中加入100μl檢測(cè)溶液A，在37℃的溫度中反應(yīng)1h，棄孔內(nèi)液體，洗板3次，甩干后再向每孔中加入100μl檢測(cè)溶液B，繼續(xù)放置在37℃的溫度中反應(yīng)1h，棄孔內(nèi)液體，洗板5次后甩干。向每孔中加入90μl底物溶液，37℃的溫度中避光顯色，后續(xù)處理同血清P53。

1.3 觀察指標(biāo)

本研究的觀察指標(biāo)包括：（1）病患組、參照組的血清P53、PCNA抗體檢測(cè)結(jié)果；（2）病患組中不同腫瘤分期患者的血清P53、PCNA抗體檢測(cè)結(jié)果；（3）病患組術(shù)前、術(shù)后1周的血清P53、PCNA抗體檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件：SPSS22.0；計(jì)量資料的差異進(jìn)行LSD-t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料的差異進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為判定差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的檢驗(yàn)值。

2 結(jié)果

2.1 病患組、參照組的血清P53、PCNA抗體檢測(cè)結(jié)果比較

兩組血清P53、PCNA抗體陽(yáng)性率的組間差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），病患組均較參照組高，見(jiàn)表1。

表1 病患組、參照組的血清P53、PCNA抗體的陽(yáng)性率比較[n（%）]

2.2 病患組中不同腫瘤分期患者的血清P53、PCNA抗體檢測(cè)結(jié)果比較

病患組中腫瘤分期為Ⅲ期患者的血清P53、PCNA抗體陽(yáng)性率均最高，腫瘤分期為Ⅰ期患者的血清P53、PCNA抗體陽(yáng)性率均最低，不同腫瘤分期患者的上述指標(biāo)差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表 2。

表2 病患組中不同腫瘤分期患者的血清P53、PCNA抗體的陽(yáng)性率比較[n（%）]

2.3 病患組術(shù)前、術(shù)后1周的血清P53、PCNA抗體檢測(cè)結(jié)果比較

病患組術(shù)后1周的血清P53、PCNA抗體陽(yáng)性率均較術(shù)前低（P＜0.05），見(jiàn)表 3。

表3 病患組術(shù)前、術(shù)后1周的血清P53、PCNA抗體陽(yáng)性率比較[n（%）]

3 討論

血清P53和血清PCNA抗體與各種惡性腫瘤疾病的相關(guān)性近年來(lái)逐漸受到廣大研究學(xué)者的關(guān)注。本研究主要探討上述兩指標(biāo)檢測(cè)在胃癌臨床診斷和治療中的應(yīng)用價(jià)值，結(jié)果證實(shí)了血清P53、PCNA抗體的陽(yáng)性表達(dá)與胃癌的發(fā)生和發(fā)展均存在相關(guān)性。

早期已有較多研究證實(shí)，血清P53對(duì)食管癌、乳腺癌等惡性腫瘤疾病的發(fā)生和發(fā)展均具有較明顯的促進(jìn)作用，具體機(jī)制為P53基因能夠修復(fù)細(xì)胞DNA損傷，保護(hù)腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖[4，5]。本研究發(fā)現(xiàn)，P53基因?qū)ξ赴┠[瘤細(xì)胞損傷也具有修復(fù)作用，故也會(huì)出現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)率上升的狀態(tài)。血清PCNA抗體是一種僅在增殖細(xì)胞內(nèi)合成和表達(dá)的多肽，當(dāng)體內(nèi)有明顯的細(xì)胞增殖時(shí)，該抗體的表達(dá)也會(huì)明顯增加[6]。胃癌的發(fā)生和發(fā)展中，腫瘤細(xì)胞增殖是必然的過(guò)程，故該抗體的陽(yáng)性表達(dá)率也會(huì)明顯上升。

綜上所述，血清P53、PCNA抗體的檢測(cè)結(jié)果能夠?yàn)榕R床胃癌的診斷、病情及治療反應(yīng)評(píng)估提供一定程度的輔助價(jià)值，兩指標(biāo)均可作為臨床診治胃癌的必要檢測(cè)指標(biāo)[7,8]。