趙 霞 曹改萍 王 敏 岳愛(ài)琴 張永坡 高春艷 牛景萍 趙晉忠 杜維俊

(山西農(nóng)業(yè)大學(xué)1，太谷 030801)(山西省農(nóng)業(yè)種子總站2，太原 030000)

大豆作為我國(guó)糧油兼用作物，具有重要的營(yíng)養(yǎng)、保健和工業(yè)價(jià)值。在大健康背景下，我國(guó)農(nóng)業(yè)將從高產(chǎn)農(nóng)業(yè)、綠色農(nóng)業(yè)進(jìn)入到功能農(nóng)業(yè)發(fā)展階段，農(nóng)產(chǎn)品的市場(chǎng)結(jié)構(gòu)和消費(fèi)需求將發(fā)生重要變化，飲食已向營(yíng)養(yǎng)健康安全方向發(fā)展，而發(fā)芽大豆正好能滿足人們的這些需求。同時(shí)，發(fā)芽大豆制品的加工與應(yīng)用能幫助提高大豆生產(chǎn)的附加值，充分利用現(xiàn)有農(nóng)業(yè)資源。發(fā)芽大豆作為一種新的“醫(yī)食同源”的功能性主食，對(duì)于提高人民生活質(zhì)量有著重要的作用。豆芽在生產(chǎn)的過(guò)程中，進(jìn)行著一系列的物質(zhì)轉(zhuǎn)化。例如，在水解酶的作用下，將高分子貯藏的物質(zhì)轉(zhuǎn)為可溶性的、人體易吸收的簡(jiǎn)單物質(zhì)。研究表明，大豆在萌芽過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)成分和生物活性成分均有提高。

維生素E具有獨(dú)特的生理功能，對(duì)人體健康至關(guān)重要。維生素E，又叫做生育酚(Tocopherol)，是一種可溶于有機(jī)溶劑的粘稠油狀淡黃色物質(zhì)，主要存在于植物油中，富集于谷物種子的胚芽油及大豆油等油脂中[1，2]，因苯環(huán)上取代基的甲基位置和數(shù)量不同有四種生育酚和四種生育三烯酚存在。生育酚主要存在于植物體內(nèi)，動(dòng)物油脂中含量極低[3]。迄今為止，自然界已知維生素有 α、β、γ、δ-生育酚和及其相應(yīng)的三烯生育酚共8種異構(gòu)體。大豆中只含有4種生育酚，且β-生育酚只占總維生素E含量的1%[4，5]。因α-生育酚的生物活性和抗氧化能力最強(qiáng)，通常將α-生育酚作為維生素的代表對(duì)其進(jìn)行各種生理生化功能的研究[6，9]。天然維生素E主要存在于以大豆為代表的油料作物中。大豆品種及其制品維生素E含量變化規(guī)律對(duì)于充分利用大豆資源附加值至關(guān)重要。富集維生素E含量芽豆品種是大豆品質(zhì)育種的重要研究?jī)?nèi)容之一。花生中生育酚含量在發(fā)芽前2～3 d明顯增加之后開始下降，變化幅度因品種而異[10]。目前關(guān)于萌芽過(guò)程中大豆維生素E組分及含量動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的研究還鮮見(jiàn)報(bào)道，本研究通過(guò)對(duì)大豆發(fā)芽期間維生素E組分及含量進(jìn)行檢測(cè), 比較發(fā)芽期間各組分及含量的變化, 以期為篩選萌芽過(guò)程富積維生素E組分的大豆優(yōu)良品種以及萌芽大豆功能食品開發(fā)提供了一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

依托山西農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆種質(zhì)資源圃，選擇8種不同類型的栽培大豆，詳情見(jiàn)表1。

表1 各品種栽培大豆的基本表征

1.2 主要儀器與試劑

1260型高效液相色譜儀；GT200型震動(dòng)球磨儀；ATS.D5-2M型真空冷凍干燥機(jī)；KM-300DE型超聲震蕩清洗器；MultiVap-8型平行濃縮儀；QL-901 Vortex型旋渦混合器；BIC-400型人工氣候箱。

α、γ、δ-生育酚標(biāo)準(zhǔn)品，純度均≥98%；甲醇，為HPLC級(jí)；抗壞血酸、70%乙醇、正己烷、次氯酸鈉，為分析純。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 大豆籽粒發(fā)芽

采用培養(yǎng)皿濾紙法進(jìn)行萌發(fā)實(shí)驗(yàn)。挑選外觀飽滿、大小一致、無(wú)蟲蛀、無(wú)霉變的新鮮大豆種子，用清水去除表面雜質(zhì)。用0.1% NaClO溶液浸泡10 min進(jìn)行消毒，蒸餾水清洗3次后，在25 ℃條件下蒸餾水(料液比1∶2)中浸泡6 h。取滅菌培養(yǎng)皿(直徑12 cm)于其中鋪設(shè)2層濾紙，將處理后種子均勻放置其中，每皿分別放置50粒，每個(gè)品種8個(gè)培養(yǎng)皿，每組設(shè)置3次重復(fù)。將處理好的培養(yǎng)皿放入人工氣候箱中培養(yǎng)，萌發(fā)條件為黑暗、25 ℃、相對(duì)濕度為80%。每隔24 h更換培養(yǎng)皿的蒸餾水，整個(gè)發(fā)芽期為7 d，每隔24 h取樣，置于-20 ℃冰箱中24 h，再放入真空冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥48 h，后將樣品使用球磨儀磨成粉，真空包裝后置25 ℃ 干燥箱保存用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；同時(shí)每天進(jìn)行大豆發(fā)芽數(shù)和胚根長(zhǎng)的統(tǒng)計(jì)。

1.3.2 維生素E組分測(cè)定1.3.2.1 樣品前處理

本實(shí)驗(yàn)的方法基于李海燕等[11]的方法略有改動(dòng)。準(zhǔn)確稱取0.100 g大豆凍干粉于10 mL離心管中，加入0.125 0 g抗壞血酸，加70%乙醇溶液，震蕩混勻15 s后超聲震蕩提取20 min，加入6 mL正己烷，震蕩混勻20 s后超聲震蕩萃取15 min，12 000r/min離心8 min，使用平行濃縮儀用N2將上清液吹干，復(fù)溶于1 mL甲醇中，過(guò)0.22 μm濾膜于液相色譜專用小瓶中待測(cè)。

1.3.2.2 色譜條件

利用高效液相色譜技術(shù)(HPLC)，采用外標(biāo)法對(duì)維生素E各組分進(jìn)行定量分析。色譜柱：ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×250 mm，0.5 μm)；流動(dòng)相：甲醇；流速：1 mL/min；柱溫：35 ℃；進(jìn)樣量：20 μL；二極管陣列檢測(cè)器(DAD檢測(cè)器)：檢測(cè)波長(zhǎng)295 nm；運(yùn)行時(shí)間：12 min。以α、γ、δ-生育酚的峰面積代入回歸方程進(jìn)行定量分析[12,13]。

1.3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的確定

精密稀釋五個(gè)濃度梯度的α、δ、γ-生育酚標(biāo)準(zhǔn)品，在選定的色譜條件下分別進(jìn)樣，以濃度X(μg/mL) 對(duì)峰面積Y作圖，用Excel軟件進(jìn)行回歸擬合，即得到α、δ、γ-生育酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。

1.3.2.4 維生素E組分含量的計(jì)算

根據(jù)各生育酚峰的回歸方程，可計(jì)算得到待測(cè)溶液中各生育酚的濃度c，進(jìn)一步計(jì)算得到樣品中各生育酚的含量Xi。

式中：Xi為樣品中大豆維生素E組分的含量/μg/g；c為樣品中各生育酚濃度/μg/mL；V為樣品總體積/mL；m為樣品質(zhì)量，樣品為脫水大豆粉/g。

1.3.3 發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)測(cè)定

大豆種子發(fā)芽率=(發(fā)芽大豆種子數(shù)量/供試大豆種子數(shù)量)×100%

大豆種子發(fā)芽勢(shì)=(第3天發(fā)芽大豆種子數(shù)量/供試大豆種子數(shù)量)×100%

1.3.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析與處理

采用Graph Pad Prism 5、SPSS、Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性關(guān)系及檢出限

配制不同濃度梯度的α、γ、δ-生育酚標(biāo)準(zhǔn)品溶液經(jīng)HPLC分析后，以濃度X(μg/mL) 對(duì)峰面積Y作圖，用Excel軟件進(jìn)行回歸擬合，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程，以信噪比S/N=3計(jì)算，測(cè)得α、γ、δ-生育酚的檢出限，見(jiàn)表2。標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC色譜圖見(jiàn)圖1。

表2 生育酚HPLC測(cè)定時(shí)濃度X(μg/mL)與峰面積Y的關(guān)系

2.2 回收率和精密度

將α、γ、δ-生育酚標(biāo)準(zhǔn)品分別稀釋到一個(gè)低濃度下經(jīng)HPLC測(cè)定其峰面積，重復(fù)6次。經(jīng)計(jì)算得出回收率的范圍為96.9%～101.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于2，可用于維生素E各組分的定量分析，詳情見(jiàn)表3。

表3 回收率和精密度測(cè)定結(jié)果

2.3 大豆萌發(fā)期各指標(biāo)的變化

2.3.1 大豆萌發(fā)期間發(fā)芽率及發(fā)芽勢(shì)的變化

由圖2可知，各大豆材料萌發(fā)期間發(fā)芽率變化趨勢(shì)基本一致，均呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)，大豆發(fā)芽率變化分兩個(gè)階段，即前3 d快速增加階段和3～7 d緩慢增加階段。且前期增長(zhǎng)幅度大于后期。這種情況可能與前期萌動(dòng)活躍有關(guān)。趙甲慧[14]研究表明，大豆發(fā)芽時(shí)在前36 h 處于緩慢生長(zhǎng)階段，在36～72 h時(shí)處于快速生長(zhǎng)階段，這種情況是大豆內(nèi)源酶活力不斷增強(qiáng)的結(jié)果。不同品種發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)增加速度存在差異，統(tǒng)計(jì)分析表明黃色種皮大豆的發(fā)芽率顯著低于黑色種皮和綠色種皮大豆。其中PJ2491的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均最高，晉大53的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)相對(duì)低于其他品種，反映了不同品種發(fā)芽相關(guān)基因組成的差別。

圖2 各品種大豆萌發(fā)期間發(fā)芽率

2.3.2 大豆萌發(fā)期間胚根長(zhǎng)的變化

由圖3可知，各材料萌發(fā)期間胚根長(zhǎng)度的變化呈現(xiàn)逐漸遞增趨勢(shì)，這種情況是發(fā)芽過(guò)程中代謝酶活性逐漸增加表現(xiàn)。但不同材料增加幅度不同，且從大到小依次為PJ2491>SZ849>晉豆19>SZ958>武鄉(xiāng)小黑豆>SZ910>晉大53>汾豆78。表明發(fā)芽過(guò)程中胚根生長(zhǎng)存在品種基因型的差異。統(tǒng)計(jì)分析表明黃色種皮大豆的胚根長(zhǎng)顯著低于黑色種皮和綠色種皮大豆。

圖3 各品種大豆萌發(fā)期間胚根長(zhǎng)

2.3.3 大豆萌發(fā)期間維生素E各組分的變化

由圖4可知，8份大豆材料萌發(fā)期間α-生育酚含量變化趨勢(shì)不同。兩個(gè)綠仁大豆SZ910 和SZ958的α-生育酚含量在發(fā)芽第1天時(shí)α-生育酚含量達(dá)到最大值，分別為123.6 μg/g和92.5 μg/g，較干種子增幅分別為28.9%和26.9%。其中，黑皮綠仁大豆SZ910整個(gè)發(fā)芽期間呈現(xiàn)出先增后減的趨勢(shì)，綠皮綠仁大豆SZ958呈現(xiàn)出先增后減再增的趨勢(shì)。綠仁大豆萌發(fā)過(guò)程中維生素E含量整體呈下降趨勢(shì)，這與Liu等[15]研究甜玉米在黑暗條件下發(fā)芽過(guò)程維生素E含量變化趨勢(shì)一致。黃仁大豆除晉豆19號(hào)表現(xiàn)為先減后增的趨勢(shì)外，其他品種萌發(fā)期間α-生育酚含量呈現(xiàn)平緩上升趨勢(shì)，均在萌發(fā)后第7天，α-生育酚含量最高，這與花生[16]、南瓜籽研究相符合[17]。不同大豆材料萌發(fā)期間α-生育酚含量變化存在差異，表明α-生育酚含量與種皮和種仁色存在一定相關(guān)，也與品種和具體發(fā)芽狀態(tài)有一定關(guān)系。

圖4 各品種大豆萌發(fā)期間α-生育酚含量

由圖5可知，8份大豆材料萌發(fā)期間，武鄉(xiāng)小黑豆的γ-生育酚含量呈現(xiàn)出先增后減再增的趨勢(shì)，萌發(fā)后第7天含量最高，為66.0 μg/g。晉豆19與SZ849呈現(xiàn)出先減后增的趨勢(shì)，含量最高在第7天，分別為95.4、67.1 μg/g。其他材料均呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)，其中綠皮黃仁PJ2491的γ-生育酚含量于第4天達(dá)到最大值，為117.3 μg/g。表明γ-生育酚含量與品種和具體發(fā)芽狀態(tài)有一定關(guān)系。

圖5 各品種大豆萌發(fā)期間γ-生育酚含量

由圖6可知，除SZ849外，其他材料萌發(fā)期間δ-生育酚含量變化趨勢(shì)大致相同。SZ849呈現(xiàn)出先減后增再減的趨勢(shì)，萌發(fā)前干種子中δ-生育酚含量最高，為30.3 μg/g。其他材料均呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)，其中SZ910的δ-生育酚在整個(gè)時(shí)期均高于其他材料，萌發(fā)后第2天達(dá)到最大值，為48.3 μg/g。表明δ-生育酚含量與品種和具體發(fā)芽狀態(tài)有一定關(guān)系。

圖6 各品種大豆萌發(fā)期間δ-生育酚含量

由圖7可知，8份大豆材料萌發(fā)期間維生素E總含量最高的為SZ910，于第1天達(dá)到最大值，為237.1 μg/g，呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)。晉豆19與之變化趨勢(shì)相反，萌發(fā)后第7天總維生素E含量最高，為174.3 μg/g。SZ958與晉大53呈現(xiàn)先增后減再增的趨勢(shì)，武鄉(xiāng)小黑豆與其變化趨勢(shì)相反。PJ2491在萌發(fā)期間總維生素E含量呈現(xiàn)持續(xù)增加的趨勢(shì)，于第7天含量達(dá)到最大值，為193.7 μg/g。汾豆78與SZ849在整個(gè)萌發(fā)過(guò)程中總維生素E變化不顯著。表明維生素E總含量與品種和具體發(fā)芽狀態(tài)有一定關(guān)系。

2.4 大豆不同品種不同萌發(fā)期間各生育酚含量比較

2.4.1 不同種仁色大豆不同萌芽時(shí)期各維生素組分及含量比較

由圖8可知，不同大豆材料萌發(fā)過(guò)程中維生素E及其各組分的含量存在較大差異，黃仁大豆萌發(fā)期間γ-生育酚含量大于α-和δ-生育酚含量；綠仁大豆各組分含量表現(xiàn)為α-生育酚>γ-生育酚>δ-生育酚含量。黃仁大豆與綠仁大豆萌發(fā)過(guò)程中不同時(shí)期的α-生育酚含量之間均有極顯著差異，且各時(shí)期的α-生育酚含量表現(xiàn)為綠仁大豆顯著高于黃仁大豆。黃仁大豆萌芽期較干種子α-生育酚含量增幅范圍在-23.2%～46.3%，綠仁大豆較干種子增幅范圍為-17.1%～28.1%。萌發(fā)過(guò)程中黃仁大豆的γ-生育酚含量高于綠仁大豆，其中，第0、6、7天的黃仁大豆與綠仁大豆的γ-生育酚含量之間具有顯著差異，其他時(shí)間之間的差異未達(dá)到顯著水平。黃仁大豆和綠仁大豆二者萌發(fā)期的γ-生育酚含量較干種子比較增幅不同，增幅范圍分別為-1.4%～8.8%和10.3%～23.2%。萌發(fā)過(guò)程中綠仁大豆的γ-生育酚含量高于黃仁大豆, 黃仁大豆與綠仁大豆萌發(fā)過(guò)程中不同時(shí)期的δ-生育酚含量之間差異均未達(dá)到顯著水平，二者萌發(fā)期的γ-生育酚含量較干種子增幅也不同，增幅范圍分別為11.5%～23.7%和10.3%～19.2%。這進(jìn)一步證明維生素E組分含量與大豆種仁顏色相關(guān)。這一結(jié)果與Ng等[18]研究結(jié)果相似，發(fā)芽過(guò)程中黑米維生素E含量高于白米。不同種仁色材料發(fā)芽階段維生素E組成含量呈現(xiàn)不同變化趨勢(shì)，這可能與它們自身的代謝特點(diǎn)以及大豆萌發(fā)不同階段對(duì)不同組分的需求不同有關(guān)。

注：圖中不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。余同。

2.4.2 不同種皮顏色大豆不同萌芽時(shí)期各維生素E組分及含量比較

如圖9a所示，萌發(fā)期間各顏色種皮大豆的α-生育酚含量之間均未達(dá)到顯著水平，各時(shí)期α-生育酚含量整體表現(xiàn)為綠色種皮大豆>黑色種皮大豆>黃色種皮大豆。如圖9b所示第1、4、5天的黑色種皮大豆與綠色種皮大豆的γ-生育酚含量之間具有顯著差異，其他時(shí)期均未達(dá)到顯著水平，黑色種皮大豆中γ-生育酚含量明顯低于黃色和綠色種皮大豆，在萌發(fā)第4天綠色種皮大豆的γ-生育酚含量達(dá)到最大值為61.5 μg/g。如圖9c所示大豆萌發(fā)過(guò)程中僅第0天黃皮大豆與黑皮大豆的δ-生育酚含量之間有顯著差異，其他時(shí)期均未達(dá)到顯著水平。這一結(jié)果進(jìn)一步證明維生素E組分含量與大豆種皮顏色相關(guān)。

圖9 不同種皮顏色大豆萌芽各時(shí)期維生素E組分及含量的比較

3 討論

3.1 HPLC法測(cè)定維生素E組分及含量的準(zhǔn)確性

本研究結(jié)果表明，維生素E各組分的標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2值均達(dá)到了0.999 7以上，維生素E各組分的回收率介于96.9%～101.2%之間，測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性和精密度良好，可以準(zhǔn)確定量維生素E的含量，這與王麗等[2]研究生育酚異構(gòu)體回收率的結(jié)果一致。

3.2 大豆萌發(fā)期維生素E組分含量變化及其原因分析

8份大豆材料籽粒維生素E及其組分含量品種間及不同萌發(fā)期間差異較大。在發(fā)芽的某個(gè)或某些階段維生素E組分含量基本上都發(fā)生了明顯增加。但總體變化趨勢(shì)不一致，體現(xiàn)了品種和發(fā)芽階段的差異性。發(fā)芽后，維生素E組分含量變化原因可能多方面的。推測(cè)可能的原因?yàn)椋?)發(fā)芽過(guò)程中各種代謝酶活性增強(qiáng)，促進(jìn)了維生素E組分合成前體轉(zhuǎn)化為維生素E；2)發(fā)芽過(guò)程中，受到外界環(huán)境條件的誘導(dǎo)，苯丙氨酸合成途徑開啟，合成苯丙氨酸和其他相關(guān)酚類物質(zhì)；3)發(fā)芽過(guò)程中受外界條件的脅迫產(chǎn)生更多自由基，也將消耗更多具抗氧化活性的成分。前2個(gè)原因使維生素E組分含量檢測(cè)值升高，而第3個(gè)原因使其含量降低。三者協(xié)同作用表現(xiàn)出發(fā)芽期維生素E組分含量變化。維生素E是一種很強(qiáng)的脂溶性抗氧化劑，而非酶脂質(zhì)在幼苗生長(zhǎng)發(fā)育早期的氧化損傷發(fā)揮了重要的抑制作用[19]。有研究表明發(fā)芽糙米多酚提取物清除羥基自由基、超氧陰離子和還原能力分別比糙米原料高40%、 24.34%、-1.84倍, 對(duì)延緩植物油脂的酸敗效果明顯好于原料糙米。有研究表明，維生素E的積累與植株受到的脅迫程度、脅迫的敏感程度以及植株自身的生理狀態(tài)有關(guān)[20,21]。本研究采用不同種皮色和種仁色大豆為材料，檢測(cè)到大豆維生素E組分在萌發(fā)前后發(fā)生了明顯的變化，這基本反映了維生素E組分的變化趨勢(shì)。而對(duì)于維生素E組分在萌發(fā)前后的變化機(jī)理尚不清楚，有待于繼續(xù)分析。

3.3 大豆萌發(fā)期間各生育酚含量與品種種仁和種皮色的關(guān)系

大豆萌發(fā)期間黑皮綠仁大豆SZ910的α-生育酚含量顯著高于其他品種，這與劉婷婷等[22]研究發(fā)芽綠豆的總酚含量高于其他顏色大豆的結(jié)果一致，與鞏藹等[23]研究云南特色綠豆類的酚類含量高于白豆類結(jié)果一致。大豆萌發(fā)過(guò)程中綠仁大豆的α-生育酚與總維生素E含量較高，表明綠仁大豆萌發(fā)過(guò)程中比其他品種富含維生素E。而γ-生育酚與δ-生育酚含量變化趨勢(shì)差異較大，這與Fernandez等[24]的研究結(jié)果相似，說(shuō)明其他生育酚含量的變化取決于大豆的品種。

大豆萌發(fā)過(guò)程中，黃仁大豆的α-生育酚含量在第7天時(shí)達(dá)到最大值，較干種子中α-生育酚含量增幅46.3%，這與Zhou等[25]、王琳珍[26]分別研究苦蕎、黃豆萌發(fā)期間α-生育酚含量變化趨勢(shì)相似。綠仁大豆的α-生育酚含量在第1天達(dá)到最大值，較干種子中α-生育酚含量增幅25.4%，且任何時(shí)期整體表現(xiàn)為綠仁大豆含量高于黃仁大豆。大豆萌發(fā)過(guò)程中，其生長(zhǎng)發(fā)育完全依賴于自身儲(chǔ)存的脂質(zhì)代謝來(lái)提供能量，本研究猜測(cè)萌發(fā)期間綠仁大豆α-生育酚含量達(dá)到最大值比黃仁大豆α-生育酚含量達(dá)到最大值的時(shí)間早，可能是因?yàn)槊劝l(fā)早期綠仁大豆抵御外界脅迫及自身調(diào)節(jié)能力弱有關(guān)，黃仁大豆的α-生育酚含量萌發(fā)期間呈遞增趨勢(shì)，可能與其自身生長(zhǎng)發(fā)育慢，易發(fā)霉有關(guān)。α-生育酚除了在動(dòng)物繁殖中起著至關(guān)重要的作用外，還被證明對(duì)人類健康有著有益的作用[27]，尤其是可以提高生育能力[28]，抑制肺癌[29]，延緩大腦老化和降低阿爾茨海默病的風(fēng)險(xiǎn)[30]，抑制膽固醇的生成[31,32]。因此，大豆芽在制備過(guò)程中可根據(jù)不同仁色大豆而選擇α-生育酚含量最高的時(shí)間進(jìn)行培育。

綠色種皮大豆中的γ-生育酚含量相較高于其他顏色種皮大豆，而γ-生育酚在預(yù)防閉塞性血栓形成方面比α-生育酚更有效[33]，因此，若需選育高γ-生育酚含量的大豆品種可根據(jù)大豆種皮顏色進(jìn)行選擇。萌發(fā)期間綠色和黑色種皮顏色大豆中δ-生育酚含量較高于黃色種皮大豆，有研究表明，δ-生育酚對(duì)于前列腺防治[34]、乳腺癌防治[35]等疾病具有更顯著的功效，因此，若選育高δ-生育酚含量的大豆品種可選擇綠色和黑色種皮大豆。

4 結(jié)論

HPLC法測(cè)定大豆維生素E組分及含量的結(jié)果重現(xiàn)性和精密度良好，可以準(zhǔn)確定量大豆維生素E組分及含量。不同大豆材料萌發(fā)過(guò)程中維生素E及其各組分的含量存在較大差異，黃仁大豆萌發(fā)期間γ-生育酚含量大于α-和δ-生育酚含量；綠仁大豆各組分含量表現(xiàn)為α-生育酚>γ-生育酚>δ-生育酚含量。大豆發(fā)芽后α-生育酚含量都較干種子增加，其中黃仁大豆在發(fā)芽第7天的α-生育酚含量最高，綠仁大豆在第1天含量最高，并且綠仁大豆所含α-生育酚含量顯著高于黃仁大豆，而綠色種皮和黃色種皮大豆的γ-生育酚高于黑色種皮大豆。本研究為育種工作者篩選萌芽過(guò)程富積維生素E組分及含量的大豆優(yōu)良品種以及萌芽大豆功能食品開發(fā)提供了一定的參考依據(jù)。