邵婧

（信陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 信陽 464000）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種慢性炎癥性結(jié)締組織病，可引起多系統(tǒng)受累，可產(chǎn)生致病的自身抗體，易造成腎臟等器官廣泛損害，對(duì)患者健康與生活造成較大影響［1］。系統(tǒng)性紅斑狼瘡特點(diǎn)包括免疫復(fù)合物沉積、多克隆自身抗體大量產(chǎn)生、B 淋巴細(xì)胞功能亢進(jìn)等，而人體T 淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)B 淋巴細(xì)胞異常，T 細(xì)胞亞群異常可能在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用［2］。目前，關(guān)于T 淋巴細(xì)胞亞群異常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病的作用機(jī)制研究結(jié)果尚不統(tǒng)一，外周血T 淋巴細(xì)胞亞群與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度相關(guān)性的研究較少［3］。基于此，本研究分析外周血T 淋巴細(xì)胞亞群與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度的相關(guān)性，以期為臨床治療提供參考經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析 2017 年 12 月至 2018 年12 月在信陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院附屬醫(yī)院進(jìn)行治療的80 例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者臨床資料，根據(jù)系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)指數(shù)（SLEDAI） 評(píng)分將其分為高度活動(dòng)組 20 例（SLEDAI 評(píng)分≥10 分）、低度活動(dòng)組 32 例（SLEDAI 評(píng)分 5～9 分）與穩(wěn)定組 28 例（SLEDAI 評(píng)分0～4 分）；選取同期20 例體檢健康人群為對(duì)照組。高度活動(dòng)組男12 例，女8 例；年齡20～76 歲，平均（36.53±9.42）歲；體質(zhì)量指數(shù)19.2～24.7kg/m2，平均（22.53±1.21） kg/m2；病程 1 個(gè)月至 6 年，平均（2.64±0.74） 年；SLEDAI 評(píng)分 10～15 分，平均（12.42±0.37） 分。低度活動(dòng)組男 18 例，女 14 例；年齡22～78 歲，平均（36.44±9.50） 歲；體質(zhì)量指數(shù) 18.9～24.9 kg/m2，平均 （22.55±1.24） kg/m2；病程2 個(gè)月至7 年，平均（2.72±0.88） 年；SLEDAI評(píng)分5～9 分，平均（7.35±0.66） 分。穩(wěn)定組男15例， 女 13 例； 年齡 22～78 歲， 平均 （36.61±9.47） 歲 ； 體 質(zhì) 量 指 數(shù) 19.1～24.9 kg/m2， 平 均（22.49±1.15） kg/m2；病程 2 個(gè)月至 7 年，平均（2.80±0.85） 年 ； SLEDAI 評(píng) 分 0～4 分 ， 平 均（2.38±0.25） 分。對(duì)照組男11 例，女9 例；年齡21～77 歲，平均 （36.59±9.47） 歲；體質(zhì)量指數(shù)19.3～24.8 kg/m2，平均（22.47±1.18） kg/m2。四組研究對(duì)象年齡、性別、身體質(zhì)量指數(shù)資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究符合醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)要求。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者符合《系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷及治療指南》［4］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)血常規(guī)檢查、X 射線檢查、支原體培養(yǎng)檢查確診；凝血功能正常；臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在精神障礙者；合并糖尿病、內(nèi)分泌功能異常、心功能異常者；妊娠期或哺乳期婦女。

1.3 方法

采集2 mL 外周血標(biāo)本，進(jìn)行乙二胺四乙酸二鉀抗凝后在實(shí)驗(yàn)管內(nèi)加入100 μL 與空白對(duì)照，實(shí)驗(yàn)管內(nèi)標(biāo)本進(jìn)行流式細(xì)胞儀法， 將藻紅蛋白（CD8-PE） 鼠抗人單克隆抗體、異硫氰酸熒光素（CD4-FITC） 與多甲藻葉綠素蛋白（CD3-Per-CP）加入，在4℃下孵育，時(shí)間為30 min。染色后，將2 mL 紅細(xì)胞裂解液加入實(shí)驗(yàn)管與空白對(duì)照管，混勻，在室溫下進(jìn)行孵育，時(shí)間為15 min，1 500 r/min離心2 次，時(shí)間為3 min，將600 μL 的多聚甲醛固定液加入其中并混勻，最終制成單細(xì)胞懸液進(jìn)行分析，測定 CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s） 表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，采用雙變量Spearman 直線相關(guān)性分析外周血T 淋巴細(xì)胞亞群與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度的相關(guān)性。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組T 淋巴細(xì)胞水平比較

高度活動(dòng)組CD3＋CD4＋低于低度活動(dòng)組、穩(wěn)定組、對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高度活動(dòng)組CD3＋CD8＋高于低度活動(dòng)組、穩(wěn)定組、對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 三組T 淋巴細(xì)胞水平比較 （ ± s, %）

表1 三組T 淋巴細(xì)胞水平比較 （ ± s, %）

注：?與高度活動(dòng)組比較，P＜0.05。

組別高度活動(dòng)組低度活動(dòng)組穩(wěn)定組對(duì)照組F值P值CD3＋CD8＋37.34±2.63 35.25±2.39?32.48±1.45?30.33±2.18?42.676 0.000 n 20 32 28 20 CD3＋CD4＋30.33±2.18 33.28±1.63?39.40±2.99?52.11±1.00?438.197 0.000

2.2 T 淋巴細(xì)胞水平與疾病活動(dòng)度相關(guān)性

經(jīng) Spearman 分析發(fā)現(xiàn)，CD3＋CD4＋與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.914,P=0.000）；CD3＋CD8＋與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度呈正相關(guān)（r=0.752,P=0.000）。

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡屬于自身免疫性疾病，可累及多系統(tǒng)，對(duì)多種器官造成廣泛損害，嚴(yán)重影響患者生命安全與身心健康，臨床應(yīng)及時(shí)對(duì)其進(jìn)行診治，以減少預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)［5-6］。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病時(shí)，機(jī)體自身免疫耐受機(jī)制在多種因素作用下受到破壞，表現(xiàn)為體液免疫的亢進(jìn)，引起B(yǎng) 淋巴細(xì)胞過度增殖和功能亢進(jìn)，從而促進(jìn)多克隆免疫球蛋白等多種自身抗體大量產(chǎn)生，造成組織損傷，而B 淋巴細(xì)胞的高度活化可能與T 淋巴細(xì)胞異常有關(guān)［7-8］。人體T 淋巴細(xì)胞亞群調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，使其趨于平穩(wěn)，而T 淋巴細(xì)胞免疫功能異常主要表現(xiàn)為CD4＋與CD8＋亞群水平的異常，因此，CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋異?？稍谝欢ǔ潭壬戏从砊 淋巴細(xì)胞免疫功能的異常［9］。本研究結(jié)果顯示，高度活動(dòng)組 CD3＋CD4＋低于低度活動(dòng)組、穩(wěn)定組、對(duì)照組，CD3＋CD8＋高于低度活動(dòng)組、穩(wěn)定組、對(duì)照組；經(jīng)Spearman 分析發(fā)現(xiàn)，CD3＋CD4＋與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度呈負(fù)相關(guān)，CD3＋CD8＋與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度呈正相關(guān)。結(jié)果提示，外周血T 淋巴細(xì)胞亞群與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度具有相關(guān)性，T 細(xì)胞亞群檢測可作為系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)的參考指標(biāo)。分析其原因可能為：由于CD8＋細(xì)胞亞群存在顯著異質(zhì)性，疾病活動(dòng)度較高的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者CD8＋細(xì)胞被反抑制性T 細(xì)胞取代，其抑制功能無法顯示，因此其CD4＋細(xì)胞的抑制受到阻斷，但反抑制性T 細(xì)胞可通過直接對(duì)Th 細(xì)胞發(fā)揮作用，通過正向調(diào)節(jié)促進(jìn)CD8＋細(xì)胞含量增長，因此高度活動(dòng)組CD3＋CD8＋高于低度活動(dòng)組、穩(wěn)定組、對(duì)照組［10］。另一方面，由于疾病活動(dòng)度較高的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者CD4＋亞群中的抑制誘導(dǎo)T 淋巴細(xì)胞降低，T 淋巴細(xì)胞無法誘導(dǎo)CD8＋細(xì)胞抑制B 淋巴細(xì)胞，造成患者CD4＋細(xì)胞減少，CD8＋細(xì)胞增多，因此高度活動(dòng)組CD3＋CD4＋低于低度活動(dòng)組、穩(wěn)定組、對(duì)照組［11］。儲(chǔ)薈等［12］研究發(fā)現(xiàn)，系統(tǒng)性紅斑狼瘡活動(dòng)組患者外周血中，隨著外周Ⅱ型天然淋巴細(xì)胞百分比例的增多，CD4＋T 淋巴細(xì)胞比例明顯下降，二者呈負(fù)相相關(guān)，說明T 淋巴細(xì)胞異常表達(dá)與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度相關(guān)，與本研究結(jié)果相符。

綜上所述，系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者存在T 淋巴細(xì)胞異常表達(dá)，CD3＋CD4＋與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者疾病活動(dòng)度呈負(fù)相關(guān)，CD3＋CD8＋與其呈正相關(guān)，對(duì)患者外周血淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行監(jiān)測可輔助了解患者免疫狀態(tài)，可有效指導(dǎo)臨床判斷病情與治療。