張夢(mèng)琳，段淇凡，陳立保，丁 芳，常建光，陳立功?，王學(xué)靜?，劉聚祥，樊寶良，王麗娟

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 071001；2.河北省畜牧獸醫(yī)研究所 071000；3.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 071001；4.河北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳 050000）

馬立克氏?。∕arek，s disease，MD）是雞的一種常見(jiàn)的淋巴細(xì)胞增生性疾病， 病原為α 皰疹病毒亞科Mardivirus 屬的馬立克氏病病毒（Marek，s disease virus，MDV）[1]，該病的病理特征為多種組織器官發(fā)生淋巴性瘤細(xì)胞浸潤(rùn)和形成腫瘤[2]。 20 世紀(jì)70年代我國(guó)雞群發(fā)現(xiàn)該病，由CVI988 株、FC126 等毒株生產(chǎn)的MD疫苗投入生產(chǎn)以后， 該病在集約化養(yǎng)雞場(chǎng)的流行得到了有效地控制。 近年來(lái)，散養(yǎng)雞群發(fā)生MD 或白血病等腫瘤性疾病相對(duì)較多，給散養(yǎng)雞養(yǎng)殖造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。

2019 年10 月，河北某地散養(yǎng)的公雞，自80 日齡開(kāi)始發(fā)病，病雞表現(xiàn)采食量下降、消瘦、零星死亡，主要病理變化特征為腺胃、肝臟、脾臟等內(nèi)臟器官腫大或有結(jié)節(jié)出現(xiàn)。 根據(jù)病理學(xué)診斷及PCR 檢測(cè)結(jié)果，綜合診斷送檢病雞為內(nèi)臟型MD，該結(jié)果為雞場(chǎng)盡早采取相應(yīng)措施提供了參考依據(jù)。

1 發(fā)病情況

主訴該批散養(yǎng)公雞共3000 只，購(gòu)入時(shí)為6 周齡，飼養(yǎng)至80日齡時(shí)開(kāi)始發(fā)病，主要表現(xiàn)采食量下降、消瘦、零星死亡。 發(fā)病后曾先后找基層獸醫(yī)就診， 按大腸桿菌病和傳染性腺胃炎等疾病進(jìn)行治療，結(jié)果均未見(jiàn)明顯療效，至送檢時(shí)已淘汰300 只左右。

2 臨床癥狀觀(guān)察

病雞多表現(xiàn)精神萎靡，不喜活動(dòng)，雞冠發(fā)育不良，個(gè)體瘦弱。

3 病理學(xué)診斷

3.1 病理剖檢變化

外部檢查后，對(duì)送檢雞進(jìn)行內(nèi)部檢查，觀(guān)察、記錄體表及內(nèi)部器官的肉眼病變。 送檢病雞體重偏小、胸肌菲薄。 腺胃體積明顯變大，腺胃壁增厚、質(zhì)地變硬、腺胃乳頭腫大或黏膜見(jiàn)出血和潰瘍（2/5）；肝臟體積增大，表面和切面散在小米大至粟粒大小、灰白色結(jié)節(jié)（3/5）；脾臟明顯腫大，表面和切面見(jiàn)大小不一灰白色組織浸潤(rùn)（3/5）；腎臟腫大，局部呈灰白色（2/5）；胸腺萎縮。 眼睛、皮膚、坐骨神經(jīng)及其他內(nèi)臟無(wú)肉眼可見(jiàn)病變。

3.2 組織學(xué)變化

采集送檢雞的心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腺胃、腎臟等器官，經(jīng)3.7%甲醛溶液固定24h 以上，上述器官按常規(guī)制作石蠟切片，H.E 染色，用光學(xué)顯微鏡觀(guān)察組織學(xué)變化。 鏡檢可見(jiàn)腺胃、肝臟、脾臟和腎臟中有腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)，腫瘤細(xì)胞為大、中、小淋巴樣細(xì)胞、 成淋巴細(xì)胞及馬立克氏病細(xì)胞。 心臟等器官未見(jiàn)組織學(xué)變化。

4 PCR 檢測(cè)

無(wú)菌操作采取送檢病雞肝臟、脾臟等，加入適量滅菌生理鹽水經(jīng)研磨、勻漿、離心取上清液，按常規(guī)進(jìn)行病毒核酸(DNA 和RNA) 的提取。 按照文獻(xiàn)方法分別進(jìn)行MDV 和禽白血病病毒的PCR 檢測(cè)。 電泳結(jié)果顯示，送檢雞僅為MDV 陽(yáng)性（圖1）。

5 小結(jié)與討論

圖1 MDV PCR 產(chǎn)物電泳結(jié)果

臨床上，MD 有神經(jīng)型、內(nèi)臟型、眼型和皮膚型4 種致病型。MDV 多侵害坐骨神經(jīng)等外周神經(jīng)，引發(fā)神經(jīng)型MD，病雞多呈“劈叉”姿勢(shì)，有時(shí)表現(xiàn)為翅膀下垂等。 內(nèi)臟型MD 病雞主要表現(xiàn)為心臟、肝臟、脾臟、腎臟等的腫瘤病灶。 眼型MD 病雞主要表現(xiàn)為瞳孔縮小，甚至呈針尖大小，虹膜呈斑點(diǎn)狀或者環(huán)狀，且邊緣不整齊，逐漸從正常的桔紅色變成彌漫性的灰白色，如同“魚(yú)眼狀”。 皮膚型MD 病雞可見(jiàn)皮膚毛囊的小結(jié)節(jié)或者瘤狀物。 MD腫瘤細(xì)胞在組織學(xué)上有其特有的形態(tài)， 即大小不等的淋巴樣細(xì)胞和變性的成淋巴細(xì)胞。 因此，通過(guò)病理組織學(xué)觀(guān)察，腫瘤細(xì)胞符合上述描述特點(diǎn)，即可明確診斷。 根據(jù)病理學(xué)診斷和PCR 檢測(cè)結(jié)果，可判定送檢散養(yǎng)公雞屬于內(nèi)臟型MD 病例。

據(jù)養(yǎng)殖戶(hù)反映， 該批次公雞出殼時(shí)未接種MDV 疫苗。 因此， 建議散養(yǎng)雞養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)購(gòu)買(mǎi)已接種MD 疫苗的雞只。 此外， 養(yǎng)殖過(guò)程中還要注意接種MD 疫苗雞只仍可能出現(xiàn)免疫失敗。 MD 免疫失敗的原因包括：MDV 早期感染；傳染性法氏囊病病毒、雞傳染性貧血病毒等引發(fā)的免疫抑制；超強(qiáng)毒力MDV 感染；疫苗方面因素，如疫苗運(yùn)輸、保藏和使用不當(dāng)?shù)取?目前，必須采取規(guī)范使用疫苗、加強(qiáng)生物安全管理等綜合性措施，才能減少該病的發(fā)生。