趙燦 劉翠翠 隋月林 朱建忠

【摘要】目的：分析辣木葉提取物對2型糖尿病大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體表達影響情況。方法：選擇60只雄性SD大鼠為實驗樣本。將其分為辣木葉提取物干預(yù)組、糖尿病組以及正常對照組3組，每組各20只。全面探究辣木葉提取物對2型糖尿病大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體表達的影響情況。結(jié)果：糖尿病小鼠血糖以及血脂平明顯比辣木葉提取物干預(yù)組、正常組要高;糖尿病組大鼠的脂肪變性同時合并較為明顯的肝細胞壞死、炎細胞浸潤。另外，其肝臟GR mRNA表達量與蛋白表達水平明顯上升。與之相比，辣木葉提取物干預(yù)組大鼠血生化指標(biāo)更為接近正常水平，其炎細胞浸潤現(xiàn)象以及肝細胞脂肪變性、肝細胞壞死情況明顯比糖尿病組大鼠要好。結(jié)論：通過辣木葉干預(yù)以后，糖尿病大鼠肝臟內(nèi)GR基因mRNA表達量和蛋白表達量顯著下降。辣木葉提取物能夠發(fā)揮出減少2型糖尿病大鼠肝臟 GR mRNA表達以及蛋白表達的效用。

【關(guān)鍵詞】辣木葉提取物;2型糖尿病;肝臟;受體;糖皮質(zhì)激素;基因表達

【中圖分類號】R285.5 【文獻標(biāo)識碼】B 【文章編號】2095-6525（2020）03-0-01

最近幾年，辣木葉提取物憑借著有效的抗氧化以及清除自由基效用，進而受到學(xué)術(shù)界的重視[1]。結(jié)合實際情況，本文全面探究辣木葉提取物針對于2型糖尿病大鼠肝臟糖皮質(zhì)激素受體表達影響情況，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1實驗材料

選擇60只雄性SD大鼠為實驗樣本。體重為150-180g。將其分為辣木葉提取物干預(yù)組、糖尿病組以及正常對照組3組，每組各20只。針對于辣木葉提取物干預(yù)組以及糖尿病組，均喂養(yǎng)高脂飼料，時間為一個月。目的在于全面誘發(fā)大鼠胰島素抵抗。針對于辣木葉提取物干預(yù)組以及糖尿病組，在對其禁食12h之后為其腹腔內(nèi)注射劑量為30mg/kg的鏈脲佐菌素。完畢之后72h，測定其空腹血糖情況。倘若該值8mmol/L以上，表明模型制作成功。

對照組大鼠于腹腔內(nèi)注射等容積的枸櫞酸緩沖液。針對于辣木葉提取物干預(yù)組實施劑量為50mg. Kg-1.d-1辣木葉提取物連續(xù)灌胃，時間為12周。糖尿病組以及對照組使用等容積的0.9%NS溶液，時間相同。在開展相關(guān)實驗期間，辣木葉干預(yù)組以及2型糖尿病組均繼續(xù)給予高脂飲食。而正常對照組，則實施普通飲食。所有動物均自由飲水和進食，完成實驗之后禁食12h，人道處死實驗動物。

1.2方法

完成上述處理之后取血，對上述樣本的血液開展生化檢驗，測定血脂、血糖水平。利用放免法對血液樣本內(nèi)的胰島素水平加以檢測;同時HE染色光鏡下查看肝臟組織形態(tài)學(xué)變化。利用RT-PCR測定實驗樣本肝臟組織GR mRNA表達情況。針對于實驗樣本肝組織蛋白表達情況，則利用免疫組化法完成檢測工作。

1.3統(tǒng)計學(xué)原理

實驗利用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件，對數(shù)據(jù)內(nèi)的計量資料開展多組比較單因素方差分析LSD法完成計算，若方差不齊時，則開展秩和檢驗，當(dāng)p<0.05時，證實相關(guān)數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1實驗樣本各項血生化指標(biāo)改變詳情

詳細情況見表1。

2.2實驗樣本肝臟病理改變情況

通過肝臟組織HE染色切片表明，對照組大鼠沒有出現(xiàn)脂肪變性與炎細胞浸潤現(xiàn)象;糖尿病組大鼠肝細胞存在脂肪變性、肝小葉結(jié)構(gòu)異常，同時存在多灶區(qū)肝細胞點樣壞死。同時合并肝臟內(nèi)單核細胞、淋巴細胞、中性粒細胞、漿細胞浸潤與匯管區(qū)域混合炎性細胞浸潤。辣木葉提取物干預(yù)組大鼠的肝細胞脂肪變性情況好于糖尿病組。

2.3肝臟組織GR mRNA表達情況

正常組大鼠GR mRNA表達情況為0.43±0.30;糖尿病大鼠GR mRNA表達情況為0.91±0.50。2組相比，P<0.05。干預(yù)組GR mRNA達情況為0.49±0.31，相較于糖尿病組，p<0.05。

2.4 GR免疫組化結(jié)果情況

正常組內(nèi)，絕大部分肝細胞和中度表達GR，肝細胞為棕黃色;糖尿病組所有肝細胞核均呈現(xiàn)出了GR表達現(xiàn)象，表達量顯著加強，核呈纖維棕黑色。辣木葉提取物干預(yù)組肝細胞核GR表達量減弱，接近與正常組水平。

3 討論

本組實驗研究表明，糖尿病小鼠血糖以及血脂平明顯比辣木葉提取物干預(yù)組、正常組要高;糖尿病組大鼠的脂肪變性同時合并較為明顯的肝細胞壞死、炎細胞浸潤。另外，其肝臟GR mRNA表達量與蛋白表達水平明顯上升。這也在根本上表明了糖尿病小鼠存在血脂血糖代謝紊亂與脂肪性肝炎癥狀。與之相比，辣木葉提取物干預(yù)組大鼠血生化指標(biāo)更為接近正常水平，其炎細胞浸潤現(xiàn)象以及肝細胞脂肪變性、肝細胞壞死情況明顯比糖尿病組大鼠要好。

通過辣木葉干預(yù)以后，糖尿病大鼠肝臟內(nèi)GR基因mRNA表達量和蛋白表達量顯著下降。這也證實了辣木葉提取物能夠發(fā)揮出減少2型糖尿病大鼠肝臟 GR mRNA表達以及蛋白表達的效用。其可能為減少2型糖尿病實驗樣本血脂、血糖值與減少肝內(nèi)脂肪堆積量的重要性機制。

參考文獻：

[1]董笑克，劉銅華，常青， 等.辣木葉醇提物對自發(fā)型肥胖型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝病的影響[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2019，12（8）：1149-1153.

[2]賀敏， 李雅萍， 黃仁彬. 抗糖尿病黃酮類活性成分的研究進展[J]. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志， 2009， 029（017）：1481-1483.