曹汴川， 黃 喆， 肖 科， 稅雪姣， 鄒永勝， 黃富禮， 黃永茂， 鐘 利

獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）是由人類免疫缺陷病毒（HIV）感染所導(dǎo)致的以免疫功能缺陷為特征的慢性致死性傳染病。四川地區(qū)AIDS疫情嚴(yán)峻，已成為最重大的公共衛(wèi)生挑戰(zhàn)之一。HIV感染導(dǎo)致患者CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行性減少[1]，CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比例倒置，相關(guān)細(xì)胞因子水平紊亂，進(jìn)而引起機(jī)體免疫功能缺陷，極易發(fā)生各種機(jī)會(huì)性感染[2]。而AIDS合并機(jī)會(huì)性感染是導(dǎo)致患者出現(xiàn)各種臨床癥狀，甚至死亡的重要因素[3-4]。有研究發(fā)現(xiàn)，CD4+T淋巴細(xì)胞和HIV-1病毒載量已成為判定AIDS患者病情、預(yù)測(cè)疾病進(jìn)展和評(píng)價(jià)抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療（ART）療效的重要指標(biāo)[5-7]。因此，評(píng)估包括CD4+T淋巴細(xì)胞在內(nèi)的淋巴細(xì)胞亞群和HIV-1病毒載量可全面反映AIDS患者的免疫功能以及ART療效，進(jìn)而預(yù)測(cè)發(fā)生感染的概率。對(duì)AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染的淋巴細(xì)胞亞群和HIV-1病毒載量進(jìn)行分析，以期提高臨床診治水平，進(jìn)而為降低本地區(qū)此病的發(fā)病率和病死率提供依 據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病例來源

所有病例均來源于西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院感染病科2019年1－12月住院治療的AIDS合并機(jī)會(huì)性感染患者，共100例。病例納入排除條件：①AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染；②性別不限；③排除血液系統(tǒng)疾病、糖尿病、慢性阻塞性肺疾病、肝硬化、慢性腎臟疾病和嚴(yán)重精神疾?。虎芴蕹R床資料不完整的病例。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

由本院實(shí)驗(yàn)室對(duì)血液標(biāo)本采用化學(xué)發(fā)光法聯(lián)合膠體金法和膠體硒法進(jìn)行HIV抗體篩查。篩查試驗(yàn)為陽(yáng)性者，采用免疫印跡法或條帶免疫法進(jìn)行抗體補(bǔ)充試驗(yàn)，按《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范（2015年修訂版）》中的標(biāo)準(zhǔn)操作[8]。

采用BD公司生產(chǎn)的FACS Canto Ⅱ流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)，包括CD4+T淋巴細(xì)胞（CD3+CD4+）、CD8+T淋巴細(xì)胞（CD3+CD8+）、NK細(xì)胞（CD16+CD56+）和B淋巴細(xì)胞（CD3-CD19+）。

采用羅氏公司生產(chǎn)的COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan病毒載量檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)血漿HIV-1病毒載量，HIV核酸＜20拷貝/mL定為檢測(cè)下 限。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)判定

HIV感染診斷，依據(jù)《中國(guó)艾滋病診療指南（2018版）》為標(biāo)準(zhǔn)[9]。符合如下標(biāo)準(zhǔn)即可診斷HIV感染：HIV抗體篩查試驗(yàn)陽(yáng)性和HIV補(bǔ)充試驗(yàn)陽(yáng)性（抗體補(bǔ)充試驗(yàn)陽(yáng)性或HIV核酸＞5 000 拷貝 / mL）。機(jī)會(huì)性感染的診斷以患者出院診斷為準(zhǔn)，所有機(jī)會(huì)性感染的診斷均依據(jù)相應(yīng)臨床表現(xiàn)及相關(guān)輔助檢查[9]。

1.4 資料采集

采集所有患者的資料，包括性別、年齡、職業(yè)、婚姻狀況、HIV感染途徑、機(jī)會(huì)性感染的種類、CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD8+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、NK細(xì)胞計(jì)數(shù)、B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)和HIV-1病毒載量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用構(gòu)成比表示，組間比較采用Fisher精確檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用方差分析或Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn)；采用Spearman進(jìn)行相關(guān)分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者基本信息

100例患者中，男86例，占86.0%，女14例，占14.0%。本地區(qū)AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染以41～65歲已婚男性農(nóng)民或農(nóng)民工居多，HIV-1傳播途徑以異性性行為為主。見表1。

表1 100例患者基本信息Table 1 Demographic data of 100 patients

2.2 機(jī)會(huì)性感染的種類

100例患者中，共發(fā)生機(jī)會(huì)性感染195例次，以細(xì)菌性肺炎位居首位（25.6%，50/195），其他常見的機(jī)會(huì)性感染還包括了EB病毒感染、肺結(jié)核、肺孢子菌肺炎、巨細(xì)胞病毒感染等。見表 2。

表2 195例次機(jī)會(huì)性感染的種類Table 2 Types of 195 opportunistic infections

2.3 機(jī)會(huì)性感染與CD4+T淋巴細(xì)胞的關(guān)系

1 0 0例患者中，根據(jù)C D 4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平分為4組（＜100/μL、100～200/μL、201～350/ μL、＞350/μL），隨著CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平降低，機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生明顯增加。見表3。

2.4 CD8+T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞與CD4+T淋巴細(xì)胞的關(guān)系

100例患者中，隨著CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平降低，CD8+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平也隨之降低。在CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)＜100/μL時(shí)，CD8+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平明顯低于其他三組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。NK細(xì)胞計(jì)數(shù)水平也隨著CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平降低而出現(xiàn)降低，但各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.182）。見表4。

2.5 HIV-1病毒載量與CD4+T淋巴細(xì)胞的關(guān)系

100例患者中，隨著CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平降低，HIV-1病毒載量水平出現(xiàn)升高。在CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)＜100/μL時(shí)，HIV-1病毒載量明顯高于CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)＞350/μL時(shí)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.026）。將HIV-1病毒載量與CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)作相關(guān)性分析，兩者呈負(fù)相關(guān)（r=-0.297，P=0.014），即當(dāng)HIV-1病毒載量較高時(shí)，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較低；而當(dāng)HIV-1病毒載量較低時(shí)，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較高。見表 5。

3 討論

截至2018年底，我國(guó)報(bào)告現(xiàn)有HIV感染者、AIDS患者共86.1萬例，2018年當(dāng)年新發(fā)HIV感染者、AIDS患者為14.9萬例，死亡3.8萬例。HIV主要破壞人體免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致人體出現(xiàn)免疫功能缺陷，引起各種機(jī)會(huì)性感染[10]。研究發(fā)現(xiàn)，HIV可導(dǎo)致CD4+T淋巴細(xì)胞出現(xiàn)凋亡或焦亡，HIV復(fù)制還可直接或間接對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生殺傷作用以及感染HIV后導(dǎo)致機(jī)體胸腺組織萎縮和胸腺細(xì)胞死亡等，上述過程共同導(dǎo)致了CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量的進(jìn)行性減少[9]。HIV感染還可引起CD8+T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等其他免疫細(xì)胞出現(xiàn)異常免疫活化和功能障礙[9,11-12]。

表3 機(jī)會(huì)性感染與CD4+T淋巴細(xì)胞的關(guān)系Table 3 Correlation between opportunistic infections and CD4+T lymphocytes count

表4 CD8+T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞與CD4+T淋巴細(xì)胞的關(guān)系Table 4 Correlation between CD8+T lymphocytes， NK cells， B lymphocytes and CD4+T lymphocytes

表5 HIV-1病毒載量與CD4+T淋巴細(xì)胞的關(guān)系Table 5 Correlation between HIV-1 viral load and CD4+T lymphocytes count

大部分HIV感染者在初始感染HIV以后，一般經(jīng)過6～8年的無癥狀期，最終發(fā)展為AIDS。在HIV感染的最終階段，患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù) ＜200 /μL，且HIV-1病毒載量明顯升高，此時(shí)，患者容易出現(xiàn)各種機(jī)會(huì)性感染。有研究表明，AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染具有感染多樣性、復(fù)雜性的特點(diǎn)，且病死率高[13-15]。另一研究發(fā)現(xiàn)，AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染主要由細(xì)菌、真菌和病毒引起[16-17]。本研究中，細(xì)菌性肺炎居首位（25.6%），其他常見的機(jī)會(huì)性感染還包括了EB病毒感染、肺結(jié)核、肺孢子菌肺炎和巨細(xì)胞病毒感染。

本研究發(fā)現(xiàn)，隨著CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平降低，AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生例數(shù)隨之增加。CD4+T淋巴細(xì)胞水平會(huì)影響機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生，這與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果一致[18]。因而，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)是預(yù)測(cè)AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染發(fā)生的重要指標(biāo)。

本研究發(fā)現(xiàn)，隨著CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平降低，CD8+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平也隨之降低。在CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)＜100 /μL時(shí)，CD8+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平明顯低于CD4+T淋巴細(xì)胞≥100 μL的其他三組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。NK細(xì)胞計(jì)數(shù)水平也隨著CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平降低而出現(xiàn)降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.182），這可能是由于納入研究的病例數(shù)較少的原因。由于 HIV感染不僅能引起CD4+T淋巴細(xì)胞的數(shù)量減少，同時(shí)，還可引起CD8+T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等出現(xiàn)異常免疫激活，從而引起這些細(xì)胞死亡，導(dǎo)致殘存免疫細(xì)胞的減少。CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的降低預(yù)示病情出現(xiàn)了進(jìn)展惡化，因而，CD8+T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)也會(huì)出現(xiàn)降低，上述免疫細(xì)胞的減少增加了機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生概率。

本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)HIV-1病毒載量較高時(shí)，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較低；而當(dāng)HIV-1病毒載量較低時(shí)，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較高，兩者呈負(fù)相關(guān)。當(dāng)CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)＜100 /μL時(shí)，HIV-1病毒載量明顯高于CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)＞350 /μL時(shí)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.026）。這是由于HIV-1病毒載量的高低代表了體內(nèi)病毒復(fù)制的數(shù)量，HIV-1病毒載量越高，CD4+T淋巴細(xì)胞在病毒直接或間接的作用下導(dǎo)致其破壞越多，進(jìn)而導(dǎo)致CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量的減少[19]，從而更容易合并機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生。目前，預(yù)防機(jī)會(huì)性感染的最有效方法仍是ART[9，20]。ART能夠明顯抑制HIV復(fù)制，促進(jìn)免疫功能恢復(fù)，進(jìn)而降低AIDS患者機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生率。

綜上，本地區(qū)AIDS患者合并機(jī)會(huì)性感染的表現(xiàn)復(fù)雜多樣，CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平越低，免疫功能缺陷越明顯，機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生率越高。隨著HIV-1病毒載量上升，CD4+T淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。因而，定期監(jiān)測(cè)淋巴細(xì)胞亞群和HIV-1病毒載量，可以很好地預(yù)測(cè)疾病進(jìn)展，評(píng)估抗病毒治療療效，預(yù)防機(jī)會(huì)性感染的發(fā)生。