王海燕 張曉秋 鄒國慶 劉愛青 閆 征

（1.北京盛美諾生物技術有限公司，北京 100000；2.北京懿德動物醫(yī)院有限公司，北京 100000；3.安徽盛美諾生物技術有限公司，安徽淮北 235000）

骨關節(jié)炎是犬的一種退行性骨關節(jié)炎疾病，也是犬的一種比較常見多發(fā)的疾病。根據(jù)統(tǒng)計約有20%的1歲以上的犬，存在不同程度的關節(jié)炎，且在臨床上往往被忽略。隨著年齡的增加骨關節(jié)炎發(fā)生率升高，約有95% 的病例發(fā)生在5歲以上的犬。關節(jié)炎通常影響大型犬，實際上所有年齡、不同品種的犬都可能發(fā)生骨關節(jié)炎，而且所有關節(jié)都有可能發(fā)生[1]。據(jù)臨床統(tǒng)計犬骨關節(jié)炎的發(fā)病率髖關節(jié)為42.5%，后肢膝關節(jié)18.5%，肘關節(jié)12.8%[2]。骨關節(jié)炎對寵物犬的健康與福利造成了嚴重的損害。

目前常用的改善癥狀藥物有非甾體類抗炎藥、糖皮質(zhì)激素以及營養(yǎng)補充劑如硫酸軟骨素、氨基葡萄糖、透明質(zhì)酸等[3]，但是藥物治療會有副作用，而營養(yǎng)補充劑的效果也備受爭議[4]。非變性II型膠原蛋白（也稱之為含II型膠原蛋白的軟骨粉）20世紀90年代開始用于人的關節(jié)炎治療[5]，此后也用于馬和犬骨關節(jié)炎治療上，具有明顯改善效果，且無任何毒副作用[6-7]。本研究選用非變性II型膠原蛋白治療骨關節(jié)炎犬，探討其作用效果和機理。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

由北京懿德動物醫(yī)院有限公司征集30只無肝腎疾病的骨關節(jié)炎犬，平均年齡8±1.54歲，平均體重30kg±3.78kg。

1.2 實驗方法

將實驗動物隨機分為兩組，一組為對照組，正常飼喂犬糧；一組為實驗組，每天飼喂添加40mg非變性II型膠原蛋白犬糧。非變性II型膠原蛋白由北京盛美諾生物技術有限公司提供。實驗時間3個月。根據(jù)參考文獻[8-9]，由臨床醫(yī)生進行打分評估，分別記錄初始和3個月時分數(shù)。打分方法：（1）整體疼痛評價：起來后坐下和坐下后站起來的疼痛和困難；（2）跛行疼痛評價：強體力活動后進行評估的，包括跛瘸的跡象和四肢的僵硬；（3）四肢疼痛評價：拉伸或者彎曲幾分鐘四肢的疼痛來評估。所有評分的參數(shù)分成5個等級，從0（無癥狀）到5（嚴重）。

1.3 統(tǒng)計方法

用SPSS19.0統(tǒng)計軟件，對所有數(shù)據(jù)進行顯著性檢驗，并進行分析比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 整體疼痛評價

如圖1所示，對照組和實驗組開始時整體疼痛分值相似，組間差異不顯著（P>0.05）；3個月后對照組整體疼痛有所增加，但與起始值差異不顯著（P>0.05）；而實驗組整體疼痛明顯降低，與起始值相比差異極顯著（P<0.01），且實驗組與對照組組間差異極顯著（P<0.01）。這這說明飼喂非變性II型膠原蛋白能夠極顯著改善犬骨關節(jié)炎癥狀，降低起來后坐下和坐下后站起來的困難，并能有效緩解疼痛。

圖1 整體疼痛評價結(jié)果

2.2 跛行疼痛評價

如圖2所示，對照組和實驗組開始時跛行疼痛評價分值相似，組間差異不顯著（P>0.05）；3個月后對照組跛行疼痛評價略有提高，但與起始值差異不顯著（P>0.05）；而實驗組跛行疼痛評價明顯降低，與起始值相比差異極顯著（P<0.01），且實驗組與對照組組間差異極顯著（P<0.01）。這這說明飼喂非變性II型膠原蛋白能夠極顯著改善骨關節(jié)炎犬的跛行，有效緩解運動后疼痛，減輕僵硬癥狀。

圖2 跛行疼痛評價

2.3 四肢疼痛評價

如圖3所示，對照組和實驗組開始時四肢疼痛評價分值相似，組間差異不顯著（P>0.05）；3個月后對照組四肢疼痛評價略有提高，但與起始值差異不顯著（P>0.05）；而實驗組四肢疼痛評價明顯降低，與起始值相比差異極顯著（P<0.01），且實驗組與對照組組間差異極顯著（P<0.01）。這說明飼喂非變性II型膠原蛋白能夠極顯著降低骨關節(jié)炎犬四肢疼痛。

圖3 四肢疼痛評分

2.4 安全性評價

表1 開始時和3個月后體重

對照組和實驗組開始時體重相似，3個月后對照組體重略有下降，實驗組有所增加，差異不顯著（P>0.05），見表1。實驗組經(jīng)臨床診斷，無明顯其他病癥，肝和腎功能（谷丙轉(zhuǎn)氨酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶，血尿素氮，肌酐）相關數(shù)據(jù)未顯示任何顯著變化，說明非變性II型膠原蛋白具有安全性。

3 討論

骨關節(jié)炎（Osteoarthritis）是一種由創(chuàng)傷、關節(jié)先天性異常、關節(jié)畸形、軟骨破裂或破壞等原因造成的慢性、漸進性疾病。發(fā)生骨關節(jié)炎時，由于骨的結(jié)構之間發(fā)生摩擦可以引起犬關節(jié)不適、疼痛、活動受限和關節(jié)畸形等癥狀。犬骨關節(jié)炎最明顯的癥狀就是“跛行”即瘸腿；常見的癥狀還有站立困難，活動減少、關節(jié)腫脹、關節(jié)僵硬等1。炎癥因子在骨關節(jié)炎軟骨病變中起了重要作用；細胞因子作用導致滑膜組織激活、軟骨內(nèi)在穩(wěn)態(tài)發(fā)生改變、軟骨下骨受到損害，加速軟骨破壞[10]。

非變性II型膠原蛋白能夠改善骨關節(jié)炎的作用機理為口服免疫耐受（Oral tolerance，簡稱OT），是指口服某種蛋白質(zhì)抗原后，導致局部腸相關淋巴組織特異免疫，從而抑制全身免疫應答，是一種外周免疫耐受形式。非變性II型膠原蛋白是以動物軟骨為原料，采用低溫技術提取技術，得到的完整保留大分子膠原蛋白三螺旋結(jié)構未發(fā)生變化的膠原蛋白產(chǎn)品，分子量在30萬道爾頓左右[4]。國外也有人研究了非變性II型膠原蛋白對骨關節(jié)炎犬的作用。Peal等人2007年對骨關節(jié)炎犬飼喂非變性II型膠原蛋白120d和停止飼喂后30d分別進行評估。從總體疼痛、跛行時疼痛、運動時跛行評分結(jié)果發(fā)現(xiàn)，安慰劑組無效果，而實驗組可以顯著降低骨關節(jié)炎造成的疼痛；但停止飼喂后30d，疼痛恢復至原來水平[11]。Gupta等人2011年研究了非變性II型膠原蛋白對中度骨關節(jié)炎犬的改善，并以氨糖+硫酸軟骨素/天作為做對照，實驗時間150d。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有非變性II型膠原蛋白能夠降低由骨關節(jié)炎導致的疼痛[6]。

在本研究中，發(fā)現(xiàn)每天飼喂骨關節(jié)炎犬40mg非變性II型膠原蛋白3個月后，整體疼痛、跛行以及四肢疼痛明顯改善，且具有安全無毒的特點，與前人研究結(jié)果一致。在國外非變性II型膠原蛋白已經(jīng)廣泛應用于犬、貓等寵物食品中，但在國內(nèi)尚屬空白，只有極少數(shù)幾家在犬類營養(yǎng)劑中添加，市場潛力巨大。