劉娜郝美玲（.呼和浩特市食品藥品檢驗(yàn)所呼和浩特00020；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院呼和浩特00020）

樟木為樟科植物樟的木材。［原植物］樟Cinnamomum camphora（L.）Presl［Laurus camphora L.］又名烏樟（陶弘景）、香樟（南方各省份通稱）、小葉樟（湖南）、傜人柴（廣西）。常綠大喬木，高可達(dá)30 m。樹皮灰黃褐色，縱裂。枝、葉及木材均有樟腦氣味。蒙醫(yī)傳統(tǒng)以其木材入藥。目前該藥材的樟腦含量標(biāo)準(zhǔn)尚未建立，因此，采用氣相色譜法對(duì)樟木的成分樟腦含量進(jìn)行測(cè)定，為建立樟木的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：島津GC-2014C氣相色譜儀（日本）；柱子：聚乙二醇20000（PEC-20M）為固定相、涂布濃度為10%的毛細(xì)管柱。AL204型、MSE3.6P-CE型電子天平，揮發(fā)油測(cè)定器。

1.2 試劑試藥：樟腦對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110747-201008），乙酸乙酯為分析純。樟木[（四川成都荷花池，批號(hào)：150501、150502、150503、150504）；越南（150901、150906、150914）]。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件的選擇：進(jìn)樣口溫度：190℃；載氣（氮?dú)猓┝髁浚? mL/min；分流比為 20∶1；檢測(cè)器溫度：220 ℃；柱溫：起始溫度 80 ℃，停留9 min，升溫速率40℃/min，最終溫度180℃，停留3 min；理論板數(shù)：按樟腦峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取樟腦對(duì)照品3.028 mg，置10 mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備：精密稱取樟木（已粉碎過(guò)二號(hào)篩）31.2501 g，照揮發(fā)油測(cè)定法（《中國(guó)藥典》2015年版四部通則2204）測(cè)定。揮發(fā)油過(guò)無(wú)水硫酸鈉置5 mL量瓶中（揮發(fā)油為0.2 mL以下時(shí)溶解到2 mL量瓶中），再用乙酸乙酯洗滌并定容至刻度，即得。

2.2.3 陰性溶液的制備：取乙酸乙酯分析純。

2.3 專屬性考察：分別精密吸取上述樟腦對(duì)照品溶液、供試品溶液、空白溶劑各1 μL注入氣相色譜儀測(cè)定（色譜圖見圖1、圖2、圖3），結(jié)果顯示，相同的保留時(shí)間處，供試品溶液與對(duì)照品溶液具有相同的色譜峰，而陰性溶液此處無(wú)色譜峰出現(xiàn)，表明陰性對(duì)照品無(wú)干擾，專屬性良好。

2.4 線性關(guān)系考察：精密吸取3.625 mg樟腦置25 mL的量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液 0.2、0.5、1、1.5、2.0、2.5、3、4.0、5.0 μL 注入氣相色譜儀，記錄峰面積，與進(jìn)樣量做線性回歸。以濃度為橫坐標(biāo)X，峰面積為縱坐標(biāo)Y，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線方程。線性回歸方程為y=536598x－810.81（r=0.9994），結(jié)果表明樟腦在0.029～0.725 mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn)：分別精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下的供試品溶液1 μL，注入氣相色譜儀測(cè)定峰面積，測(cè)得的平均面積值為96708.3，RSD=1.77%，結(jié)果顯示精密度試驗(yàn)良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密吸取同一供試品溶液，分別在放置0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、14 h 進(jìn)樣 1 μL 記錄峰面積，RSD=0.75%。結(jié)果顯示，該成分在供試品溶液中24 h穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品按供試品溶液制備方法制備6份樣品溶液，進(jìn)樣1 μL測(cè)定峰面積，計(jì)算含量。結(jié)果顯示，該供試品中樟腦平均含量為0.0276%，RSD為0.32%，表明重復(fù)性良好。

2.8 回收率試驗(yàn)：取同一批已知含量的樣品6份，每份取16 g，精密稱定，分別精密加入樟腦對(duì)照品適量，按供試品溶液制備方法制備樣品溶液，分別注入氣相色譜儀測(cè)定含量。結(jié)果顯示平均加樣回收率98.48%，RSD為0.82%，表明準(zhǔn)確度良好。見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 樣品含量測(cè)定

取7個(gè)批次的樟木按“2.2.2供試品溶液的制備”方法制備溶液，按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定，記錄色譜圖，計(jì)算樟腦的含量，結(jié)果見表2。

4 討論

4.1 前處理?xiàng)l件的考察：在提取溶劑的選擇上主要考慮了乙酸乙酯和環(huán)己烷，提取方法首先用了超聲提取，提取溶液經(jīng)過(guò)濃縮，進(jìn)入氣相色譜儀測(cè)定，有效成分含量很低?？紤]到本實(shí)驗(yàn)的所測(cè)成分主要存在于揮發(fā)油中，在濃縮環(huán)節(jié)會(huì)損失揮發(fā)油，后改為用揮發(fā)油測(cè)定器提取，乙酸乙酯的極性大于環(huán)己烷且微溶于水，所以采用環(huán)己烷作為提取溶劑。

4.2 色譜條件的考察：本實(shí)驗(yàn)在其他色譜條件不變的情況下，分別改變進(jìn)樣口溫度（190℃改為200℃）、柱溫（初始溫度80℃改為100 ℃）、分流比（20∶1改為 25∶1），測(cè)得RSD 為 1.24%。由此可見小的色譜因素變化對(duì)含量測(cè)定影響較小，方法可行有效。

4.3 樣品性狀的考察：通過(guò)對(duì)7個(gè)樣品的含量測(cè)定結(jié)果和性狀對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，藥材粗壯、生長(zhǎng)年限較長(zhǎng)的含量較高。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果