朱 丁 蘭策介 鄒亞明 劉蘊(yùn)華 王荷生 焦建棟

(無錫市疾病預(yù)防控制中心，江蘇無錫，214023)

近年來，登革熱在世界熱帶和亞熱帶地區(qū)廣泛流行，每年全世界有128個(gè)國(guó)家的39億人面臨登革熱感染風(fēng)險(xiǎn)(Bradyetal.,2012)，約有3.9億例登革熱病例，其中9 600萬出現(xiàn)不同程度的臨床癥狀(Bhattetal.,2013)，登革病毒Ⅱ型病例的死亡率達(dá)到2%，給人類帶來嚴(yán)重的疾病負(fù)擔(dān)。目前對(duì)登革熱沒有特異的治療辦法，也無有效的疫苗預(yù)防(World Health Organization,2017)。伊蚊Aedes是登革熱的傳播媒介，控制伊蚊密度是目前防控登革熱的主要措施。伊蚊密度監(jiān)測(cè)是評(píng)價(jià)蚊蟲控制效果和登革熱傳播風(fēng)險(xiǎn)的重要措施(中國(guó)疾病預(yù)防控制中心,2014)。

目前對(duì)伊蚊成蚊的監(jiān)測(cè)主要采用人誘停落法和雙層疊帳法(韋凌婭等，2019; 劉欽梅等，2020; 柳靜等，2020)，這兩種方法都以人為誘餌，人誘停落法在疫區(qū)應(yīng)用受到限制，而雙層疊帳法器材繁重、操作不便。雖有研究數(shù)據(jù)表明BG-trap誘捕法優(yōu)于前兩者的人誘方法(韋凌婭等，2019)，但實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)未排除生境因素的的影響，尚不能全面的對(duì)該方法的捕獲效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，并且該研究結(jié)果與部分現(xiàn)場(chǎng)經(jīng)驗(yàn)不一致。因此，本研究在考慮生境、時(shí)間等因素的影響下，對(duì)人誘停落法、雙層疊帳法和BG-trap誘捕法的捕獲效果進(jìn)行了比較研究，為媒介伊蚊成蚊監(jiān)測(cè)方法的選擇提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)

在江蘇省無錫市區(qū)選擇一大型安置房居民區(qū)(圖1)，實(shí)驗(yàn)期間環(huán)境穩(wěn)定，沒有環(huán)境整治、殺蟲劑噴撒等影響。在小區(qū)內(nèi)選擇3處開展現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，分別記為A1、A2、A3，三處位置相互間隔100 m以上，點(diǎn)位之間有2～3棟樓宇間隔，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)環(huán)境如圖1。A1，有條椅、桌子等設(shè)施，人群經(jīng)常在此停歇、活動(dòng)；A2，廢舊輪胎堆放處，有小面積竹林；A3，有2個(gè)睡蓮盆栽，有喬木和低矮灌木綠化。三處監(jiān)測(cè)位點(diǎn)均有伊蚊孳生環(huán)境存在，密度要求達(dá)到人誘停落法平均10 min 5只以上。

圖1 實(shí)驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)生境遙感圖

1.2 實(shí)驗(yàn)器材

雙層疊帳(中國(guó)疾控中心專利產(chǎn)品雙層疊帳，專利號(hào)：CN201520478102.4)、BG-trap、電動(dòng)吸蚊器、溫濕度計(jì)、風(fēng)速儀等，手電筒、乙醚、搪瓷盤、口罩、手套、鑷子、計(jì)數(shù)器等。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

下午4點(diǎn)前將監(jiān)測(cè)器材布放好。標(biāo)記和記錄設(shè)備布放位置，并記錄溫濕度、風(fēng)速和環(huán)境類型。16點(diǎn)開始實(shí)驗(yàn)：16:00～16:30，同時(shí)開展人誘停落法(1人)、雙層疊帳(1頂)和BG-trap(1臺(tái))誘捕蚊蟲，持續(xù)30 min，收集電動(dòng)吸蚊器和BG-trap集蚊袋，并對(duì)收集的蚊蟲分別以乙醚現(xiàn)場(chǎng)麻醉，鑒定計(jì)數(shù)后原地釋放，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，17:00～17:30和18：00～18：30分別更換點(diǎn)位再重復(fù)2次上述實(shí)驗(yàn)。

1.3.1雙層疊帳法 內(nèi)帳直徑1.2 m，外帳與內(nèi)帳間徑向間距35 cm，外帳距地面35 cm，選擇避風(fēng)遮蔭處放置蚊帳，工作時(shí)注意遠(yuǎn)離人群，誘集者著長(zhǎng)衣長(zhǎng)褲，過程中不使用蚊蟲驅(qū)避劑，位于內(nèi)部封閉蚊帳中暴露兩條小腿，收集者利用電動(dòng)吸蚊器在兩層蚊帳之間收集停落在蚊帳上的伊蚊持續(xù)30 min，現(xiàn)場(chǎng)乙醚麻醉后，鑒定計(jì)數(shù)后原地釋放，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1.3.2人誘停落法 選擇避風(fēng)遮蔭處，工作時(shí)注意遠(yuǎn)離人群，誘集者暴露一條小腿，利用電動(dòng)吸蚊器收集被引誘的伊蚊持續(xù)30 min，現(xiàn)場(chǎng)乙醚麻醉后，立即鑒定計(jì)數(shù)后原地釋放。

1.3.3BG-trap誘捕法 選擇避風(fēng)遮蔭處，工作時(shí)遠(yuǎn)離人群，根據(jù)說明書安裝好儀器，放置配套的引誘劑(即BG-Lure，該引誘劑能夠釋放模擬人體皮膚的氣味)，不連接CO2氣源，引誘持續(xù)30 min，現(xiàn)場(chǎng)乙醚麻醉后，立即鑒定計(jì)數(shù)后原地釋放。

1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)考慮地點(diǎn)(A)、時(shí)間(a)兩個(gè)因素，每個(gè)因素3個(gè)水平,比較3種監(jiān)測(cè)方法對(duì)伊蚊成蚊的捕獲效率。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)采用兩因素三水平拉丁方設(shè)計(jì)(3×3)(表1)，共進(jìn)行3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)，每次間隔1周。

表1 拉丁方實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)安排

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

在統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0中，采用方差分析比較不同時(shí)間、點(diǎn)位、方法之間的差異性，采用Bonferroni法對(duì)兩兩之間的差異性進(jìn)行多重比較。相關(guān)性分析采用時(shí)間對(duì)應(yīng)的數(shù)據(jù)，首先應(yīng)用R語言采用Shapiro-Wilk正態(tài)檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的正態(tài)性，再根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果選擇相應(yīng)的相關(guān)性分析方法。

2 結(jié)果

2.1 白蚊伊蚊雌蚊誘捕數(shù)量與分析

三種監(jiān)測(cè)方法在不同時(shí)間和不同點(diǎn)位的誘捕白紋伊蚊雌蚊總數(shù)如表2。不同時(shí)間之間、點(diǎn)位之間、監(jiān)測(cè)方法之間的捕獲數(shù)差異性分析如表3。不同時(shí)間段誘捕的伊蚊雌蚊總數(shù)無顯著差異(P=0.718)，不同點(diǎn)位誘捕的伊蚊雌蚊數(shù)亦無顯著差異(P=0.921)，三種監(jiān)測(cè)方法誘捕的伊蚊雌蚊總數(shù)差異極顯著(P=0.006)。使用Bonferroni法進(jìn)行多重比較，人誘停落法誘捕的總雌蚊數(shù)是BG-trap誘捕法的8.8倍(P=0.015)，雙層疊帳法誘捕的總雌蚊數(shù)是BG-trap誘捕法的9.3倍(P=0.011)，人誘停落法與雙層疊帳法的誘捕總雌蚊數(shù)差異不顯著(P=1.000)。

表2 白紋伊蚊雌蚊捕獲數(shù)量(只)

表3 不同時(shí)間、生境、監(jiān)測(cè)方法之間的捕獲效果比較

2.2 不同監(jiān)測(cè)方法捕獲數(shù)量的相關(guān)性分析

BG-trap誘捕法捕獲的伊蚊雌蚊總數(shù)分別與人誘停落法和雙層疊帳法的捕獲總數(shù)散點(diǎn)圖如圖2。人誘停落法、雙層疊帳法、BG-trap誘捕法正態(tài)性檢驗(yàn)的w值分別為0.896、0.942、0.752，P值分別為0.230、0.599、0.006。秩相關(guān)性分析顯示BG-Trap誘捕法分別與人誘停落法(r=00.05)和雙層疊帳法(r=-0.11670.05)的相關(guān)相關(guān)性都不顯著。

圖2 BG-Trap誘捕法捕獲總數(shù)分別與人誘停落法和雙層疊帳法捕獲總數(shù)的散點(diǎn)圖

3 討論

伊蚊密度與登革熱傳播風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)，成蚊密度監(jiān)測(cè)是登革熱防控的基礎(chǔ)性工作，為有效開展防制措施提供直接依據(jù)，尋找靈敏、便捷、科學(xué)有效的監(jiān)測(cè)方法，一直是防控人員、應(yīng)急監(jiān)測(cè)人員探討追求的一個(gè)目標(biāo)。我國(guó)成蚊監(jiān)測(cè)方法有誘蚊燈法、動(dòng)物誘集法、棲息蚊蟲捕捉法、揮網(wǎng)法、人帳誘法、動(dòng)物帳誘法等，目前應(yīng)用于伊蚊成蚊密度監(jiān)測(cè)方法主要為人誘停落法和雙層疊帳法，由于伊蚊的吸血特性和活動(dòng)特點(diǎn)，在登革熱疫區(qū)主要采用雙層疊帳法以降低監(jiān)測(cè)工作的風(fēng)險(xiǎn)，這兩種方法都以人為誘餌，容易受監(jiān)測(cè)時(shí)間、環(huán)境和操作者規(guī)范熟練程度等因素影響，而且消耗更多的人力物力，因此人們開展了一些研究希望開發(fā)替代方法。本研究比較了BG-trap誘捕法和前兩者監(jiān)測(cè)方法的捕獲效率，本研究中人誘停落法和雙層疊帳法的捕獲率都高于BG-trap誘捕法，與周毅彬等研究結(jié)果一致(周毅彬等，2011)，人誘法對(duì)伊蚊的引誘更敏感。但與韋凌婭等關(guān)于BG-trap誘捕法和雙層疊帳法的研究結(jié)果不同(韋凌婭等，2019)，后者研究結(jié)果顯示BG-trap誘捕法的捕獲效率高于雙層疊帳法。這可能與兩種研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不同有關(guān)，本研究采用了兩因素三水平的的拉丁方實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，并且每次監(jiān)測(cè)后將蚊蟲無損地釋放，保證了每種方法的監(jiān)測(cè)環(huán)境蚊蟲背景密度一致，后者研究結(jié)果可能因?yàn)楸O(jiān)測(cè)環(huán)境蚊蟲背景密度不一致導(dǎo)致。也可能因?yàn)轫f凌婭等研究中BG-trap增加了CO2誘捕因素，增強(qiáng)了誘捕效果。本研究與田野等對(duì)雙層疊帳法、人誘停落法研究結(jié)果也不同(田野等，2018)，后者研究結(jié)果顯示人誘停落法對(duì)伊蚊的捕獲效率顯著高于雙層疊帳法，而本研究結(jié)果這兩種方法的捕獲效率沒有顯著差異，也可能因?yàn)閷?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)不同，監(jiān)測(cè)環(huán)境蚊蟲背景密度不一致。本研究BG-trap誘捕總數(shù)與其他兩種方法誘捕的總數(shù)都無顯著相關(guān)性，可能因?yàn)锽G-trap誘捕總數(shù)較少，數(shù)據(jù)呈離散狀態(tài)，不能反應(yīng)蚊蟲背景密度。

綜合本研究結(jié)果和文獻(xiàn)分析，人誘停落法和雙層疊帳法較BG-trap誘捕法更敏感，BG-trap誘捕法與另兩種方法無顯著相關(guān)性，因而BG-trap不能替代另外兩種方法進(jìn)行伊蚊密度的快速監(jiān)測(cè)。而增加CO2后是否適合開展伊蚊監(jiān)測(cè)、是否可以提高誘蚊效果尚需進(jìn)一步研究驗(yàn)證。雙層疊帳法和人誘停落法的捕獲效率無顯著差異，雙層疊帳法較人誘停落法更適合開展伊蚊成蚊密度監(jiān)測(cè)，尤其是在蟲媒傳染病暴發(fā)期間目前仍是良好的應(yīng)急快速監(jiān)測(cè)方法。