李鼎 郭珊珊
摘要:制備8種中藥提取液,通過(guò)試管二倍稀釋法分析、測(cè)定各種中草藥對(duì)奶牛乳房炎主要致病菌的抑菌程度,評(píng)價(jià)各種中草藥體外抗菌活性。結(jié)果表明,黃芩對(duì)無(wú)乳鏈球菌的抑制效果最強(qiáng),最小抑菌濃度為15.63 mg/L;金銀花、瓜萎及蒲公英對(duì)大腸桿菌的抑制效果最強(qiáng),最小抑菌濃度為62.50 mg/L。
關(guān)鍵詞:中草藥;奶牛乳房炎;致病菌;體外抑菌試驗(yàn)
中圖分類(lèi)號(hào):S858.23;S859.2? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A? ? ? ? 文章編號(hào):1007-273X(2020)10-0007-02
目前,學(xué)者們對(duì)引起奶牛乳房炎的致病菌進(jìn)行了大量研究,結(jié)果顯示抗生素、呋喃類(lèi)藥物在該病的治療中均取得了明顯的效果。但隨著抗生素的廣泛應(yīng)用,奶牛乳房炎致病菌出現(xiàn)了耐藥性,對(duì)乳房炎治療效果產(chǎn)生了嚴(yán)重不良影響,且殘留藥物造成牛奶質(zhì)量下降,同時(shí)也會(huì)危害奶牛及人類(lèi)的健康。中草藥因其具有標(biāo)本兼治、低毒性、不產(chǎn)生耐藥性和無(wú)藥物殘留等優(yōu)點(diǎn)在奶牛乳房炎的治療中得到廣泛應(yīng)用。本試驗(yàn)探討了幾種中草藥在奶牛乳房炎致病菌體外抑菌試驗(yàn)中的效果,現(xiàn)將其報(bào)道如下。
1? 材料與方法
1.1? 材料
選擇并制備8種中草藥,分別為金銀花、蒲公英、魚(yú)腥草、大青葉、黃芩、黃連、瓜萎及紅花。對(duì)奶牛乳房炎致病菌進(jìn)行分離、鑒定,主要分離出2種致病菌,分別為無(wú)乳鏈球菌及大腸桿菌。
1.2? 方法
1.2.1? 制備中草藥提取液? 所有中草藥均采用單獨(dú)制備的方式,將50 g中草藥浸泡于1 L純化水中30 min;武火煮沸后用文火保持其微沸狀態(tài)30 min;用雙層紗布將藥液與藥渣分開(kāi),藥渣重復(fù)上述操作,再次濾出藥液,將2次濾出的藥液混合加熱濃縮為50 mL,此時(shí)藥液濃度為1 g/mL,用玻璃瓶裝藥液并進(jìn)行高壓滅菌,最后將玻璃瓶進(jìn)行編號(hào),放置于冰箱中備用[1]。
1.2.2? 制備菌液? 根據(jù)不同細(xì)菌培養(yǎng)條件進(jìn)行菌種接種,將其放置于37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h后對(duì)菌液進(jìn)行稀釋?zhuān)瑐溆谩?/p>
1.2.3? 抑菌試驗(yàn)? 無(wú)乳鏈球菌:將72支滅菌試管(5 mL)分為8組,每組9支,分別與8種中草藥提取液相對(duì)應(yīng),將各組中的9支試管按照順序排列并進(jìn)行編號(hào),所有試管均加入1 mL營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,在第1支試管內(nèi)加入1 mL中藥濃縮液,將藥液與培養(yǎng)基混勻;在第1支試管內(nèi)吸取1 mL加入到第2支試管內(nèi),將混合液與培養(yǎng)基混勻;在第2支試管內(nèi)吸取1 mL加入到第3支試管內(nèi),以下試管均按照上述方式進(jìn)行,直至第8支試管,將第8支試管內(nèi)液體吸出1 mL棄之,第9支試管內(nèi)不加入中草藥提取液。在上述9支試管內(nèi)分別加入制備好的0.05 mL無(wú)乳鏈球菌。將試管放置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,觀(guān)察9支試管中的細(xì)菌生長(zhǎng)情況。
大腸桿菌抑菌試驗(yàn)操作步驟與無(wú)乳鏈球菌相同。
1.3? 觀(guān)察指標(biāo)
分析、測(cè)定各種中草藥對(duì)奶牛乳房炎主要致病菌的抑菌程度,評(píng)價(jià)各種中草藥體外抗菌活性。試管內(nèi)有菌,液體會(huì)出現(xiàn)渾濁情況,記為“+”;試管內(nèi)無(wú)菌,液體保持澄清,記為“-”。
2? 結(jié)果與分析
2.1? 不同濃度、種類(lèi)的中草藥對(duì)無(wú)乳鏈球菌生長(zhǎng)的影響
由表1可見(jiàn),黃芩對(duì)無(wú)乳鏈球菌的抑制效果最強(qiáng),其最小抑菌濃度為15.63 mg/mL。
2.2? 不同濃度、種類(lèi)的中草藥對(duì)大腸桿菌生長(zhǎng)的影響
由表2可見(jiàn),金銀花、瓜萎及蒲公英對(duì)大腸桿菌的抑制效果最強(qiáng),其最小抑菌濃度均為62.50 mg/mL。
3? 小結(jié)與討論
中草藥具有純天然的特性,可起到清熱解毒、抗菌消炎的作用,并且不會(huì)產(chǎn)生耐藥性,藥物也不會(huì)在體內(nèi)殘留,與奶牛生產(chǎn)的需求相符合。因此,中草藥在奶牛乳房炎治療中得到了廣泛應(yīng)用[2]。
本試驗(yàn)中所采用的各種中草藥均具有清熱解毒、抗菌消炎的功效,同時(shí)能夠抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),但是針對(duì)不同細(xì)菌具有不同的抑制效果,最小抑菌濃度也存在一定的差異。因此在奶牛乳房炎臨床治療過(guò)程中,要注意合理選擇使用藥物,盡量選用抑菌濃度小、抑菌作用強(qiáng)的藥物,以控制藥物使用劑量,減少不良反應(yīng)的發(fā)生。
綜上所述,黃芩、金銀花、瓜萎及蒲公英等中草藥在奶牛乳房炎致病菌體外抑菌試驗(yàn)中取得了良好的效果,證明中草藥對(duì)奶牛乳房炎致病菌具有較強(qiáng)的抑制效果,臨床應(yīng)用前景良好。但是在中草藥實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中也要注意合理選擇藥物,以期達(dá)到最理想的治療效果。
參考文獻(xiàn):
[1] 廖智慧,孫立旦,陳志軍,等.復(fù)方中草藥制劑對(duì)奶牛乳房炎源大腸桿菌地方株的體外抑菌試驗(yàn)研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2018(20):188-189.
[2] 李欣寧,應(yīng)? 飛.24味中藥對(duì)奶牛乳房炎源無(wú)乳鏈球菌體外抑菌活性研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2018(16):186-188.