丁秋蕓，孫國(guó)君，孫建政，王曉娜，庫(kù)倩倩，張金生

（1石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆 石河子 832000；2沙灣縣畜牧獸醫(yī)局，新疆 沙灣 835600）

0 引言

松針富含氨基酸、微量元素、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，及黃酮、有機(jī)酸、精油等活性物質(zhì)，用作飼料對(duì)家禽和豬的生長(zhǎng)發(fā)育、免疫力和生殖功能改善等均有促進(jìn)作用[1]。然而，迄今國(guó)內(nèi)外對(duì)松針在反芻動(dòng)物生產(chǎn)上的應(yīng)用研究報(bào)道較少，且主要集中于其對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能和采食量的影響上，對(duì)動(dòng)物是否會(huì)產(chǎn)生毒副作用研究較少。已有研究表明，給妊娠后期奶牛飼喂松針可引起流產(chǎn)，而對(duì)綿羊和山羊卻沒(méi)有影響[2]。同時(shí)，松針中含有酚類(lèi)物質(zhì)、萜烯和單寧等次級(jí)代謝產(chǎn)物，在飼料中的水平和飼料養(yǎng)分消化率呈負(fù)相關(guān)[3]，酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)瘤胃微生物可產(chǎn)生負(fù)面影響[4]，表明日糧中松針?biāo)竭^(guò)高可影響反芻動(dòng)物日糧養(yǎng)分的消化率。利用松針含有的殺菌、抑菌活性物質(zhì)，已成功制作松針和苜?；旌锨噘A飼料[5-6]。但飼喂松針和苜蓿混合青貯是否影響反芻動(dòng)物體內(nèi)代謝及日糧養(yǎng)分消化率，目前尚不明確。為此，本試驗(yàn)以哈薩克羔羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物，在育肥羔羊日糧中加入不同比例松針與苜?；旌锨噘A飼料，研究松針與苜?；旌锨噘A對(duì)育肥羔羊血液生化指標(biāo)和日糧養(yǎng)分消化率的影響，為其在羔羊生產(chǎn)上的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間和試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)于2019 年9 月至2019 年11 月新疆沙灣縣肉羊育肥場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)期75d，其中預(yù)飼期15d，正試期60d。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)。選擇50 只體質(zhì)健康、體重相近（35.31±1.49kg）的哈薩克公羔羊（4月齡斷奶），隨機(jī)分為5 組，即試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組，每組10只羔羊，共5個(gè)處理，每個(gè)處理2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5 只羔羊。以干物質(zhì)為基礎(chǔ)，日糧精粗比為50∶50，粗飼料中小麥秸稈占30%，青貯飼料占70%，青貯飼料由10%玉米與苜?；旌锨噘A和30%松針與苜蓿混合青貯2 種混合青貯組成。以鮮重計(jì)，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組青貯飼料中，30%松針與苜?；旌锨噘A所占比例分別為0、1/6、1/3、2/3、1，則各試驗(yàn)組青貯飼料松針?biāo)急壤謩e為0、5%、10%、20%和30%。

1.3 青貯飼料的制作

玉米、松針與苜蓿混合青貯飼料于2019 年6 月制作，原料為第一茬苜蓿鮮草、樟子松松針和玉米粉。將苜蓿鮮草切短至2～3cm，按苜蓿青草鮮重計(jì)，在苜蓿鮮草青貯中分別添加10%玉米和30%的樟子松松針，制作成2種混合青貯飼料?；旌暇鶆?，裝填于300L 青貯罐中，壓實(shí)、密封，貯存。飼喂前，將2 種苜蓿青貯按比例混合飼喂。2 種混合青貯飼料營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1，飼料消化能（DE）估測(cè)模型為DE（MJ/kg）＝17.211－0.135NDF[7]。

1.4 試驗(yàn)日糧

參照中國(guó)《肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》[8]（NY/T 816-2004）35kg體重，平均日增重為200g/d的育肥羊營(yíng)養(yǎng)需要量，及《綿羊用精飼料》[9]（GB/T 20807-2006）設(shè)計(jì)日糧配方。日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。

1.5 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)羊采用舍飼地面平養(yǎng)，人工飼喂。試驗(yàn)前對(duì)試驗(yàn)羔羊進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)、消毒及編號(hào)等操作。試驗(yàn)期內(nèi)對(duì)圈舍進(jìn)行定期消毒。每天9:00 和18:00 定時(shí)飼喂，先粗料后精料，自由飲水，每周記錄1 次飼料添加量和剩料量。

1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法

表1 混合青貯飼料營(yíng)養(yǎng)成分（DM basis）Table 1 Nutritional components of mixed silage（DM basis）

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 2 Composition and nutrient levels of basal diet（DM basis）

1.6.1 血液生化指標(biāo)測(cè)定

在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每組羔羊頸靜脈采血，每只羔羊分別用抗凝真空管和普通真空管采集血液，用于全血和血清成分分析。將普通真空管采集的血液于室溫下靜置30min 后，3000r/min 離心10min，收集血清并分裝于1.5mL 離心管中，-20℃冷凍保存，備用。

血液血紅蛋白含量采用半自動(dòng)生化分析儀（RT-1904C型，上海）測(cè)定。

血清總蛋白、白蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、血清尿素氮及肌酐含量，采用試劑盒法測(cè)定，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.6.2 日糧養(yǎng)分消化率測(cè)定

糞樣采集與制備：在試驗(yàn)期最后3d，每組隨機(jī)選取3 只羔羊，采用全收糞法收集糞樣。每天稱(chēng)取每只的排糞量，每天取每只羊總糞樣的20%，并將3d 的糞樣單獨(dú)混合，取總量的1/10 加入10%的H2SO4，一般按每100g 鮮糞樣加10%的H2SO4溶液20mL 進(jìn)行處理，用于測(cè)定粗蛋白，再取1/10 不加H2SO4，將糞樣置于65℃烘箱中制成半干樣，消化試驗(yàn)結(jié)束后，將3d累積糞樣混合、粉碎，過(guò)40目網(wǎng)篩，制成分析樣本，備測(cè)。

飼料樣品采集與制備：按四分法收集精料料樣，青貯飼料在烘箱中65℃烘干制成風(fēng)干樣，粉碎后備用。

參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[10]，測(cè)定飼料及糞樣中干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）、鈣（Ca）、磷（P）含量。其中干物質(zhì)含量采用烘箱烘干法測(cè)定，粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測(cè)定；中性洗滌纖維含量、酸性洗滌纖維含量采用范式法測(cè)定；鈣含量采用高錳酸鉀法測(cè)定；磷含量采用比色法測(cè)定。

養(yǎng)分消化率（%）＝（食入養(yǎng)分量－糞中養(yǎng)分量）÷食入養(yǎng)分量×100%

1.7 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS11.5 統(tǒng)計(jì)軟件中的ANOVA對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因子方差分析，Duncan氏法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 松針與苜?；旌锨噘A對(duì)育肥羔羊血液生化指標(biāo)的影響

由表3 可知，5 個(gè)試驗(yàn)組間的的血清總蛋白、白蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、肌酐、尿素氮含量，以及血液血紅蛋白含量均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

2.2 松針與苜蓿混合青貯對(duì)育肥羔羊日糧養(yǎng)分消化率的影響

由表4可知，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組間日糧干物質(zhì)消化率無(wú)顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組顯著高于試驗(yàn)Ⅴ組（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組間的日糧粗蛋白質(zhì)消化率無(wú)顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)Ⅰ組顯著高于試驗(yàn)Ⅴ組（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組間中性洗滌纖維消化率無(wú)顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ組明顯高于試驗(yàn)Ⅴ組（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組間酸性洗滌纖維消化率無(wú)顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)Ⅰ組顯著高于Ⅳ、Ⅴ組（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組間無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。隨著松針添加量的增加育肥羔羊?qū)︹}、磷的消化率呈下降趨勢(shì)，但各組間鈣、磷消化率無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

表3 松針與苜?；旌锨噘A對(duì)羔羊血液生化指標(biāo)的的影響Table 3 Influenc of pine needles and alfalfa mixed silage on blood biochemical index of lambs

表4 松針與苜?；旌锨噘A對(duì)羔羊日糧養(yǎng)分消化率的影響Table 4 Influenc of pine needles and alfalfa mixed silage on the dietary nutrient digestibility for lambs

3.1 松針與苜蓿混合青貯對(duì)育肥羔羊血液生化指標(biāo)的影響

血清總蛋白由白蛋白和球蛋白組成，有維持血漿正常膠體滲透壓、運(yùn)輸脂肪酸和膽紅素、維持血漿PH值恒定等作用[11]，血清總蛋白水平的高低能直接反映機(jī)體的代謝狀況和免疫水平。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要分布在肝細(xì)胞漿，兩者是常用的體現(xiàn)肝臟功能的指標(biāo)。谷丙轉(zhuǎn)氨酶是肝臟高度特異性酶，肝損傷時(shí)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶釋放到血液中，血清中酶活性升高。谷草轉(zhuǎn)氨酶為器官中度特異性酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性升高見(jiàn)于肝炎急性期及藥物中毒性肝細(xì)胞壞死等[12]。肌酐是蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物，大部分由腎臟隨尿排出。腎功能不全時(shí)，肌酐在體內(nèi)蓄積過(guò)量便成為有害的毒素，影響消化系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)等代謝[13]。血清尿素氮是動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的主要終產(chǎn)物，血清中尿素氮濃度可以準(zhǔn)確反映動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸平衡狀況，尿素氮上升表明機(jī)體蛋白代謝或氨基酸平衡狀況異常。血紅蛋白是紅細(xì)胞內(nèi)含有的一種特殊的蛋白質(zhì)，主要功能是運(yùn)輸氧氣和二氧化碳，可反映貧血的程度?，F(xiàn)有文獻(xiàn)表明，綿羊血清指標(biāo)正常值范圍為總蛋白62.1～70.0g·L-1、白蛋白37.1～43.7g·L-1、谷草轉(zhuǎn)氨酶40.0～123.0U·L-1、谷丙轉(zhuǎn)氨酶25.0～70.0U·L-1、肌 酐61.8～265.2μmol·L-1、血 清 尿 素 氮5.4～12.9mmol·L-1。血液血紅蛋白含量正常值范圍為80～160g·L-1[14]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同比例松針與苜?；旌锨噘A對(duì)育肥羔羊血液生化指標(biāo)無(wú)顯著影響，且均在正常值范圍內(nèi)。證明飼喂松針與苜?；旌锨噘A沒(méi)有損傷育肥羔羊肝、腎功能，對(duì)體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝無(wú)影響，這與熊筱娟等[15]（1989）報(bào)道，松針煎液沒(méi)有影響家兔的生長(zhǎng)、血象及肝、腎功能，對(duì)心、肝、脾、胃、腎組織也無(wú)病理改變的研究結(jié)果相似，進(jìn)一步證明松針毒性極低，可作為飼料資源開(kāi)發(fā)利用。

3.2 松針與苜?；旌锨噘A對(duì)育肥羔羊日糧養(yǎng)分消化率的影響

在本試驗(yàn)日糧條件下，育肥羔羊日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的消化率隨著混合青貯中松針?biāo)降脑黾?，呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。飼喂30%松針與苜?；旌锨噘A，日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維消化率最低，且顯著低于對(duì)照組。其主要原因是松針中所含酚類(lèi)物質(zhì)、萜烯和單寧等次級(jí)代謝產(chǎn)物，隨日糧中松針?biāo)降奶岣咂浜吭黾樱瑢?duì)飼料養(yǎng)分的消化產(chǎn)生負(fù)面影響[16]。Wiedmeier 等[17]（1992）通過(guò)動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)表明，松針對(duì)體內(nèi)瘤胃微生物種群具有毒性作用，特別是對(duì)纖維分解菌影響較大。單寧對(duì)飼料消化率有負(fù)面影響，已發(fā)現(xiàn)日糧中高水平單寧可抑制微生物對(duì)植物細(xì)胞壁的分解作用[18]。另外，低分子量的酚類(lèi)物質(zhì)也可限制微生物對(duì)結(jié)構(gòu)性碳水化合物的降解[19]。Hawke[20]（1985）報(bào)道，枯松針和鮮松針在綿羊體內(nèi)的干物質(zhì)消化率分別為23.4%和35.0%，而干草和鮮牧草分別為60.0%和74.1%。本試驗(yàn)中隨著混合青貯中松針?biāo)降脑黾?，羔羊日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的消化率顯著降低，這與Adams 等[21]（1992）用12.5%、25%、50%的松針?lè)厶娲蒿曃垢嵫颍S松針添加水平的提高，日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維消化率顯著降低，且均低于對(duì)照組的試驗(yàn)結(jié)果相似；Pfister 等[22]（1992）以15%、30%的松針?lè)厶娲刹輰?duì)日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和酸性洗滌纖維的消化率無(wú)顯著影響，以40%的松針?lè)厶娲刹輨t顯著降低閹牛日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)和酸性洗滌纖維的消化率，也證明過(guò)量飼喂松針可降低動(dòng)物日糧養(yǎng)分消化率。

研究表明，鈣離子可與植物中單寧絡(luò)合，形成不溶性鈣，進(jìn)而阻礙機(jī)體對(duì)鈣離子的吸收[23]。在綿羊體內(nèi)試驗(yàn)中，隨飼糧中單寧水平（0、1.70、3.40g/kg DM）的增加，鈣消化率有降低趨勢(shì)，對(duì)磷的消化率無(wú)影響[24]。本試驗(yàn)也顯示出相似的結(jié)果，隨日糧中松針比例的增加，育肥羔羊日糧鈣、磷的消化率無(wú)顯著變化，證明各試驗(yàn)組日糧單寧水平對(duì)鈣、磷消化率無(wú)影響。

4 結(jié)論

綜合分析本次試驗(yàn)結(jié)果，育肥羔羊采食不同比例松針與苜?；旌锨噘A飼料，對(duì)育肥羔羊血液生化指標(biāo)無(wú)顯著影響，且均在正常值范圍內(nèi)，證明松針與苜?；旌锨噘A飼料對(duì)羔羊無(wú)毒副作用；松針與苜?；旌锨噘A中松針比例為30%時(shí)，顯著降低育肥羔羊日糧干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的消化率。提示在青貯飼料干物質(zhì)占粗飼料70%的飼喂條件下，苜?；旌锨噘A中松針比例以低于30%為宜。今后有待研究的問(wèn)題：（1）松針與苜?；旌锨噘A前后酚類(lèi)物質(zhì)、萜烯和單寧等主要次級(jí)代謝產(chǎn)物含量的變化。（2）飼喂松針與苜?；旌锨噘A飼料對(duì)綿羊瘤胃微生物的影響。