趙珺睿 賀英 張嬌嬌

天津紅日藥業(yè)股份有限公司 天津 301700

超高效液相色譜法（UPLC）是一種應(yīng)用于藥物檢測(cè)、食品檢測(cè)等檢測(cè)領(lǐng)域的一種化學(xué)成分分離技術(shù)，其與高效液相色譜法（HPLC）的原理相同，可對(duì)相關(guān)藥物進(jìn)行快速檢測(cè)，具備分離速度快、適用范圍廣、自動(dòng)化程度準(zhǔn)確度高等特點(diǎn)。在藥物檢驗(yàn)分析領(lǐng)域，UPLC比HPLC的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)更加突出，可快速、準(zhǔn)確地分析出藥物的復(fù)雜組分，具備極高的推廣應(yīng)用價(jià)值。

1 UPLC的優(yōu)勢(shì)

1.1 速度

超高效液相色譜法（UPLC）色譜柱多采用新型全多孔球形1.7μm反相固定相，該固定相是應(yīng)用“雜化顆粒技術(shù)”合成的，并由此制備了高柱效的ACQUITY UPLC色譜柱。這使得在常規(guī)高效液相色譜需要30分鐘時(shí)間的樣品分析在超高效液相色譜短短為僅需5分鐘，并呈現(xiàn)出色譜柱柱效達(dá)20萬(wàn)塊/m理論塔板數(shù)的超高柱效[1]。

1.2 靈敏度

我們知道UPLC色譜柱中使用的是1.7μm固定相，分離獲得的色譜峰半蜂寬小于1s，這就對(duì)檢測(cè)器的要求是極高的。通常情況下，對(duì)于光源而言，主要運(yùn)用可變波長(zhǎng)的紫外光或二極管陣列系統(tǒng)。在使用的檢測(cè)方法中，這一檢測(cè)方法與普通的檢測(cè)方法相似。然而，在實(shí)際的檢測(cè)中，會(huì)用到高效微粒固定相檢測(cè)法，與此同時(shí)，在高壓輸液泵等儀器的共同檢測(cè)下，在極大程度上，可以保證檢測(cè)結(jié)果的科學(xué)性、合理性。

1.3 自動(dòng)化

對(duì)于UPLC的進(jìn)樣系統(tǒng)，常規(guī)的手動(dòng)進(jìn)樣閥和自動(dòng)進(jìn)樣閥都不能滿(mǎn)足系統(tǒng)需求了。在UPLC中為保護(hù)色譜柱不受極端高壓力波動(dòng)的影響，進(jìn)樣過(guò)程應(yīng)當(dāng)相對(duì)無(wú)壓方波動(dòng)，進(jìn)樣系統(tǒng)的死體積必須足夠小，以降低樣品譜帶的擴(kuò)展。針對(duì)這個(gè)問(wèn)題，UPLC的自動(dòng)化進(jìn)樣器的設(shè)計(jì)有了新突破：針內(nèi)針進(jìn)樣探頭（XYZZ）為高速進(jìn)樣機(jī)械裝里，可快速進(jìn)樣。為了降低進(jìn)樣時(shí)的交叉污染，采用一強(qiáng)、一弱的雙溶劑的進(jìn)樣針清洗步驟，這兩種洗針溶劑需同時(shí)得到良好的脫氣。此技術(shù)可保證可靠、重現(xiàn)的進(jìn)樣；在自動(dòng)進(jìn)樣器內(nèi)，可安置96位或384位樣品盤(pán)。每個(gè)位置可放置2或4mL樣品瓶。新型的樣品組織器可接受21個(gè)樣品盤(pán)的編程。一般而言，對(duì)于快速進(jìn)樣周期而言，在保證UPLC高樣品容量的情況下，能夠?qū)崿F(xiàn)高速度，與此同時(shí)，能夠使無(wú)人照管，長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行的自動(dòng)進(jìn)樣得以實(shí)現(xiàn)，還具有極低交叉污染的小體積進(jìn)樣能力。由于該技術(shù)的分離速度，靈敏度和自動(dòng)化方面有更大的優(yōu)勢(shì)，相信會(huì)在各大實(shí)驗(yàn)室得到認(rèn)可[2]。

2 藥物分析現(xiàn)狀

當(dāng)前，UPLC作為一種常用的檢驗(yàn)分析技術(shù)，已經(jīng)被應(yīng)用于藥品分析、藥物代謝動(dòng)力學(xué)、中藥成分分析中，其在藥物檢測(cè)分析領(lǐng)域取得了良好的應(yīng)用效果。

2.1 應(yīng)用于藥品定性與定量分析

在藥品檢驗(yàn)分析中，樣品分離難度高、分析時(shí)間長(zhǎng)一直是藥品檢驗(yàn)分析的弊端。而應(yīng)用UPLC進(jìn)行藥品檢驗(yàn)分析，可彌補(bǔ)上述弊端，提高藥品檢測(cè)的靈敏度和藥品分析準(zhǔn)確性。如，利用UPLC可準(zhǔn)確測(cè)定人凝血因子VII中枸櫞酸離子含量，從而可以保證精確測(cè)量，進(jìn)而使人體的各項(xiàng)指標(biāo)趨于平穩(wěn)[3]。除此之外，由于UPLC具有高分離度、高速度、高靈敏度的優(yōu)勢(shì)，因此，UPLC還被成功應(yīng)用于松乳劑、曲安西隆乳劑等合成藥物，以及中間體、副產(chǎn)物的檢驗(yàn)分析中，提高了檢測(cè)分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.2 應(yīng)用于藥物代謝動(dòng)力學(xué)

目前，在醫(yī)藥學(xué)領(lǐng)域中，針對(duì)藥物代謝動(dòng)力學(xué)方面的研究主要集中在以下幾個(gè)方面：藥物在體內(nèi)的分布情況、藥物在人體內(nèi)的吸收、代謝和排泄。研究?jī)?nèi)容包括藥物分析測(cè)定、藥物代謝和基質(zhì)分離、代謝物定量分析等。相關(guān)研究結(jié)果表明，UPLC在藥物代謝產(chǎn)物檢測(cè)中的分離效率較高，不僅如此，UPLC還能對(duì)樣品進(jìn)行定量分析。利用UPLC-MS/MS系統(tǒng)可以測(cè)定人體血漿當(dāng)中的喹那普利和喹那普利拉的含量。UPLC檢驗(yàn)分析過(guò)程的耗時(shí)較短且準(zhǔn)確度高，便可測(cè)定出血清中氯氮平及去甲可待因的含量，從而計(jì)算出人體血漿中洛匹那韋和利托那韋的濃度，進(jìn)而給后期的檢測(cè)工作奠定良好的基礎(chǔ)。綜上，在藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究中，應(yīng)用UPLC能夠使檢測(cè)分析結(jié)果更加精確[4]。

2.3 藥物分析在藥品研究的重要性

一般而言，藥物自身的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)至關(guān)重要，通常情況下，能夠說(shuō)成藥物結(jié)構(gòu)影響了藥效，除此之外，還可以影響藥物在體內(nèi)的吸收、分布過(guò)程。然而，因?yàn)槿梭w在一定程度上，對(duì)藥物有具體的處理方式，并不是具有活性部位的分子都可以做藥物使用。藥物發(fā)揮藥理活性的僅僅是它結(jié)構(gòu)的一部分，為了能發(fā)揮這種活性，還需要另外一些輔助結(jié)構(gòu)保證該分子能經(jīng)受人體的處理而到達(dá)靶部位[5]。

3 超高效液相色譜法在藥物成分分析中的應(yīng)用

3.1 中藥制劑

對(duì)于中藥制劑來(lái)講，因?yàn)槠渌煞窒鄬?duì)較多，同時(shí)伴隨著目標(biāo)檢測(cè)物的含量較低，以及加上相似物較多，因此，在實(shí)際的工作中，進(jìn)行定量分析有一定的難度。但是，對(duì)于這一方法而言，其具有一定的優(yōu)勢(shì)，如：可以解決相應(yīng)的難題，并且在具體的鑒定中，有顯著的成效。再者，其在復(fù)方中藥制劑中，也有顯著的成效，進(jìn)而可以給藥品質(zhì)量控制，帶來(lái)科學(xué)、有效的檢測(cè)方法。除此之外，其在化學(xué)藥物，生物制劑等領(lǐng)域也有所運(yùn)用。

3.2 中藥材質(zhì)量分析

根據(jù)相關(guān)的研究表明，這一方法在實(shí)際的分析中，擁有顯著的效果，與此同時(shí)，就有相關(guān)人士使用這一方法，對(duì)相應(yīng)的成分進(jìn)行有效的檢測(cè)。通常情況下，中藥指紋譜圖是首要的方法之一，并且有相關(guān)人士使用這一方法，制作了黃芪的指紋圖譜，再者，建立超高效液相色譜指紋圖譜，這一方法在實(shí)際的應(yīng)用中，具有顯著的成效[6]。

3.3 檢測(cè)制藥廢水中的應(yīng)用

一般而言，在制藥廢水中擁有許多殘留藥物成分，其會(huì)給環(huán)境帶來(lái)嚴(yán)重的危害，基于這一現(xiàn)狀，對(duì)于廢水的治理成為當(dāng)今首要的任務(wù)。高效液相色譜儀可同時(shí)測(cè)定制藥廢水中的交沙霉素、茶堿和撲熱息痛的含量，通過(guò)檢測(cè)制藥廢水，尋找合適的方法去除制藥廢水中對(duì)環(huán)境有害的物質(zhì)[7]。

4 結(jié)語(yǔ)

超高效液相色譜法在高速和高壓環(huán)境下可實(shí)現(xiàn)高效分離，保證藥物檢驗(yàn)質(zhì)量。而高效液相色譜法對(duì)檢驗(yàn)環(huán)境的限制條件相對(duì)較多，一旦面臨檢驗(yàn)環(huán)境變化，就會(huì)降低樣品分離效率，影響藥物檢驗(yàn)分析質(zhì)量?，F(xiàn)階段，隨著這一技術(shù)的不斷應(yīng)用，與此同時(shí)，能夠給市場(chǎng)監(jiān)管帶來(lái)有效的輔助功能。特別是在相似藥品的檢測(cè)中，能夠有顯著的鑒別作用，希望通過(guò)本文的研究能夠給相關(guān)人士帶來(lái)一定的借鑒意義[8]。