卞亞 范婧 王益群 黃嵐

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在藥物臨床前研究、臨床研究、藥學(xué)研究以及藥物生產(chǎn)中，化學(xué)對照品有著非常重要的作用[1]。根據(jù)來源不同，化學(xué)對照品可分為法定對照品和工作對照品。法定對照品通常由各藥典委員會(huì)等管理機(jī)構(gòu)授權(quán)的實(shí)驗(yàn)室制備并發(fā)放。常用的法定對照品有中檢院對照品、美國藥典對照品、歐洲藥典對照品等。工作對照品是指使用機(jī)構(gòu)按照相應(yīng)法規(guī)要求進(jìn)行賦值的活性物質(zhì)。藥品研究中應(yīng)首先選用法定對照品，但是藥物研究中普遍存在對照品的應(yīng)用超前于授權(quán)機(jī)構(gòu)制備、雜質(zhì)對照品不全、價(jià)格過于昂貴等情況，此時(shí)也可以使用工作對照品進(jìn)行研究。

本文擬參考國家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的要求，結(jié)合藥物研究實(shí)際情況，對藥物研究過程中工作對照品的獲得、表征、賦值和使用等管理進(jìn)行討論。

1 工作對照品的獲得

工作對照品可以通過購買或者自制的方法獲得。供應(yīng)商可以是西格瑪、默克等知名的試劑公司，也可以是其他具有較好質(zhì)量管理體系的供應(yīng)商。應(yīng)對供應(yīng)商進(jìn)行審核確認(rèn)，并對相關(guān)憑證進(jìn)行保存。

如果原料藥的純度達(dá)到要求，可以直接使用原料藥，也可以采取適當(dāng)條件對原料藥進(jìn)行精制。雜質(zhì)對照品除可以通過合成外，也可通過對原料藥進(jìn)行破壞降解、分離純化等方法進(jìn)行制備。在未知雜質(zhì)的獲得上，制備色譜技術(shù)目前得到了越來越廣泛的應(yīng)用。

2 工作對照品的表征

應(yīng)選擇專屬性較強(qiáng)的方法對工作對照品進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征?？梢酝ㄟ^元素分析、紅外光譜法、核磁共振譜、單晶X射線衍射等方法進(jìn)行。由于雜質(zhì)對照品（特別是光學(xué)異構(gòu)體）往往結(jié)構(gòu)相似度較高，因此結(jié)構(gòu)表征往往需要多種方法互相印證來證明樣品的結(jié)構(gòu)與預(yù)期結(jié)構(gòu)一致。

3 工作對照品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立

若有法定標(biāo)準(zhǔn)，工作對照品的標(biāo)準(zhǔn)可以參考法定標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上提高純度要求制定。若無法定標(biāo)準(zhǔn)，則可參照《原料藥質(zhì)量研究及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定指導(dǎo)原則》并結(jié)合對照品的用途來制定。一般應(yīng)包括水分（或干燥失重）、殘留溶劑、熾灼殘?jiān)⒂嘘P(guān)物質(zhì)和純度等。有時(shí)熔點(diǎn)、比旋度等作為純度的重要指標(biāo)也需要訂入。

工作對照品純度要求可以根據(jù)用途來確定[2-3]，如供含量測定純度應(yīng)不低于99.5%；僅供有關(guān)物質(zhì)檢查純度不低于95.0%；僅供紅外鑒別純度不低于98.0%；僅供薄層鑒別純度不低于90.0%；其他鑒別純度不低于85.0%。

4 工作對照品的賦值

工作對照品的賦值應(yīng)根據(jù)情況分別選用不同的方法進(jìn)行[4]。

（1）當(dāng)待賦值的工作對照品有法定對照品的情況下，首選按法定用途的方法與法定對照品比對來賦值。

（2）若無法定對照品進(jìn)行比對，可采用質(zhì)量平衡法進(jìn)行賦值。以經(jīng)驗(yàn)證的色譜法確定純度后扣除無機(jī)雜質(zhì)、水分和有機(jī)溶劑等后的理論含量來賦值。需要注意的是雖然均使用質(zhì)量平衡法，但是WHO和USP給出的含量的計(jì)算公式并不一致。

（3）鑒別、檢查用工作對照品可以在一個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通過不同實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行賦值，而對于含量測定用工作對照品應(yīng)經(jīng)過多個(gè)實(shí)驗(yàn)室協(xié)作標(biāo)定。

5 工作對照品的貯藏和使用

當(dāng)建立一個(gè)新的工作對照品時(shí)，必須同時(shí)建立其貯藏和使用的方法。一般來說使用冷藏的方法可以顯著提高工作對照品的穩(wěn)定性。但是在常規(guī)的冰箱中，濕度可能會(huì)對工作對照品的穩(wěn)定性產(chǎn)生很大的影響。因此需要充分研究工作對照品的引濕性以及熱穩(wěn)定性。工作對照品的貯藏使用方法可參考下列要求。

（1）當(dāng)工作對照品無引濕性時(shí)，可密封后冷藏儲(chǔ)存，按照標(biāo)定的含量直接使用。

（2）工作對照品有引濕性時(shí)但是對熱不敏感，此時(shí)應(yīng)密封保存，干燥后使用。

（3）當(dāng)工作對照品有引濕性時(shí)且對熱敏感，此時(shí)應(yīng)密封后冷藏儲(chǔ)存，使用前測定水分。

6 工作對照品的穩(wěn)定性考察

應(yīng)根據(jù)對照品的不同用途，分別制定其穩(wěn)定性考察的計(jì)劃，規(guī)定其考察周期、實(shí)驗(yàn)方法和接受標(biāo)準(zhǔn)。譬如如紅外鑒別用對照品可以其紅外光譜與初始圖譜進(jìn)行每年一次進(jìn)行比對。對于色譜法含量測定用化學(xué)對照品則應(yīng)通過更密集的取樣檢測確定其降解情況，并可根據(jù)穩(wěn)定性檢查結(jié)果來預(yù)測其后續(xù)穩(wěn)定性情況，同時(shí)對檢查頻率進(jìn)行調(diào)整。

對于可能會(huì)開封后反復(fù)使用的對照品，應(yīng)建立適當(dāng)?shù)姆椒▽﹂_封后對照品的穩(wěn)定性進(jìn)行考察，以確定開封后的使用條件。

7 工作對照品的換批

由于藥物研究是一個(gè)周期性非常長的過程，制備的工作對照品穩(wěn)定性可能無法覆蓋整個(gè)研究過程。因此我們需要對工作對照品的穩(wěn)定性結(jié)果及時(shí)評估，確認(rèn)好需要換批的時(shí)機(jī)，防止對藥物的研究造成不良影響。