王 霞, 曾曉萍, 梁光義, 孟雪玲*, 徐必學(xué)*

(1. 貴州中醫(yī)藥大學(xué)，藥學(xué)院，貴州 貴陽 550025； 2. 貴州醫(yī)科大學(xué) 省部共建藥用植物功效與利用國家重點(diǎn)實驗室，貴州 貴陽 550014； 3. 貴州省中國科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實驗室，貴州 貴陽 550014)

癌癥是導(dǎo)致全世界發(fā)病率和死亡率的第二大疾病[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織報告，2018年全球新增1810萬癌癥患者，死于癌癥的患者達(dá)960萬人[2-3]，常規(guī)化療是治療癌癥的主要方法，常用的化療藥物可通過抑制核酸蛋白質(zhì)的合成代謝、有絲分裂、和干擾DNA復(fù)制等[4]，有效抑制癌細(xì)胞增殖。盡管在開發(fā)更好的抗癌藥物方面做出了巨大的努力，但缺乏選擇性和耐藥性削弱了癌癥化療的效果[5]，例如，卡培他濱和其前體化合物可誘發(fā)心臟毒性，引起急性冠脈綜合征[6]，順鉑可誘發(fā)高血壓，增加心臟負(fù)荷和肝損傷等[7-8]，因此，尋找和開發(fā)更好的治療策略和更有效的抗癌藥物仍然是一項艱巨的任務(wù)。

異戊烯基查爾酮類化合物具有抗腫瘤[9]的作用，同時還有抗瘧疾[10]、抗炎[11]、抗菌[12]、抗病毒[13-14]、抗氧化[15]等生物活性。Heilmann等[16]合成了43個黃腐酚類似物(Chart 1)，發(fā)現(xiàn)含硝基取代的查爾酮化合物對HeLa細(xì)胞具有很好的細(xì)胞毒性(IC50=1.4 μmol/L)。Calvo-Castro等[17]研究了啤酒花中異戊烯基查爾酮和黃酮類化合物的保健和抗癌活性，其中8-prenylnaringenin(8-PN)能提高PBMC的存活率且生物利用度優(yōu)于其同分異構(gòu)體。Ma等[18]合成3-哌嗪取代的異戊烯基查爾酮(MY3)能增加DOX在細(xì)胞內(nèi)的積累，抑制P-gp在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)，且對MCF7細(xì)胞和MCF-7/DOX細(xì)胞有明顯抑制作用。

本課題組[19-20]前期設(shè)計合成的化合物C10(Chart 1)對前列腺癌細(xì)胞株(PC3)，乳腺癌細(xì)胞株(MDA)，人紅白血病細(xì)胞株(HEL)及紅白血病細(xì)胞株(K562)具有較好的抑制活性，為進(jìn)一步考察查爾酮B環(huán)不同取代基以及引入各種雜環(huán)對其抗腫瘤活性的影響，設(shè)計合成了B環(huán)含三羥基(或烷氧基)和單異戊烯基取代的查爾酮衍生物。以2,4,6-三羥基苯乙酮作為起始原料，通過與MOMCl選擇性反應(yīng)得單羥基中間體1，再經(jīng)異戊烯基取代得到已知化合物2;2經(jīng)克萊森重排得已知化合物3;3經(jīng)甲基化反應(yīng)得已知化合物4[16]，將4與3-溴-4-甲氧基苯甲醛、糠醛或吡啶-3-甲醛等不同芳基甲醛進(jìn)行縮合得中間體5;5經(jīng)酸性條件下脫MOM保護(hù)基得目標(biāo)化合物6a～6i；將中間體4在酸性條件下脫MOM保護(hù)基[21]得中間體7;7經(jīng)甲基化得中間體8，然后分別與吡啶-3-甲醛、2-噻吩甲醛、2-萘甲醛等經(jīng)羥醛縮合即得目標(biāo)化合物9a～9f(Scheme 1)。所得目標(biāo)化合物均經(jīng)1H NMR、13C NMR和ESI-MS進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證，采用MTT法評價了所得目標(biāo)化合物對5種腫瘤細(xì)胞株的體外抑制活性。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Bruker Avance NEO 600 MHz型核磁共振儀(DMSO-d6或CDCl3為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo))；Hewlett-Packard HP-5793型質(zhì)譜儀。

參照文獻(xiàn)[16]方法，合成化合物1、2、3和4；其余所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1)5的合成(以5a為例)

取化合物4167 mg(0.49 mmol)置于10 mL反應(yīng)瓶中，氬氣保護(hù)下，加入乙醇和1,4-二氧六環(huán)(3 mL/2 mL)，攪拌10 min，加入3-溴-4-甲氧基苯甲醛212 mg(0.99 mmol)，再加入148 μL NaOH(40%,m/V)，室溫攪拌反應(yīng)19 h(TLC檢測)。將反應(yīng)液分散于乙酸乙酯和1 mol·L-1稀鹽酸中，分液，乙酸乙酯層依次用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/25，V/V) 純化得黃色固體5a168.0 mg, 收率88.6%, m.p.219.8～220.5 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 7.73(d,J=2.1 Hz, 1H), 7.45(dd,J=8.6 Hz, 2.1 Hz, 1H), 7.29(d,J=16.1 Hz, 1H), 6.88(d,J=3.4 Hz, 1H), 6.86(d,J=10.7 Hz, 1H), 6.58(s, 1H), 5.23(s, 2H), 4.90(s, 2H), 3.91(s, 3H), 3.75(s, 3H), 3.49(s, 3H), 3.41(s, 3H), 3.34(d,J=6.8 Hz, 2H), 1.75(s, 3H), 1.67(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 193.7, 157.7, 157.4, 156.3, 154.1, 142.3, 133.0, 131.2, 129.2, 129.0, 127.8, 123.2, 118.3, 117.2, 112.2, 111.8, 100.8, 94.9, 94.4, 57.5, 56.4, 56.1, 56.1, 25.7, 23.1, 17.9; MS(ESI)m/z: 558.4{[M+Na]+}。用類似方法合成中間體5b～5i。

Chart 1

Scheme1

(2)6的合成

取5a168 mg(0.31 mmol)置于10 mL反應(yīng)瓶中，氬氣保護(hù)下，加入甲醇(28 mL)，攪拌溶解，加入1.7 mL稀鹽酸(3 mol·L-1)， 65 ℃反應(yīng)3 h(TLC檢測)。將反應(yīng)液分散于乙酸乙酯和水中，乙酸乙酯層依次用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/10，V/V)純化得黃色粉末狀固體6a42.1 mg，收率30.0%, m.p.219～220 ℃;1H NMR(DMSO-d6, 600 MHz)δ: 14.43(s, 1H), 10.64(s, 1H), 7.93(d,J=2.3 Hz, 1H), 7.79(d,J=15.6 Hz, 1H), 7.74(d,J=8.6 Hz, 1H), 7.63(d,J=15.6 Hz, 1H), 7.17(d,J=7.6 Hz, 1H), 6.09(s, 1H), 5.15(t,J=6.6 Hz, 1H), 3.91(s, 3H), 3.86(s, 3H), 3.15(d,J=7.0 Hz, 2H), 1.70(s, 3H), 1.61(s, 3H);13C NMR(DMSO-d6, 151 MHz)δ: 192.0, 165.0, 163.2, 161.1, 157.3, 140.5, 133.3, 130.4, 129.7, 126.9, 123.4, 113.4, 111.7, 107.8, 105.1, 91.5, 56.9, 56.3, 25.9, 21.5, 18.1; MS(ESI)m/z: 446.1{[M-H]-}。

用類似方法合成6b～6i。

6b: 黃色粉末狀固體，收率38.4%, m.p.173～175 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.69(s, 1H), 7.80(d,J=15.3 Hz, 1H), 7.75(d,J=15.4 Hz, 1H), 7.19(d,J=8.2 Hz, 1H), 7.13(s, 1H), 6.89(d,J=8.4 Hz, 1H), 6.29(s, 1H), 5.95(s, 1H), 5.29(t,J=7.6 Hz, 1H), 4.15(q,J=7.1 Hz, 2H), 3.93(s, 3H), 3.89(s, 3H), 3.41(d,J=7.3 Hz, 2H), 1.83(s, 3H), 1.78(s, 3H), 1.49(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.7, 165.2, 161.8, 161.1, 150.4, 149.3, 142.5, 135.8, 128.5, 125.6, 122.6, 121.8, 112.3, 110.8, 106.4, 106.1, 91.2, 64.4, 55.9, 55.7, 25.8, 21.6, 17.9, 14.7; MS(ESI)m/z: 412.5{[M-H]-}。

6c： 黃色粉末狀固體，收率45.4%, m.p.154～156 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.68(s, 1H), 7.79(d,J=15.5 Hz, 1H), 7.74(d,J=15.5 Hz, 1H), 7.18(dd,J=8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.12(d,J=2.0 Hz, 1H), 6.90(d,J=8.3 Hz, 1H), 6.40(s, 1H), 5.94(s, 1H), 5.29(t,J=7.2 Hz, 1H), 4.63～4.59(m, 1H), 3.90(s, 3H), 3.87(s, 3H), 3.40(d,J=7.2 Hz, 2H), 1.82(s, 3H), 1.76(s, 3H), 1.40(s, 3H), 1.39(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.7, 165.1, 161.8, 161.1, 150.1, 149.5, 142.4, 135.5, 128.6, 125.6, 122.4, 121.8, 114.6, 111.3, 106.5, 106.1, 91.1, 71.3, 55.9, 55.7, 25.8, 22.0, 21.6, 17.9, 1.0; MS(ESI)m/z: 425.5{[M-H]-}。

6d： 黃色粉末狀固體，收率25.7%， m.p.152～153 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.91(s, 1H), 7.82(d,J=15.3 Hz, 1H), 7.75(d,J=15.4 Hz, 1H), 7.52(s, 1H), 7.51(s, 1H), 6.70(s, 1H), 6.69(s, 1H), 6.23(s, 1H), 5.94(s, 1H), 5.30(t,J=7.0 Hz, 1H), 3.89(s, 3H), 3.40(d,J=7.2 Hz, 2H), 3.03(s, 6H), 1.83(s, 3H), 1.77(s, 1H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.7, 165.1, 161.4, 161.1, 151.8, 143.7, 135.6, 130.3, 123.5, 122.4, 122.0, 111.9, 106.3, 91.0, 55.7, 40.2, 25.8, 21.7, 17.9; MS(ESI)m/z: 404.2{[M-H]-}。

6e： 黃色粉末狀固體，收率65.7%， m.p.170～171 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.62(s, 1H), 7.91(d,J=15.3 Hz, 1H), 7.74(d,J=15.2 Hz, 1H), 7.37(d,J=5.1 Hz, 1H), 7.30(d,J=3.6 Hz, 1H), 7.07(dd,J=5.1 Hz, 3.6 Hz, 1H), 6.26(s, 1H), 5.93(s, 1H), 5.29(t,J=7.2 Hz, 1H), 3.89(s, 3H), 3.40(d,J=7.2 Hz, 2H), 1.83(s, 3H), 1.77(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.1, 165.2, 162.0, 161.2, 141.3, 135.9, 134.8, 131.2, 128.3, 128.1, 126.8, 121.7, 106.3, 106.0, 91.2, 55.7, 25.8, 21.6, 17.9; MS(ESI)m/z: 343.4{[M-H]-}。

6f： 黃色粉末狀固體，收率59.0%， m.p.188～190 ℃;1H NMR(DMSO-d6, 600 MHz)δ: 14.52(s, 1H), 10.63(s, 1H), 8.04～7.99(m, 1H), 7.76～7.72(m, 2H), 7.68～7.63(m, 1H), 7.55～7.50(m, 1H), 6.09(s, 1H), 5.14(t,J=7.3 Hz, 1H), 3.87(s, 3H), 3.14(d,J=7.1 Hz, 2H), 1.70(s, 3H), 1.61(s, 3H);13C NMR(DMSO-d6, 151 MHz)δ: 192.4, 165.0, 163.2, 161.1, 138.8, 136.2, 130.4, 130.3, 128.4, 127.4, 126.1, 123.4, 107.8, 105.0, 91.4, 56.2, 26.0, 21.5, 18.1; MS(ESI)m/z: 343.4{[M-H]-}。

6g： 黃色粉末狀固體，收率55.4%， m.p.144～145 ℃;1H NMR(DMSO-d6,600 MHz)δ: 14.54(s, 1H), 10.66(s, 1H), 7.89(d,J=1.8 Hz, 1H), 7.72(d,J=15.4 Hz, 1H), 7.56(d,J=15.4 Hz, 1H), 7.00(d,J=3.4 Hz, 1H), 6.67(dd,J=3.4 Hz, 1.8 Hz, 1H), 6.10(s, 1H), 5.14(t,J=7.2 Hz, 1H), 3.85(s, 3H), 3.14(d,J=7.0 Hz, 2H), 1.70(s, 3H), 1.61(s, 3H);13C NMR(DMSO-d6, 151 MHz)δ: 191.4, 165.1, 163.2, 161.0, 151.9, 146.5, 130.5, 129.2, 124.6, 123.4, 117.1, 113.5, 107.9, 105.0, 91.5, 56.2, 25.9, 21.5, 18.1; MS(ESI)m/z: 327.1{[M-H]-}。

6h： 黃色粉末狀固體，收率70.1%， m.p.144～145 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.32(s, 1H), 10.72(s, 1H), 8.89(d,J=2.2 Hz, 1H), 8.60(dd,J=4.8 Hz, 1.6 Hz, 1H), 8.17～8.14(m, 1H), 7.99(d,J=15.8 Hz, 1H), 7.70(d,J=15.7 Hz, 1H), 7.48(dd,J=8.0 Hz, 4.7 Hz, 1H), 6.11(s, 1H), 5.15(t,J=7.1 Hz, 1H), 3.88(s, 3H), 3.15(d,J=7.2 Hz, 2H), 1.70(d,J=1.3 Hz, 3H), 1.61(d,J=1.5 Hz, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 191.4, 164.6, 163.1, 160.7, 150.6, 149.8, 137.8, 134.7, 130.9, 130.0, 129.4, 124.1, 122.9, 107.3, 104.6, 91.0, 55.8, 25.5, 21.0, 17.6; MS(ESI)m/z: 338.4{[M-H]-}。

6i： 黃色粉末狀固體，收率46.7%， m.p.192～193 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.63(s, 1H), 8.01(d,J=15.6 Hz, 1H), 7.99(s, 1H), 7.95(d,J=15.6 Hz, 1H), 7.90～7.81(m, 3H), 7.77～7.74(m, 1H), 7.54～7.49(m, 2H), 6.27(s, 1H), 5.97(s, 1H), 5.31(t,J=7.3 Hz, 1H), 3.93(s, 3H), 3.43(d, 2H), 1.84(s, 3H), 1.79(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.8, 165.2, 162.1, 161.3, 142.2, 136.0, 134.2, 133.4, 133.2, 130.3, 128.6, 128.6, 128.0, 127.8, 127.1, 126.6, 123.8, 121.7, 106.3, 106.2, 91.2, 55.9, 25.9, 21.7, 17.9; MS(ESI)m/z: 388.4{[M-H]-}。

(3)7的合成

取化合物43.0 g(8.9 mmol)置于250 mL反應(yīng)瓶，氬氣保護(hù)下，加入甲醇(50 mL)，攪拌溶解，加入29.6 mL稀鹽酸(3 mol/L)，65 ℃反應(yīng)4 h(TLC檢測)。減壓回收甲醇，反應(yīng)液用乙酸乙酯(3×100 mL)和水(3×50 mL)萃取，合并有機(jī)層，依次用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/13，V/V)純化得白色粉末狀固體1.1 g，收率50.0%。

(4)8的合成

取化合物71.1 g(4.4 mmol)和K2CO30.6 g(4.4 mmol)于50 mL反應(yīng)瓶中，氬氣保護(hù)，加入25 mL DMF，再緩慢滴加碘甲烷0.3 mL(4.4 mmol)，室溫反應(yīng)10 h(TLC檢測反應(yīng))。反應(yīng)液用乙酸乙酯(3×60 mL)和水(3×40 mL)萃取，合并有機(jī)層，依次用飽和氯化鈉洗滌，無水MgSO4干燥，濃縮，得粗品1.2 g，直接用于下一步反應(yīng)。

(5)9a～9f的合成(以9a為例)

稱取化合物893.5mg(0.35 mmol)和3-吡啶苯甲醛66.5 μL(0.71 mmol)置于10 mL反應(yīng)瓶中，氬氣保護(hù)下，加入4 mL乙醇，攪拌10 min，再加入NaOH 70.7 mg(1.77 mmol)，室溫反應(yīng)18 h(TLC檢測反應(yīng))。將反應(yīng)液分散于乙酸乙酯和1 mol/L稀鹽酸中，乙酸乙酯層依次用水和飽和氯化鈉溶液洗滌，無水MgSO4干燥，濃縮，殘余物經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/5，V/V)純化得黃色固體9a52.7 mg， 收率42.2%, m.p.106～107 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 13.90(s, 1H), 8.84(d,J=2.3 Hz, 1H), 8.58(dd,J=4.9 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.91(d,J=15.7 Hz, 1H), 7.87～7.84(m, 1H), 7.70(d,J=15.7 Hz, 1H), 7.33(dd,J=7.9 Hz, 4.8 Hz, 2H), 6.00(s, 1H), 5.19(t,J=7.1 Hz, 1H), 3.94(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.29(d,J=7.1 Hz, 2H), 1.77(s, 3H), 1.67(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.3, 164.1, 163.7, 161.3, 150.5, 149.6, 137.7, 134.7, 131.5, 131.5, 129.9, 123.7, 122.5, 110.2, 106.3, 86.5, 55.8, 55.6, 25.8, 21.4, 17.8; MS(ESI)m/z: 353.4{[M-H]-}。

9b： 黃色固體，收率58.9%， m.p.98～99 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.13(s, 1H), 7.76(d,J=15.4 Hz, 1H), 7.56(d,J=15.3 Hz, 1H), 7.50(d,J=1.7 Hz, 1H), 6.65(d,J=3.4 Hz, 1H), 6.49(dd,J=3.4 Hz, 1.8 Hz, 1H), 5.98(s, 1H), 5.21(t,J=7.1 Hz, 1H), 3.93(s, 3H), 3.89(s, 3H), 3.29(d,J=7.0 Hz, 2H), 1.78(s, 3H), 1.67(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.4, 164.1, 163.3, 161.3, 152.3, 144.5, 131.4, 128.6, 125.4, 122.8, 115.2, 112.5, 110.0, 106.4, 86.4, 55.7, 55.5, 25.8, 21.4, 17.8; MS(ESI)m/z: 341.4{[M-H]-}。

9c： 黃色固體，收率59.0%， m.p.106～107 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.11(s, 1H), 7.90(d,J=15.3 Hz, 1H), 7.71(d,J=15.3 Hz, 1H), 7.36(d,J=5.0 Hz, 1H), 7.28(d,J=3.2 Hz, 1H), 7.06(dd,J=5.1 Hz, 3.6 Hz, 1H), 5.97(s, 1H), 5.21(t,J=7.1 Hz, 1H), 3.93(s, 3H), 3.89(s, 3H), 3.30(d,J=7.0 Hz, 2H), 1.78(s, 3H), 1.68(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.3, 164.1, 163.4, 161.3, 141.3, 134.6, 131.4, 131.1, 128.3, 128.1, 127.0, 122.8, 110.0, 106.3, 86.5, 55.7, 55.5, 25.8, 21.4, 17.8; MS(ESI)m/z: 358.4{[M-H]-}。

9d： 黃色固體，收率48.4%， m.p.117～119 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.07(s, 1H), 7.77(d,J=15.5 Hz, 1H), 7.70(d,J=15.5 Hz, 1H), 7.54～7.53(m, 1H), 7.38～7.32(m, 2H), 5.99(s, 1H), 5.21(t,J=6.6 Hz, 1H), 3.93(s, 3H), 3.90(s, 3H), 3.30(d,J=7.1 Hz, 2H), 1.78(s, 3H), 1.67(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 193.1, 164.0, 163.2, 161.2, 138.9, 135.5, 131.4, 128.1, 127.6, 126.7, 125.3, 122.7, 110.1, 106.4, 86.4, 55.7, 55.5, 25.8, 21.4, 17.7; MS(ESI)m/z: 357.4{[M-H]-}。

9e： 黃色固體，收率67.5%， m.p.145～146 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.04(s, 1H), 7.73(d,J=15.5 Hz, 1H), 7.68(d,J=15.5 Hz, 1H), 7.36(d,J=12.2 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.31～7.26(m, 1H), 6.96(t,J=8.5, 1.0 Hz, 1H), 6.00(s, 1H), 5.20(t,J=7.1 Hz, 1H), 3.95(s, 3H), 3.93(s, 3H), 3.90(s, 3H), 3.29(d,J=7.0 Hz, 2H), 1.78(s, 3H), 1.67(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.7, 164.1, 163.4, 161.3, 152.4(d,J=246.6 Hz), 149.3(d,J=11.0 Hz), 140.7(d,J=3.0 Hz), 131.4, 129.0(d,J=6.4 Hz), 126.9, 126.0(d,J=3.0 Hz), 122.7, 114.4(d,J=18.5 Hz), 113.2(d,J=2.1 Hz), 110.1, 106.5, 86.5, 56.3, 55.9, 55.5, 25.8, 21.4, 17.8; MS(ESI)m/z: 399.4{[M-H]-}。

9f： 黃色固體，收率52.3%， m.p.118～120 ℃;1H NMR(CDCl3, 600 MHz)δ: 14.10(s, 1H), 8.00～7.96(m, 2H), 7.93(d,J=15.6 Hz, 1H), 7.87(dd,J=6.0 Hz, 3.6 Hz, 1H), 7.85～7.81(m, 2H), 7.75(d,J=6.9 Hz, 1H), 7.53～7.49(m, 2H), 6.01(s, 1H), 5.23(t,J=7.0 Hz, 1H), 3.97(s, 3H), 3.91(s, 3H), 3.32(d,J=7.0 Hz, 2H), 1.80(s, 3H), 1.69(s, 3H);13C NMR(CDCl3, 151 MHz)δ: 192.9, 164.1, 163.3, 161.3, 141.9, 134.1, 133.4, 133.1, 131.4, 130.2, 128.5, 128.5, 128.1, 127.7, 127.0, 126.6, 123.7, 122.7, 110.1, 106.5, 86.5, 55.8, 55.5, 25.8, 21.4, 17.8; MS(ESI)m/z: 401.4{[M-H]-}。

1.3 抗腫瘤活性

選阿霉素作為陽性對照[19]，采用MTT[22]法測試化合物對乳腺癌細(xì)胞(MDA-231)、前列腺癌細(xì)胞(LNCAP)、人肺癌細(xì)胞(A549)、腎癌細(xì)胞(A498)和宮頸癌細(xì)胞(Hela)的體外抑制活性。

2 結(jié)果與討論

2.1 合成

以中間體4通過羥醛縮合合成5的過程中，使用NaOH和EtOH的方法發(fā)現(xiàn)收率低或者反應(yīng)失敗，可能原因是中間體4的溶解性較差，采用40% NaOH水溶液，1,4-二氧六環(huán)和EtOH的條件，溶解性好，收率較高(70.0%～90.0%)。

2.2 抗腫瘤活性

目標(biāo)化合物6a～6i和9a～9f對乳腺癌細(xì)胞(MDA-231)、前列腺癌細(xì)胞(LNCAP)、人肺癌細(xì)胞(A549)、腎癌細(xì)胞(A498)和宮頸癌細(xì)胞(Hela)的抗腫瘤抑制活性見表1。

由表1可知：合成的所有化合物對Hela和A549細(xì)胞都具有一定的抑制活性，化合物6a、6b、6h、6i和9f對5種細(xì)胞株也均有一定的抑制活性。當(dāng)R為苯環(huán)鄰對位和對位取代基或芳雜環(huán)糠醛基和噻吩基時，抑制活性均明顯低于3-吡啶基和2-萘基，且苯環(huán)上有吸電子或供電子時，活性均不理想。其中化合物6h、6i和9a在5 μmol/L濃度下對A498細(xì)胞的抑制率分別為

表1 6a～6i和9a～9f的體外抗腫瘤活性

圖1 6h、 6i和9a對LO2正常細(xì)胞的毒副作用

59.12%、 49.82%和50.95%，化合物6h和6i在5 μmol/L濃度下對Hela的抑制率分別為59.19%和41.87%，化合物6h和6i對A549的抑制率分別為62.65%和54.82%。

對抗腫瘤活性較好的化合物6h、6i和9a進(jìn)行了其對LO2正常細(xì)胞毒性測驗，從圖1結(jié)果可得：6h、6i和9a在24、 48和72 h 這3個時間段對正常細(xì)胞的毒副作用均比陽性對照組阿霉素低，且6i在24 h對正常細(xì)胞呈促進(jìn)作用，48 h顯示出細(xì)胞毒性，72 h后毒性降低。

合成了15個異戊烯基查爾酮類衍生物，經(jīng)MTT法測試了其抗腫瘤抑制活性，結(jié)果顯示：所有化合物對Hela和A549細(xì)胞都有一定的抑制活性。化合物6a、6b、6h、6i和9f對5種細(xì)胞株也均有一定的抑制活性，其中化合物6h、6i和9a在5 μmol/L濃度下對A498細(xì)胞的抑制率分別為59.12%、 49.82%、 50.95%，化合物6h和6i在5 μmol/L濃度下對Hela的抑制率分別為59.19%和41.87%，化合物6h和6i在5 μmol/L濃度下對A549的抑制率分別為62.65%和54.82%。