□ 鄭 鋮 三門(mén)縣食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心
常規(guī)的食品微生物檢驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)方法主要有顯微鏡檢測(cè)法、平板培養(yǎng)法等,這些檢驗(yàn)檢測(cè)方法的應(yīng)用雖能達(dá)到檢測(cè)食品微生物的效果,但也存在一定的弊端。①顯微鏡檢測(cè)法被廣泛運(yùn)用于微生物的大小、形態(tài)檢測(cè)中,相對(duì)于其他檢測(cè)方法,涂片染色檢驗(yàn)操作較為簡(jiǎn)單,但對(duì)操作人員的理論知識(shí)、操作技術(shù)素養(yǎng)要求較高,再加上普通光學(xué)顯微鏡無(wú)法準(zhǔn)確區(qū)分死活食品微生物,進(jìn)而嚴(yán)重影響檢驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與真實(shí)性。②平板培養(yǎng)法也能在一定程度上達(dá)到檢驗(yàn)檢測(cè)食品中微生物的目的,但相較于其他檢驗(yàn)檢測(cè)方法,它的工作量較大,檢測(cè)范圍較小(僅能檢測(cè)自然環(huán)境中微生物總量的1%),培養(yǎng)要求較高(需要嚴(yán)格控制培養(yǎng)環(huán)境),經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)低估食品中致病微生物數(shù)量的情況,實(shí)際的檢驗(yàn)檢測(cè)效果較差。鑒于此,積極研究和應(yīng)用全新的食品微生物檢驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)是十分必要的。
我國(guó)傳統(tǒng)的食品微生物檢驗(yàn)方法因成本高,檢驗(yàn)周期長(zhǎng),步驟復(fù)雜限制了在食品衛(wèi)生行業(yè)的發(fā)展。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,食品微生物檢驗(yàn)檢測(cè)新技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生,從分子生物學(xué)等多種角度對(duì)生物大分子進(jìn)行研究,大大提高了食品微生物檢測(cè)的精確性和可靠性。食品微生物檢驗(yàn)新技術(shù)有核酸探針技術(shù)、生物芯片技術(shù)、生物傳感技術(shù)、ATP 生物發(fā)光技術(shù)、免疫磁性分離技術(shù)和流式細(xì)胞術(shù)等。本文將節(jié)選核酸探針技術(shù)、生物芯片技術(shù)以及生物傳感技術(shù)以及免疫磁性分離技術(shù)、高光譜圖像技術(shù)等進(jìn)行簡(jiǎn)單的分析。
核酸探針技術(shù)是運(yùn)用較為廣泛的技術(shù),在分子生物學(xué)水平上研究生物大分子,有別于傳統(tǒng)的病原微生物鑒定,不再局限于微生物的外部形態(tài)和生理特性,從分子角度探究食品衛(wèi)生,更加精確。核酸探針技術(shù)因精確、敏感的特性逐步應(yīng)用于病原微生物的檢測(cè)。其原理是將已知序列的核苷酸片段加入到被檢測(cè)DNA 樣品中,同源序列的DNA 會(huì)形成雜交雙鏈并釋放出相應(yīng)的信號(hào),通過(guò)對(duì)信號(hào)的檢測(cè)完成食品微生物檢測(cè)[1]。根據(jù)核苷酸成分的不同,可以分為DNA 探針和RNA 探針,一般選用DNA 探針。核酸探針技術(shù)操作方便、快捷,成本較低,在食品微生物檢驗(yàn)中被廣泛運(yùn)用,為增強(qiáng)百姓的食品健康出了一份力。
生物芯片技術(shù)在食品微生物檢驗(yàn)研究領(lǐng)域具有較好的發(fā)展前景。它是一種微量分析技術(shù),綜合運(yùn)用了多種生物技術(shù),并廣泛運(yùn)用于動(dòng)物疫病病原菌檢測(cè)、獸藥殘留程度檢測(cè)、食物致病微生物檢測(cè)等[2]。其優(yōu)點(diǎn)為信息量大、高效率等,可在最短的時(shí)間內(nèi)獲得大量的生物信息。但也因獲得的信息較為繁雜,并不能精準(zhǔn)定位目標(biāo)生物信息。
生物傳感技術(shù)利用待測(cè)分子與特定識(shí)別元件發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),所產(chǎn)生的信息經(jīng)化學(xué)或物理?yè)Q能器轉(zhuǎn)變成可處理、識(shí)別的信號(hào),放大后輸入即可完成定性定量分析[3]。目前該技術(shù)主要運(yùn)用于生物學(xué)信息檢測(cè)和食品衛(wèi)生檢測(cè)。其優(yōu)點(diǎn)有成本低,檢測(cè)速度快,可以重復(fù)利用,操作簡(jiǎn)便,不需要試劑等,目前已被廣泛運(yùn)用。
食品檢測(cè)樣本一般為固液混合體,干擾因素較多。常規(guī)的方法難以實(shí)現(xiàn)致病病原菌的準(zhǔn)確分離,檢驗(yàn)結(jié)果不精確,所需時(shí)間長(zhǎng)。免疫磁性分離技術(shù)是借助免疫磁性微球進(jìn)行分析檢測(cè)的一種技術(shù),細(xì)胞表面的抗原與磁性微球上的單抗相結(jié)合,被吸附并滯留在磁場(chǎng)中,將致病病原菌分離出來(lái)。免疫磁性分離技術(shù)可以有效分離干擾病菌,提取出目標(biāo)病原菌,有效節(jié)約了檢驗(yàn)時(shí)間。與其他微生物檢驗(yàn)研究技術(shù)相比,由于磁性球識(shí)別的特異性,避免了其他干擾因素的影響,能夠快速準(zhǔn)確定位目標(biāo)群體。
高光譜圖像技術(shù)屬于遙感技術(shù)的一種,它能將影像資料與光譜信息進(jìn)行有機(jī)結(jié)合,能在光學(xué)圖像的支持下有效檢驗(yàn)食品的化學(xué)成分、營(yíng)養(yǎng)成分、微生物含量,準(zhǔn)確檢測(cè)食品質(zhì)量與安全,降低或避免微生物對(duì)公眾身體健康產(chǎn)生不利影響,其在食品微生物檢驗(yàn)檢測(cè)中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛[4]。
近年來(lái)由于食品衛(wèi)生安全事件頻發(fā),百姓對(duì)食品衛(wèi)生的關(guān)注度達(dá)到了空前的高度。提高食品衛(wèi)生安全迫在眉睫,食品衛(wèi)生檢測(cè)新技術(shù)的應(yīng)用研究對(duì)于提高民眾幸福感,促進(jìn)食品行業(yè)綠色健康可持續(xù)發(fā)展有著重要意義。