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液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用

2020-12-03 04:07:23朱青欣
食品安全導刊 2020年20期
關(guān)鍵詞:類黃酮液相質(zhì)譜

近年來,由于全球化和新技術(shù)的發(fā)展,農(nóng)業(yè)食品領(lǐng)域需要對從原材料到最終產(chǎn)品的全食品鏈進行更深入的分析。此外,消費者擔心他們攝入的食品質(zhì)量,要求提供更多安全和地域上的保證。這勢必要求食品鏈上所有步驟都能追溯源頭,或者在分子層面上尋找與食品鏈相關(guān)的客觀組成參數(shù)。監(jiān)管機構(gòu)越來越多地要求利用分子表征技術(shù)來評估當前市場上的食品,確定諸如食品的復雜系統(tǒng)中的分子組成需要使用合適的分析工具,來正確識別和定量所有目標化合物[1]。

目前食品分析主要包括以下幾類:(1)營養(yǎng)成分的分析,主要是糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素和微量元素等;(2)有害物質(zhì)的分析,主要是指生物性有害物質(zhì)和化學性有害物質(zhì),主要是指農(nóng)獸藥殘留、重金屬(鉛、汞)和塑化劑等;(3)食品添加劑的分析,主要包括色素、保鮮劑、食用酸、防腐劑和營養(yǎng)強化劑等。由于食品種類繁多,成分復雜,部分微量元素和污染物含量較低,分析檢測定量這些物質(zhì)較為困難,而越來越嚴格的殘留標準對食品分析檢測提出了新的要求,這就需要更為靈敏的分析檢測技術(shù)。

隨著儀器分析的迅速發(fā)展,其在食品分析中的比重不斷增大,成為現(xiàn)代食品檢測中的重要支柱。液相色譜和氣相色譜在化合物的分離方面表現(xiàn)卓越,而質(zhì)譜在對微量物質(zhì)的定量和定性分析上具有高選擇性和高靈敏度,因此,氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)和液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)為食品檢測提供了新的解決思路。由于氣相色譜對分析化合物具有一定要求(分子量低、耐熱、易揮發(fā)),其應(yīng)用范圍受到了一定的限制,而面對越來越多的大分子化合物(蛋白質(zhì)、多肽)和不揮發(fā)化合物的食品分析任務(wù),液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)被廣泛應(yīng)用在食品檢測方面。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

基本原理

測試樣品首先通過液相色譜(LC)進行分離,然后通過與質(zhì)譜聯(lián)用的接口,將待測溶液進行電離、在電離中產(chǎn)生的離子會形成一個母碎片離子,隨后會通過激發(fā)電壓將母碎片離子進行二次電離,通過收集產(chǎn)生到的離子碎片,對待測物質(zhì)進行定性和定量分析。目前常見的離子源有以下幾種:電噴霧離子源(ESI),快原子轟擊源(FAB),大氣壓化學電離源(APCI),大氣壓光電離源(APPI)等。

技術(shù)特點

作為一種新型的現(xiàn)代儀器分析手段,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),主要有以下特點:分析范圍廣,幾乎可以檢測所有的化合物,比較容易解決氣相色譜中分析熱不穩(wěn)定化合物的難題;分離性能強,既是被分析的混合物在色譜中沒有完全分離,也能通過特征離子質(zhì)量色譜圖來進行定性和定量,給出每個組分的結(jié)構(gòu)信息和分子量;檢測限低、具有高靈敏度,可以在微克水平下檢測樣品;分析時間短,單個樣品測試時間一般小于15分鐘,顯著縮短分析時間。

LC-MS在食品檢測分析中的應(yīng)用

食品由種類繁多的分子組成,具有生物學特性和營養(yǎng)值。有些分子是主要成分,例如淀粉或甘油三酸酯;一些為次要或微量成分,例如風味劑或多酚化合物;還有一些分子是不希望在食品上存在的雜質(zhì),例如農(nóng)藥或霉菌毒素。同一種化學物質(zhì)可能即是主要成分又是次要成分,主要取決于所討論的食物類型。例如,甘油三酸酯是油脂的主要成分,牛奶中的次要成分,但是在酒中幾乎不存在。其他化合物始終以次要或痕量成分形式存在(維生素和多酚),但是他們具有重要的營養(yǎng)價值或者是能顯著影響口味。針對不同的化合物,研究者們通過液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進行了大量的研究分析工作。

脂質(zhì)

所有動植物都含有脂質(zhì),這是必不可少的維持生命活動的組件。脂質(zhì)在幾乎所有種類的食物中均提供了大量的營養(yǎng)和豐富的口感。脂質(zhì)以多種不同形式存在,一些脂質(zhì)在結(jié)構(gòu)上為簡單分子(例如脂肪酸),但在其他分子上具有復雜的可變結(jié)構(gòu)。對于脂質(zhì)成分和含量,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是功能最強大的分析工具之一。目前已有大量報道,通過LC-MS聯(lián)用技術(shù)對三酰基甘油、脂肪酸、類胡蘿卜素和各種食物中獲得的磷脂進行分析,研究各類蔬菜和肉制品中脂質(zhì)含量。

碳水化合物

碳水化合物具有多種生理作用,屬于最常見的營養(yǎng)素。一類是植物中的主要結(jié)構(gòu),例如纖維素,是飲食中纖維的重要來源。另外一類是主要的人體的能源來源,例如淀粉和葡萄糖。其他則與蛋白質(zhì)等大分子結(jié)合,具有重要的功能作用。LC-MS聯(lián)用技術(shù)可以分析分子量較大的寡糖和分子共軛物,無需費時地分餾,純化和衍生化即可實現(xiàn)未知碳水化合物的鑒定和分析。

維生素

維生素是人體必需的微量營養(yǎng)成分,具有多種結(jié)構(gòu)特征。許多維生素具有熱不穩(wěn)定和易氧化的特性,因此液相色譜,特別是偶聯(lián)質(zhì)譜的LC-MS是對維生素進行分析的主要技術(shù)。對于維生素的檢測,LC-MS通常采用電噴霧,有時采用APCI電離源。目前已報道過許多通過LC-MS對維生素進行分析和定量的文章。

類黃酮

類黃酮是植物的次級代謝產(chǎn)物,是具有促進人體健康作用的多酚類化合物。它們的結(jié)構(gòu)多樣,目前有超過5000種天然黃酮類化合物。通常認為類黃酮化合物具有抗氧化、抗炎癥和抗癌活性。但是類黃酮通常僅以微量存在于復雜的植物提取物中,通常很難分離。但是類黃酮在電噴霧中的良好靈敏度使得LC-MS成為類黃酮分析的首選方法。為了增強高分辨質(zhì)譜中的靈敏度和獲得更多結(jié)構(gòu)信息,研究人員通常會在類黃酮的LC-MS分析中采用串聯(lián)質(zhì)譜法。

霉菌毒素

食品是由天然化合物組成的復雜混合物。此外,食品中其他物質(zhì)通常來源于食品制備階段的工業(yè)流程、農(nóng)業(yè)化學處理或包裝材料。盡管此類化合物含量很少,但是它們通常對人類健康是較為危險的。這一事實迫使立法機構(gòu)對于食品中有毒物質(zhì)的最大殘留限量進行了嚴格的規(guī)定。為了遵守這些法規(guī),迫切需要高性能的分析技術(shù)來識別和表征目標化合物。由于LC-MS的高選擇性和高靈敏度,使其成為對食品中有毒化合物的最常用分析技術(shù)之一。

霉菌毒素是真菌的有毒次生代謝產(chǎn)物,容易在食品儲存過程中進行繁殖。大多數(shù)情況下,它們存在于谷物和油料種子中。此類毒素含量即使很小也很危險,對于某些霉菌毒素的最大殘留量已低至0.1μg/kg。LC-MS技術(shù)非常適合高通量樣品,將其應(yīng)用在多霉菌毒素分析中,以直接檢測和表征復雜的生物和食品基質(zhì)中的代謝物。霉菌毒素分析可以使用多種質(zhì)譜方法,ESI(正離子和負離子模式),APCI和APPI電離離子源均可使用。當需要定量時,可以使用同位素標記的標準品。

食品中的農(nóng)藥殘留

食品中的農(nóng)藥殘留對于消費者和立法者而言都日益受到關(guān)注。農(nóng)藥的廣泛使用導致必須對蔬菜和各種食品進行農(nóng)藥的痕量分析。當前有數(shù)百種活性組分和數(shù)千種農(nóng)藥配方正在使用,就像真菌毒素一樣,對食品中農(nóng)藥分析需要篩選大量化合物,如果發(fā)現(xiàn)某種農(nóng)藥,則需要對其進行準確定量。因此分析食品中的農(nóng)藥必須要開發(fā)高效的高通量方法。

當前農(nóng)藥的痕量分析中很大一部分都是基于LC-MS。在大多數(shù)情況下會采用串聯(lián)質(zhì)譜進行分析,主要是因為可以簡化分析前的樣品處理,并允許在單一色譜中運行進行多殘留分析。如果需要定量,也可以采用同位素標記的標準液,對樣品進行準確測定和精確分析。

過敏原

食品過敏是食品科學中的一個新興問題?;加心承╊愋褪称愤^敏的患者人數(shù)在穩(wěn)定增加,成為臨床醫(yī)生和食品行業(yè)共同關(guān)注的焦點。過敏原包括牛奶、雞蛋、小麥、大豆、花生、堅果、魚和貝類。這些食品都是全球大多數(shù)人口的基本飲食,也是食品工業(yè)中許多產(chǎn)品的主材料。盡管免疫病理學和生物學上已取得了很多進展,但是食物中許多過敏原尚未能解釋其作用機理。LC-MS聯(lián)用技術(shù)在蛋白質(zhì)分析中的高選擇性和靈敏度可以克服困難,正確識別過敏原。目前LC-MS技術(shù)已經(jīng)成功用于鑒定和定量食品中花生過敏原的含量,達到ppm(百萬分之一)級別。通過分析各種食品基質(zhì)(牛奶、大豆、巧克力、玉米片和大米脆片)中是否存在堅果(杏仁、山核桃、榛子、核桃)來證明所開發(fā)的LC-MS方法的選擇性。

食品添加劑

食品添加劑是指為了改善食品品質(zhì),以及為了防腐、保鮮和加工工藝需要而加入食品中的人工合成或天然物質(zhì)。食品添加劑作為食品基質(zhì)的重要組成成分,一方面不可或缺,另一方面超量使用又會對人體健康帶來危害,因此在食品生產(chǎn)標準中對食品添加劑有嚴格的限量規(guī)定。有研究采用LC-MS分析方法對白酒中添加的甜蜜素進行了定性定量分析,方法不需要對樣品進行前處理,簡化了操作步驟,同時靈敏度高,分析速度快,適宜權(quán)威部門對白酒中甜蜜素的仲裁檢驗,也可以用來分析食品中的痕量甜蜜素。

總結(jié)

綜上所述,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)廣泛應(yīng)用在食品檢測的各項指標中,對樣品的分析具有通用的殘留分析能力。作為一種高效、高靈敏度、高準確度和操作簡便的分析辦法,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)能滿足測試要求日益增長的食品檢測行業(yè),可以預見液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)將在食品分析中受到更多關(guān)注和更廣泛的應(yīng)用。但目前大多數(shù)研究均是對某一種或幾種成分進行檢測分析,對于具有普適性的食品分析方法開發(fā)報道較少,預計此方向今后會受到研究人員更多的關(guān)注。

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