魏曉云，霍子?xùn)|，李 彬

（甘肅省畜牧技術(shù)推廣總站，甘肅 蘭州 730030）

1 目的意義

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高傳染性疾病。其發(fā)病迅速，傳播速度快，傳播距離遠(yuǎn)，且控制難度大，易復(fù)發(fā)，易感動(dòng)物達(dá)70余種；也屬于人畜共患病，一旦出現(xiàn)大面積傳播和流行，不僅會(huì)影響動(dòng)物的健康發(fā)育和食品安全，也會(huì)對(duì)養(yǎng)殖戶帶來(lái)慘重的經(jīng)濟(jì)損失，危及人類健康。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將口蹄疫列為烈性動(dòng)物傳染病，我國(guó)規(guī)定為一類動(dòng)物疫病。為了有效預(yù)防口蹄疫的發(fā)生和傳播，確保甘肅高山美利奴細(xì)毛羊的安全生產(chǎn)，必須進(jìn)行全覆蓋強(qiáng)制免疫。為使甘肅高山美利奴細(xì)毛羊免疫抗體水平能始終保持在有效保護(hù)的狀態(tài)，而且又不影響其安全生產(chǎn)，選擇最佳的疫苗和免疫時(shí)間顯得尤為重要。選用口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗進(jìn)行免疫注射，檢測(cè)甘肅高山美利奴細(xì)毛羊體內(nèi)免疫抗體水平消長(zhǎng)情況，為養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）制定最佳免疫方案提供科學(xué)依據(jù)。

2 試驗(yàn)地點(diǎn)

肅南縣皇城鎮(zhèn)，位于甘青兩省交界的祁連山東段冷龍嶺北麓，肅南裕固族自治縣境內(nèi)，海拔高、寒冷、枯草期長(zhǎng)是本地區(qū)的主要?dú)夂蛱攸c(diǎn)。東靠肅南縣東灘鄉(xiāng)，北連北灘鄉(xiāng)，西接山丹軍馬場(chǎng)，南鄰青海省門源回族自治縣。海拔范圍2 600～4 000 m，屬高原大陸性氣候，平均溫度0.6～3.8℃，年降水量360 mm，氣候寒冷多變，平均枯草期7個(gè)月以上，絕對(duì)無(wú)霜期僅有45～60 d。當(dāng)?shù)匾燥曫B(yǎng)甘肅高山細(xì)毛羊和高山美利奴羊?yàn)橹?，也是甘肅省綿羊繁育技術(shù)推廣站所在地。

表1 口蹄疫O型、亞I二價(jià)苗免疫抗體水平跟蹤監(jiān)測(cè)

3 材料與方法

3.1 材料

試驗(yàn)羊只：從甘肅省綿羊繁育技術(shù)推廣站選擇15只6～7月齡的甘肅高山美利奴細(xì)毛羊。

試驗(yàn)疫苗：中牧集團(tuán)生產(chǎn)的牛羊O型、亞洲1型雙價(jià)滅活疫苗。2～8℃保存，有效期內(nèi)使用。

抗體檢測(cè)儀器：全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)，酶標(biāo)分析儀，智能型電熱恒溫器，臺(tái)式高速離心機(jī)，U型96孔抗原抗體反應(yīng)板、96孔ELISA板等。

檢測(cè)用試劑：O型、亞洲I型口蹄疫抗體檢測(cè)液相阻斷（LB-ELISA）試劑盒購(gòu)自蘭州獸醫(yī)研究所。

3.2 方法

檢測(cè)方法：LB-ELISA。正向間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒、口蹄疫O型液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自蘭州獸醫(yī)研究所。

免疫注射：2017年10月11日對(duì)15只甘肅高山美利奴細(xì)毛羊注射口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗。

采樣時(shí)間：分別在免疫注射后21 d、60 d、120 d、180 d對(duì)15只甘肅高山美利奴細(xì)毛羊采血、分離血清，檢測(cè)免疫抗體。

4 試驗(yàn)結(jié)果

據(jù)表1監(jiān)測(cè)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)免疫21 d后抗體水平逐漸升高，60 d達(dá)到峰值，抗體水平持續(xù)60～120 d，到180 d后開(kāi)始下降，抗體可維持半年。

5 討論

口蹄疫作為A類一號(hào)傳染病，做好強(qiáng)制免疫和有效免疫非常重要。有報(bào)道稱，我國(guó)規(guī)?；驁?chǎng)發(fā)生口蹄疫疫情的風(fēng)險(xiǎn)仍然較高，感染抗體陽(yáng)性率平均超過(guò)9%，這意味著防治口蹄疫疫情依然是當(dāng)前及今后一段時(shí)間內(nèi)的重要工作。按照《中華人民共和國(guó)畜牧法》《國(guó)家口蹄疫防治技術(shù)規(guī)范》《重大動(dòng)物疫情應(yīng)急條例》《國(guó)家口蹄疫防治計(jì)劃（2016—2020年）》等要求，一旦發(fā)現(xiàn)如口蹄疫之類烈性傳染病，要撲殺并銷毀染疫和疑似染疫動(dòng)物及其同群動(dòng)物。甘肅高山美利奴細(xì)毛羊是2015年底經(jīng)國(guó)家畜禽遺傳資源委員會(huì)審定通過(guò)的細(xì)毛羊新品種。主要適應(yīng)于海拔約2 400～4 000 m的生態(tài)區(qū)，具有良好的生態(tài)差異化優(yōu)勢(shì)和抗逆性，綜合品質(zhì)及性能指標(biāo)超過(guò)了同類型澳洲美利奴羊，實(shí)現(xiàn)了澳洲美利奴羊在我國(guó)高海拔、高山寒旱生態(tài)區(qū)的國(guó)產(chǎn)化。甘肅高山美利奴細(xì)毛羊是甘肅有史以來(lái)育成的第一個(gè)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家級(jí)畜禽新品種。高山美利奴羊現(xiàn)已被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部列為國(guó)家主導(dǎo)品種。但由于是新品種，所以數(shù)量較少，而且產(chǎn)地相對(duì)集中，如果發(fā)生口蹄疫之類傳染病，將造成不可挽回的損失，也會(huì)造成極其不良的社會(huì)影響。所以政府部門及養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）一定要高度重視口蹄疫防控工作。

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果分析，甘肅高山美利奴細(xì)毛羊在1次注射口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗后，在6個(gè)月之內(nèi)，免疫抗體效價(jià)保持在一個(gè)相對(duì)均衡且有效的水平上，起到了免疫保護(hù)的目的。抗體效價(jià)≥1∶128時(shí)，保護(hù)率在99%以上；抗體效價(jià)在1∶22～90范圍，群體保護(hù)率一半以上；效價(jià)≤1∶16時(shí)無(wú)保護(hù)作用。為此，建議對(duì)甘肅高山美利奴細(xì)毛羊使用口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗，春季防疫和秋季防疫相結(jié)合，每年3月和10月各1次，全群盡免，可有效抵御當(dāng)?shù)卮嬗型{的口蹄疫病毒，保障甘肅高山美利奴細(xì)毛羊種群安全。