普麗花，楊建發(fā)，金顯棟，董仙蘭，關(guān)少君，董 路，程文杰，伍麗仙，黃必志，張繼才，亐開興*

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院，云南 昆明，650212；3.云南省文山州畜牧站，云南 文山 663099)

云嶺牛是云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院自主培育的肉牛新品種，由婆羅門牛(Brahman)、莫累灰牛(MurrayGrey)和云南黃牛(YunnanYellowcattle)三元雜交選育而來(lái)[1-2]。云嶺牛新品種選育工作始于1983年中-澳技術(shù)合作計(jì)劃“云南牧畜和草場(chǎng)發(fā)展”項(xiàng)目，經(jīng)過一系列的雜交和橫交選育，于2014年12月獲得新品種證書，成為新中國(guó)成立以來(lái)的第四個(gè)肉牛品種，具有早熟、耐濕熱、耐粗飼、抗病性強(qiáng)、出肉率高等優(yōu)良特性，是一個(gè)適合在熱帶亞熱帶地區(qū)養(yǎng)殖的肉牛品種[3]，小哨核心育種場(chǎng)存欄基礎(chǔ)母牛1 200余頭，每年可供種牛300多頭。2019年，肉牛產(chǎn)業(yè)被列入云南省八大產(chǎn)業(yè)中高原特色現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)，為推動(dòng)產(chǎn)業(yè)優(yōu)化升級(jí)和產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整注入了新活力，云嶺牛產(chǎn)業(yè)化為邊疆脫貧攻堅(jiān)貢獻(xiàn)了力量，給養(yǎng)殖戶帶來(lái)了較高的經(jīng)濟(jì)效益[4-6]。

云南省擁有得天獨(dú)厚的氣候和豐富的水草資源，成為我國(guó)肉牛養(yǎng)殖的一大重點(diǎn)產(chǎn)區(qū)。隨著養(yǎng)殖規(guī)模的增大，各種疫病在一定程度上制約著肉牛的養(yǎng)殖效益，其中，寄生蟲病的防控問題依舊嚴(yán)峻，造成生產(chǎn)性能下降、肉質(zhì)差、成活率低等影響。目前，關(guān)于云南黃牛[7]、奶牛[8]、中甸牦牛[9]、西門塔爾牛[10]等腸道寄生蟲的感染情況都有報(bào)道和發(fā)現(xiàn)，但是關(guān)于云嶺牛腸道寄生蟲的感染情況尚未報(bào)道。因此，本調(diào)查就云嶺牛核心育種場(chǎng)和擴(kuò)繁場(chǎng)采集新鮮糞便樣品來(lái)進(jìn)行寄生蟲調(diào)查，為制定規(guī)范的云嶺牛寄生蟲病防控程序及寄生蟲病防治提供科學(xué)依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 材料

通過直腸采取和隨機(jī)撿樣，從云嶺牛核心育種場(chǎng)(小哨示范牧場(chǎng))和楚雄錦達(dá)農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司(以下簡(jiǎn)稱楚雄錦達(dá)牧業(yè))擴(kuò)繁場(chǎng)共采集382份云嶺牛糞便樣品，其中小哨示范牧場(chǎng)采集192份，楚雄錦達(dá)牧業(yè)采集190份。分別記錄好采樣信息，用保鮮袋分裝，逐一編號(hào)登記，4℃冷藏保存。

1.2 方法

1.2.1 飽和食鹽水配置 稱取400 g氯化鈉，加入1 000 mL沸騰的開水中，然后加入食鹽，用玻璃棒進(jìn)行攪拌，直至食鹽不再溶解，將其放置幾分鐘冷卻，觀察是否有結(jié)晶生成，這種方法置得的溶液即為飽和食鹽水。

1.2.2 飽和食鹽水漂浮法 取10 g左右糞便放入一個(gè)燒杯中，先加入少量飽和食鹽水將糞便攪拌調(diào)勻，然后向燒杯中再加入一定量的飽和食鹽水，并用玻璃棒攪拌均勻，用60目的銅絲篩將糞樣過濾到青霉素小瓶?jī)?nèi)，在瓶口輕輕蓋一個(gè)載玻片，濾液靜置約15 min，然后將載玻片進(jìn)行鏡檢。

1.2.3 自然沉淀法 取20 g糞便與少量清水于100 mL燒杯中進(jìn)行攪拌混勻，用60目銅篩將其濾于廣口瓶中，倒入清水約廣口瓶4/5處，靜置30 min，然后過濾廣口瓶中3/5上清液，加水于廣口瓶4/5處，靜置20 min。用此種方法連續(xù)重復(fù)3次，用吸管將留下的沉淀物吸出，用低倍鏡進(jìn)行鏡檢。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理與分析 將所得數(shù)據(jù)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件計(jì)算卡方值，分析云嶺牛腸道寄生蟲感染率與地理位置、養(yǎng)殖方式、性別、年齡等因素之間的關(guān)聯(lián)程度。

2 結(jié)果

2.1 寄生蟲蟲卵形態(tài)觀察

顯微鏡下的蟲卵見圖1～3，線蟲卵城橢圓形，褐色，卵殼厚，具有縱向彎曲條紋；吸蟲卵呈橢圓形，卵殼薄，大多數(shù)無(wú)色透明，也有的為淡黃色。

圖1 線蟲卵(10×10)

圖2 球蟲卵囊(10×10)

圖3 吸蟲卵(10×10)

2.2 腸道寄生蟲蟲卵鏡檢結(jié)果

2.2.1 云嶺牛腸道寄生蟲感染情況 通過飽和食鹽水漂浮法和自然沉淀法從382份云嶺牛牛糞樣品中共檢測(cè)出89份存在腸道寄生蟲感染，感染率為23.30%，其中小哨示范牧場(chǎng)寄生蟲的感染率31.25%，楚雄錦達(dá)牧業(yè)寄生蟲感染率為15.26%，不同牛場(chǎng)的云嶺牛腸道寄生蟲感染有極顯著差異(P<0.01)。小哨示范牧場(chǎng)(包括自由放牧牛群)的線蟲感染率顯著高于楚雄錦達(dá)牧業(yè)(P<0.01)，而球蟲、吸蟲及混合感染率的差異不明顯(P>0.05)，具體情況詳見表1。

2.2.2 不同養(yǎng)殖方式對(duì)云嶺牛寄生蟲感染的影響 圈養(yǎng)云嶺牛寄生蟲感染率為19.59%，放牧云嶺牛寄生蟲感染率為36.05%，不同養(yǎng)殖方式對(duì)云嶺牛腸道寄生蟲感染影響極大，放牧牛群感染率更高(P<0.01)，具體情況詳見表2。

表2 不同養(yǎng)殖方式的云嶺牛寄生蟲感染情況

2.2.3 不同年齡對(duì)云嶺牛寄生蟲感染的影響 成年牛和犢牛腸道寄生蟲感染率分別為25.00%和17.78%，成年牛的感染率高，但不同年齡的云嶺牛腸道寄生蟲感染率無(wú)顯著差異(P>0.05)，具體情況詳見表3。

表3 不同年齡的云嶺牛寄生蟲感染情況

2.2.4 不同性別對(duì)云嶺牛寄生蟲感染的影響 公、母牛腸道寄生蟲感染率分別為29.85%和22.43%，其中有52份樣品因隨機(jī)撿樣而性別不詳，感染率為19.23%，不同性別間的云嶺牛腸道寄生蟲感染情況無(wú)顯著差異(P>0.05)，具體情況詳見表4。

表4 不同性別的云嶺牛寄生蟲感染情況

3 討論

3.1 云嶺牛寄生蟲感染情況分析

寄生蟲吸取動(dòng)物機(jī)體營(yíng)養(yǎng)，破壞血液或組織器官，導(dǎo)致動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育緩慢，生產(chǎn)肉、奶性能下降，品質(zhì)變差，還可攜帶或傳播病原體，從而引起慢性、消耗性生長(zhǎng)發(fā)育不良，感染嚴(yán)重的導(dǎo)致動(dòng)物死亡。然而，寄生蟲生命力旺盛，生活發(fā)育史復(fù)雜，中間環(huán)節(jié)多，寄生蟲感染面較大，控制或凈化寄生蟲困難。據(jù)報(bào)道，牦牛腸道寄生蟲感染率最為嚴(yán)重，有些地方高居100%[11]，而其他牛群由于經(jīng)受過驅(qū)蟲而感染率高低不一。趙霞等[12]發(fā)現(xiàn)安徽省奶牛、黃牛、水牛腸道寄生蟲感染率分別為13.50%、14.55%、44.34%；齊偉偉等[13]發(fā)現(xiàn)信陽(yáng)水牛腸道寄生蟲感染率也是高居84.60%，其中球蟲為優(yōu)勢(shì)感染蟲種；王海燕等[14]發(fā)現(xiàn)河南開封地區(qū)奶牛腸道寄生蟲感染為41.60%；劉偉等[15]發(fā)現(xiàn)湖南肉牛寄生蟲感染率為49.25%；胡蘇輝等[16]發(fā)現(xiàn)河北及天津部分地區(qū)奶牛腸道寄生蟲率分別為59.78%、66.12%；陳少博等[17]發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古鑲黃旗地區(qū)牛寄生蟲感染率為44.92%；曹建科等[18]發(fā)現(xiàn)甘肅地區(qū)奶牛腸道寄生蟲感染率為37.40%；劉萬(wàn)洪等[7]發(fā)現(xiàn)云南會(huì)澤縣黃牛線蟲、吸蟲感染率為72.90%、47.10%，混合感染率為44.80%；舒凡帆等[19]發(fā)現(xiàn)云南洱源奶牛腸道寄生蟲總感染率為65.06%，其中線蟲、吸蟲和混合感染率分別為28.92%、30.12%、28.92%；楊曉春[20]研究發(fā)現(xiàn)中甸牦牛線蟲卵檢出率57.00%，吸蟲卵檢出率為81.00%；Ananta等[21]發(fā)現(xiàn)印度尼西亞牛腸道寄生蟲總感染率為38.80%；Marskole等[22]發(fā)現(xiàn)印度賈巴爾普爾牛、水牛腸道寄生蟲總感染率為73.33%。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，云嶺牛腸道寄生蟲感染率為23.30%，其中線蟲、球蟲、吸蟲感染率分別為17.28%、7.07%、0.26%，混合感染率為1.31%，調(diào)查結(jié)果高于趙霞等[12]報(bào)道的安徽省奶牛和黃牛的腸道寄生蟲感染率，但是低于其他地區(qū)報(bào)道的牛腸道寄生蟲感染率，且本次調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同養(yǎng)殖地區(qū)的云嶺牛腸道寄生蟲感染情況有極顯著差異，即核心育種場(chǎng)(31.25%)的寄生蟲感染率高于擴(kuò)繁場(chǎng)(15.26%)。此外，云嶺牛作為三元雜交品種，具有抗病性強(qiáng)等優(yōu)良特性，對(duì)寄生蟲有一定的抵抗力，所以相較于其他地區(qū)報(bào)道的其他品種的牛腸道寄生蟲感染率相對(duì)較低，而肉牛腸道寄生蟲感染情況可能與地理環(huán)境、氣候等因素有關(guān)。

3.2 不同養(yǎng)殖方式對(duì)云嶺牛腸道寄生蟲感染情況分析

不同養(yǎng)殖方式的云嶺牛腸道寄生蟲感染有極顯著差異，自由放牧云嶺牛寄生蟲感染率(36.05%)較圈養(yǎng)云嶺牛寄生蟲感染率高(19.59%)，與張寬寬等[23]報(bào)道新疆部分地區(qū)不同養(yǎng)殖方式的褐牛腸道寄生蟲感染存在顯著差異一致。這明顯與長(zhǎng)期放牧飼養(yǎng)，會(huì)導(dǎo)致環(huán)境中散播大量寄生蟲蟲卵或者卵囊容易造成重復(fù)感染和交叉感染。本次調(diào)查研究中，圈養(yǎng)和放牧云嶺牛均已進(jìn)行預(yù)防性定期驅(qū)蟲，但是放牧牛群接觸放牧草地時(shí)間廣泛，寄生蟲感染幾率高，故而放牧牛群較圈養(yǎng)的寄生蟲感染率高，應(yīng)制定更為合理、周密的輪牧制度和驅(qū)蟲程序。

3.3 不同年齡云嶺牛腸道寄生蟲感染情況分析

成年云嶺牛腸道寄生蟲感染率(25%)較犢牛腸道寄生蟲感染率(17.78%)高，但不同年齡組間牛腸道寄生蟲感染無(wú)顯著差異，這與張寬寬等[23]報(bào)道的新疆部分地區(qū)不同年齡組間褐牛腸道寄生蟲感染率和Marskole等[22]報(bào)道的印度賈巴爾普爾不同年齡組間牛腸道寄生蟲感染差異不顯著一致。此外，Telila等[24]也曾報(bào)道胃腸道寄生蟲患病率隨年齡的增加而增加，Regassa等[25]認(rèn)為年齡小的動(dòng)物比成年動(dòng)物更容易受到寄生蟲感染。因此，不同年齡組間寄生蟲感染情況可能與動(dòng)物免疫狀況、飼養(yǎng)條件、養(yǎng)殖方式等因素有關(guān)。

3.4 不同性別云嶺牛腸道寄生蟲感染情況分析

公牛腸道寄生蟲感染率(29.85%)較母牛感染率(22.43%)高，不同性別間云嶺牛腸道寄生蟲感染情況無(wú)顯著差異，這與Marskole等[22]報(bào)道不同性別組間牛腸道寄生蟲感染差異不顯著一致。這表明，牛胃腸道寄生蟲感染并不能取決于性別，但是本調(diào)查研究中公牛寄生蟲感染率較母牛高的原因，一方面可能是受部分樣品性別不詳影響，另一方面可能與對(duì)公牛管理忽視有關(guān)。

3.5 建議防控措施

加強(qiáng)飼養(yǎng)管理水平，補(bǔ)飼全價(jià)飼料，對(duì)圈舍周圍進(jìn)行消毒，及時(shí)清理糞便、污物，保持環(huán)境清潔；消除傳染源，殺滅中間宿主，切斷傳播途徑；加強(qiáng)對(duì)牛腸道寄生蟲感染情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)，及時(shí)掌握寄生蟲感染狀況，制定合理的防治措施；進(jìn)行藥物防治，對(duì)線蟲可用伊維菌素、左旋咪唑等藥物，對(duì)球蟲可用地克珠利、磺胺類藥物、莫能菌素等藥物，對(duì)吸蟲可用吡喹酮、阿苯噠唑等藥物。