郭一丹 ,李奎,蔚江濤,3,白俊青,張鵬,3,牛偉,劉明澤,寇莉萍*
(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,陜西楊凌 712100;2.中陜核核盛科技有限公司,陜西西安 710100;3.楊凌核盛輻照技術(shù)有限公司,陜西楊凌 712100)
新鮮果蔬可以為人體提供維生素、礦物質(zhì)和膳食纖維等日常所需的營養(yǎng)物質(zhì),但其消費(fèi)受到季節(jié)和區(qū)域的限制。果蔬采后仍具有完整的細(xì)胞組織,可以進(jìn)行正常的植物生理活動,再加上果蔬組織柔嫩、含水量高,易受微生物侵染而腐爛變質(zhì),最終導(dǎo)致其失去營養(yǎng)價(jià)值和商品價(jià)值[1]。因此有必要在果蔬采后的運(yùn)輸和貯藏環(huán)節(jié)采取一定的保護(hù)措施,延長其貯存期,創(chuàng)造更大的經(jīng)濟(jì)和社會效益。
果蔬采后保鮮主要是對果蔬進(jìn)行某種處理或是調(diào)控其貯藏環(huán)境的溫度、濕度以及氣體成分、壓力等,以抑制微生物的生長和延緩果蔬的衰老[2]。傳統(tǒng)的方法有機(jī)械庫貯存,常見的有低溫冷庫保鮮、氣調(diào)庫保鮮等,氣調(diào)庫較普通冷庫的保鮮效果更好,但運(yùn)營管理成本較高,適用于附加值較高的果蔬。使用保鮮劑處理也是一種普遍采用的手段,常用保鮮劑一般有兩類,一類是具有殺菌作用的化學(xué)防腐劑,但可能會有化學(xué)殘留,且長期使用會使病原微生物產(chǎn)生抗病性;另一類是對果蔬生理代謝活動產(chǎn)生影響的物質(zhì),如1-甲基環(huán)丙烯(1-MCP),使用時(shí)要控制濃度,否則1-MCP 會與果蔬乙烯受體發(fā)生不可逆結(jié)合,限制果蔬的后熟[3]??梢?,果蔬貯藏發(fā)展的趨勢是開發(fā)一種更安全、高效且便捷的保鮮新技術(shù)。
電子束輻照加工是一種新型保鮮加工技術(shù),發(fā)展?jié)摿Υ?,產(chǎn)值增長率高,投資回報(bào)期短,具有廣闊的應(yīng)用前景。電子束輻照是指利用加速器的電磁場作用產(chǎn)生具有較高能量的電子束流對食品進(jìn)行加工。為了保證食品的安全,電子加速器的能量多為5 MeV,個(gè)別為10 MeV。由于電子束輻照的殺蟲抑菌效果,我國已將電子束輻照用作一種有效的檢疫手段,低劑量就可以殺滅新鮮果蔬中的蟲卵,保障食品安全[4];使用電子束還可以抑制馬鈴薯、大蒜、洋蔥、生姜以及部分熱帶果蔬如椰青等的發(fā)芽,延長其貨架期[5]。近年來,加速器裝置的日益成熟為電子束輻照技術(shù)的應(yīng)用推廣創(chuàng)造了有利條件,但有關(guān)輻照對果蔬產(chǎn)生的影響及其影響機(jī)制還有待深入研究,因而有必要對電子束輻照的原理及輻照后果蔬各方面品質(zhì)變化進(jìn)行系統(tǒng)的概述,為電子束輻照在果蔬保鮮領(lǐng)域的應(yīng)用實(shí)踐提供理論基礎(chǔ),便于后續(xù)研究工作的開展。
輻照技術(shù)其實(shí)是一種能量傳遞的過程,根據(jù)對加工對象作用效果的不同,可劃分為非電離輻照和電離輻照。非電離輻照主要利用射線(包括射頻、微波、紅外光、可見光等)產(chǎn)生的熱效應(yīng);電離輻照主要利用射線(包括紫外線、X 射線射線、粒子射線等)產(chǎn)生的電離效應(yīng)[6]。食品輻照常用的射線是放射性元素60Co 產(chǎn)生的射線或加速器產(chǎn)生的電子束,高能射線可直接作用于物質(zhì),使其形成離子、激發(fā)態(tài)或分子碎片;或間接作用于水和一些小分子物質(zhì),釋放出·H、·OH 等自由基,再與大分子物質(zhì)相互作用發(fā)生一系列的化學(xué)反應(yīng),最終導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)DNA、RNA 的破碎、錯(cuò)位或缺失,以及蛋白質(zhì)、脂類等高分子物質(zhì)的斷裂、交聯(lián)或聚合,使機(jī)體正常的生理活動受阻,從而殺滅食品中的寄生蟲和微生物,防止食源性疾病的發(fā)生,同時(shí)可以延長食品貨架期[7]。輻照還可以改善食品品質(zhì),使其獲得更好的加工特性,有研究報(bào)道經(jīng)電子束輻照后蓮子的營養(yǎng)價(jià)值得到了提高,藕粉的油溶性增加、蛋白質(zhì)發(fā)泡性能增強(qiáng)[8];輻照后玉米淀粉的黏度降低,原因是長鏈淀粉的支鏈被破壞,分子聚合度下降[9]。輻照技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、誘變育種、植物檢疫、有害物質(zhì)降解和降低食品致敏性等多個(gè)方面[10]。
對食品貯藏保鮮來說,輻照劑量是指被輻射物質(zhì)所吸收射線的能量,國際單位為戈瑞(Gy),國家基準(zhǔn)采用Frickle 劑量計(jì)(硫酸亞鐵劑量計(jì))測定。輻照處理是一種物理冷殺菌方式,不會造成輻照對象溫度的明顯升高,研究發(fā)現(xiàn)1 kg 葡萄接受10 kGy 劑量輻照1 h,溫度僅升高2.4 益,因而可以最大限度地保持食品原有的風(fēng)味和品質(zhì),適用于熱敏性食品的加工。高能射線具有較強(qiáng)穿透力,可以直接對已經(jīng)包裝貼簽或者堆碼好的物料進(jìn)行加工,深入到食品內(nèi)部,殺菌徹底,且不會造成二次污染[11]。經(jīng)輻照處理后的食品無化學(xué)殘留,在一定的劑量范圍內(nèi),不會產(chǎn)生感生放射性,因而具有較高的安全性[12]。輻照設(shè)備可以實(shí)現(xiàn)連續(xù)化、大規(guī)模加工,因而可以節(jié)約能耗、降低保鮮成本。
與以60Co 為輻射源的射線輻照相比,電子束輻照的優(yōu)點(diǎn)在于其安全防護(hù)更為便捷,可以通過開關(guān)瞬時(shí)控制電子束的產(chǎn)生和消失,而射線輻照則需設(shè)計(jì)很厚的墻體來防止射線泄漏,處理完成后需將鈷源降入深水井中保存以終止輻照,且60Co 的半衰期為5 年,需定期進(jìn)行更換,且還會面臨處理放射性廢料的問題;電子束為二維平面輻照,劑量場分布均勻,劑量率高,而60Co 發(fā)射的射線呈球狀分布,射線的利用率較低;電子束輻照的自動化程度更高,輻照處理很快,整體耗時(shí)僅幾分鐘,60Co射線的處理時(shí)間則與輻照劑量呈正比,劑量越高耗時(shí)越長,甚至可能需要數(shù)小時(shí);加速器裝置的占地面積小,廠房的基礎(chǔ)建設(shè)費(fèi)用較低。但電子束輻照也有一些不足之處,一是穿透能力不如射線,適用于形狀規(guī)則、厚度小的產(chǎn)品,處理時(shí)需根據(jù)電子束的穿透距離以及物料的特點(diǎn)和想要達(dá)到的目的對物料輻照方式進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整;二是加速器的設(shè)備較為復(fù)雜,與射線輻照相比,其操作、維修保養(yǎng)的難度也較高[13]。
控制微生物的生長繁殖對延長果蔬貨架期具有重要意義。大量研究表明,電子束輻照可以有效殺滅食品中的微生物或抑制其生長,且輻照劑量越大,對微生物的控制效果越好;但當(dāng)輻照劑量大于某個(gè)值時(shí),效果變化不明顯,甚至?xí)?dǎo)致微生物數(shù)量增加,可能是由于輻照產(chǎn)生的大量自由基對果蔬細(xì)胞造成傷害,為微生物的入侵創(chuàng)造了有利條件。戚蓉迪等[14]用不同劑量電子束輻照處理進(jìn)口智利甜櫻桃,貯藏一段時(shí)間后調(diào)查發(fā)現(xiàn)輻照組果實(shí)的霉變率均低于未輻照果實(shí),且果實(shí)的霉變率與輻照劑量成反比。雷慶等[15]研究了電子束輻照對草莓微生物數(shù)量的影響,結(jié)果顯示2.0 kGy 的輻照使細(xì)菌總數(shù)降低了2個(gè)數(shù)量級,霉菌數(shù)降低了1 個(gè)數(shù)量級。3.0 kGy 與2.0 kGy相比,細(xì)菌與霉菌數(shù)量進(jìn)一步降低,但在數(shù)量級上無差別。
輻照處理的效果還會受到樣品初始微生物狀況的影響,白羽[6]使用射線來處理初始菌落數(shù)不同的五種草藥,數(shù)據(jù)表明初始菌落數(shù)越多,為使微生物數(shù)量降到國家標(biāo)準(zhǔn)以下而所使用的輻照劑量也越大。值是指微生物數(shù)量下降到初始染菌數(shù)目的10%時(shí)所需的劑量,可以據(jù)此來確定殺滅目標(biāo)微生物所需的最低有效劑量[16]。不同種類的微生物對射線的敏感性不同,陳召亮等[17]用電子束輻照處理西洋芹后,立即測定了樣品中細(xì)菌、霉菌、酵母菌及大腸桿菌的數(shù)量,可以看出輻照對酵母菌的殺滅效果不如對細(xì)菌和霉菌的。電子束輻照對霉菌控制效果更好的原因可能是其抑制了霉菌分生孢子的萌發(fā),降低了細(xì)胞壁降解酶的活性及菌絲的致病力[18]。此外,輻照工藝參數(shù)的不同也會導(dǎo)致輻照效果的不同,陳曉平等[19]以輻照劑量、輻照時(shí)間和物料厚度為變量,通過正交試驗(yàn)確定了對大米中主要微生物產(chǎn)生明顯作用效果的最佳輻照條件組合為4.0 kGy 輻照6 s,物料厚度為10.5 cm,此條件下對微生物的殺滅率可達(dá)99%以上。
輻照并沒有完全殺滅果蔬中的微生物,隨著貯藏時(shí)間的推移,一些經(jīng)過輻照后受到損傷或活性被暫時(shí)抑制的微生物可能會慢慢地自我修復(fù),數(shù)量又會增加,因此輻照后的食品也應(yīng)放置于合適的環(huán)境條件下儲存。
2.2.1 對呼吸作用的影響
果蔬貯藏期間應(yīng)當(dāng)維持較低的呼吸強(qiáng)度,以降低有機(jī)物的消耗,減少水分損失。適當(dāng)劑量的輻照處理不會改變躍變型和非躍變型果實(shí)的呼吸特點(diǎn),可能會對呼吸高峰出現(xiàn)的時(shí)間和強(qiáng)度產(chǎn)生影響。楊俊麗等[20]使用四個(gè)劑量的電子束輻照處理草莓,研究了低溫條件下輻照對草莓貯藏品質(zhì)的影響,發(fā)現(xiàn)輻照結(jié)合低溫貯藏能夠有效降低草莓的呼吸強(qiáng)度,抑制作用隨輻照劑量的增加而加強(qiáng),但過高劑量會使草莓的呼吸系統(tǒng)紊亂,造成不可逆的損傷。
2.2.2 對果蔬抗氧化作用的影響
植物體內(nèi)過量的自由基會引發(fā)脂質(zhì)過氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng),產(chǎn)生有害代謝物質(zhì)如丙二醛(MDA)等,進(jìn)一步破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu),使膜透性增加,造成營養(yǎng)物質(zhì)流失,不利于果蔬的貯藏保鮮。果蔬中含有的具有抗氧化活性的物質(zhì)如VC、多酚和一些保護(hù)酶類等,可以捕獲多余的自由基,從而提高果蔬的抗逆性。貯藏期間,果蔬的VC 含量逐漸降低,研究發(fā)現(xiàn)0.5~1.5 kGy 的電子束輻照可以延緩藍(lán)莓采后VC 的消耗和降解[21],0.5、1.0 kGy 輻照則有利于花椰菜VC 含量的保持,但VC 對高劑量電子束輻照的耐受性較差[22]。電子束輻照對甜櫻桃的總酚含量也具有積極的效應(yīng)[23],周任佳等[24]用電子束輻照鮮切哈密瓜,結(jié)果發(fā)現(xiàn)輻照有利于總酚保存,原因可能是在貯藏期間哈密瓜苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性呈先上升后下降的趨勢,與對照相比,輻照處理延遲了PAL 活性高峰的到來,并使PAL 活性維持在較高的水平,PAL 是苯丙烷代謝途徑的關(guān)鍵酶,被認(rèn)為與酚類物質(zhì)的合成有關(guān)。
超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)能夠消耗果蔬組織中的活性氧,對細(xì)胞有一定的保護(hù)作用。對草莓的輻照保鮮研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)電子束照射后在低溫貯藏的草莓,后期可以延緩SOD 活性的下降,有效抑制超氧陰離子自由基的生成速率,進(jìn)而維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性[25]。對電子束輻照巨峰葡萄的研究發(fā)現(xiàn),電子束輻照產(chǎn)生的游離基可以誘導(dǎo)果蔬自身酶防御系統(tǒng)的啟動,貯藏初期SOD、POD 和CAT 活性上升幅度高于對照,以0.7 kGy 處理的效果最好,貯藏期間三種酶活性始終保持在較高水平。高劑量輻照導(dǎo)致果蔬品質(zhì)下降的原因可能是射線產(chǎn)生的大量自由基超出了其應(yīng)激機(jī)制的負(fù)荷范圍,破壞了酶蛋白的功能結(jié)構(gòu),對細(xì)胞造成不可逆的損傷[26]。
2.2.3 對其他生理代謝活動的影響
輻照還能實(shí)現(xiàn)對一些農(nóng)產(chǎn)品的抑芽保鮮,效果明顯,操作方便,可以進(jìn)行大批量處理[27]。以大蒜為例,輻照大蒜應(yīng)在休眠期進(jìn)行,其形態(tài)指標(biāo)為幼芽長度與蒜瓣長度的比值小于或者等于0.25,大蒜收獲后2 個(gè)月內(nèi)抑制內(nèi)芽生長的輻照最低有效劑量為50 Gy,2 個(gè)月后輻照最低有效劑量為80 Gy,大蒜輻照抑制發(fā)芽的最高耐受劑量為200 Gy(GB/T 18527.2—2001)。
2.3.1 對果蔬色澤的影響
果蔬采后色澤的變化可以作為判斷其貯藏品質(zhì)的一個(gè)表觀指標(biāo),會直接影響消費(fèi)者對果蔬品質(zhì)的評定。果蔬內(nèi)部色素物質(zhì)的合成、聚合及降解等會使色澤產(chǎn)生相應(yīng)的變化。花青素是一種水溶性天然色素,廣泛存在于顏色鮮艷的果蔬中。對櫻桃[14]、藍(lán)莓[21]、葡萄[28]等深色果實(shí)的研究發(fā)現(xiàn),輻照處理對花青素具有一定的降解作用,且劑量越高,降解作用越強(qiáng),但在一定劑量范圍內(nèi)電子束對花青素含量的影響較小,貯藏期間與對照組差異不明顯。對蓮霧果皮花青素組分的色譜分析結(jié)果表明,輻照不會改變花青素的組分構(gòu)成,但會影響各組分的含量[29]。葉綠素也是果蔬中一類重要的色素,與類胡蘿卜素等其他色素共同決定果蔬的色澤,王秋芳等[26]研究發(fā)現(xiàn)0.7 kGy電子束處理能使葡萄果梗的葉綠素含量保持在較高水平;陳宇[29]用電子束輻照對獼猴桃進(jìn)行保鮮處理,認(rèn)為0.8 kGy 以下劑量能夠抑制葉綠素的降解,使獼猴桃果肉色澤保持較好。
此外,果蔬中的多酚氧化酶(PPO)會催化酚類物質(zhì)氧化生成黑色聚合物,導(dǎo)致果蔬外觀的褐變以及營養(yǎng)品質(zhì)的下降。酶與底物在果蔬內(nèi)部呈區(qū)域性分布,當(dāng)這種結(jié)構(gòu)遭到破壞時(shí),二者直接接觸會促使酶促褐變的發(fā)生。尤其是鮮切果蔬在加工過程中對組織造成的機(jī)械損傷極易引發(fā)褐變,電子束輻照鮮切果蔬的研究發(fā)現(xiàn),輻照可以抑制PPO 的活性,但劑量過高會加劇果蔬的褐變,可能是因?yàn)楦邉┝侩娮邮茐牧朔宇惡兔钢g的膜結(jié)構(gòu)所致[24]。
2.3.2 對果蔬硬度的影響
硬度是衡量果蔬貯藏品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo),隨著果實(shí)的成熟與衰老,植物細(xì)胞壁間的果膠和纖維素等結(jié)構(gòu)物質(zhì),在果膠酶和纖維素酶的催化下發(fā)生降解,使果蔬組織的硬度下降,耐貯性下降[30-31]。研究發(fā)現(xiàn)輻照會對果蔬硬度產(chǎn)生一定影響,櫻桃經(jīng)輻照后立即檢測,結(jié)果顯示輻照導(dǎo)致櫻桃硬度下降,下降幅度與處理劑量成正比[14];草莓對電子束輻照具有較強(qiáng)的耐受性,2.0、3.5 kGy 可以使果實(shí)纖維素酶的活性高峰延遲,硬度保持較好,但5.0 kGy的電子束輻照使草莓的硬度大幅下降,說明高劑量電子束照射可能會直接分解胞間物質(zhì)[20]。
促進(jìn)果蔬軟化的酶不僅來自植物自身,微生物侵染時(shí)也會分泌有關(guān)酶類。經(jīng)電子束輻照后,草莓灰霉病菌分泌的果膠酶和纖維素酶的活性得到了有效抑制,降低了菌絲對草莓果實(shí)的穿透力。進(jìn)一步的研究結(jié)果顯示,將經(jīng)2.0 kGy 輻照處理的灰霉病菌所分泌的酶液,接種于健康草莓后,草莓果實(shí)的硬度下降率和病情指數(shù)均顯著低于對照[32]。
2.3.3 對果蔬糖、酸、蛋白質(zhì)等風(fēng)味物質(zhì)的影響
糖、酸等風(fēng)味物質(zhì)含量是確定果實(shí)最佳食用階段的指標(biāo),適宜劑量的輻照可以有效延緩貯藏后期果蔬可溶性固形物和可滴定酸含量的下降[33]。輻照處理后的板栗與對照相比還原糖含量略有增加,粗蛋白含量則無明顯變化[34]。高劑量的高能電子束不利于還原糖的保存,可能是電子束對其氧化作用以及呼吸作用的增強(qiáng)加快了還原糖的損耗[35]。
果蔬貯藏保鮮要綜合考慮果蔬特性、保鮮效果、安全性、技術(shù)成本以及可行性等各方面因素,選擇最經(jīng)濟(jì)有效的方案。電子束輻照技術(shù)的推廣為果蔬產(chǎn)品的貯藏加工提供了一個(gè)新思路,在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用時(shí)需要考慮以下幾方面的問題。
上述研究表明,在一定的劑量范圍內(nèi),電子束輻照處理可以有效控制采后果蔬的微生物數(shù)量,延緩或降低果蔬營養(yǎng)物質(zhì)損耗,延長其貯藏期限。然而劑量太低保鮮效果不明顯,劑量過高可能會對果蔬品質(zhì)造成一定的損傷,使果蔬組織抗性下降,不利于貯存。果蔬所能承受的輻照劑量的極限值并不固定,會隨著果蔬品種、成熟度和采摘情況等諸多條件的變化而變化,對于鮮切果蔬而言,耐受劑量還與切分的形狀和大小有關(guān),因此對具體的果蔬材料需要進(jìn)行具體的試驗(yàn)探究,以確定合適的劑量范圍。通過對貯藏期間各指標(biāo)變化趨勢的分析,可以綜合比較評估不同劑量的電子束輻照對果蔬貯藏效果的影響。經(jīng)適當(dāng)劑量電子束輻照后的果蔬在貯藏前期,某些品質(zhì)指標(biāo)與未處理果蔬相比可能會略有下降,但仍在消費(fèi)者的可接受范圍內(nèi),且隨著貯藏時(shí)間的延長,果蔬的成熟、衰老以及微生物的侵染等會加劇果蔬品質(zhì)的劣變,而輻照可以延緩果蔬衰老、抑制微生物繁殖,因而在貯藏后期,輻照對果蔬品質(zhì)的干擾變?nèi)酢?/p>
果品蔬菜的貯藏保鮮是一個(gè)系統(tǒng)工程,所涉及的各個(gè)環(huán)節(jié)相互聯(lián)系、相互作用,共同決定了果蔬呈現(xiàn)在終端消費(fèi)者面前時(shí)的品質(zhì)狀態(tài)。為了保障和促進(jìn)輻照食品的市場流通,我國發(fā)布了一系列關(guān)于輻照食品加工、保鮮、鑒定的衛(wèi)生規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn),且仍在不斷更新和完善。制訂標(biāo)準(zhǔn)化的輻照果蔬技術(shù)操作規(guī)程能夠使生產(chǎn)加工高效有序地運(yùn)作,有利于該技術(shù)的進(jìn)一步推廣,同時(shí)也是施行食品質(zhì)量安全監(jiān)督管理的必然要求。農(nóng)產(chǎn)品輻照加工的技術(shù)規(guī)程應(yīng)當(dāng)涵蓋原料的采收及預(yù)處理,采后果蔬的包裝方式,輻照時(shí)物料的排列方式,輻照劑量、時(shí)間和溫度等參數(shù)的選擇,輻照產(chǎn)品的標(biāo)簽管理,貯藏環(huán)境條件的設(shè)置以及冷鏈物流等一系列具體問題,這些都需要不斷改進(jìn)和完善。
僅依靠單一的輻照處理對果蔬的保鮮效果是有限的,可以采取低劑量輻照與其他技術(shù)如低溫、臭氧和涂膜等處理相結(jié)合,才能使貯藏果蔬保持更好的生理品質(zhì)。高能電子束和適量SO2結(jié)合處理巨峰葡萄,可以更有效地抑制和殺滅病原微生物,減緩葡萄可滴定酸、VC 及單寧含量的下降速度,并能有效抑制果實(shí)褐變及果梗失綠,維持葡萄新鮮的品質(zhì)。高能電子束輻照結(jié)合臭氧處理和低溫貯藏的復(fù)合技術(shù)對保鮮草莓具有較好的效果,使草莓在溫度為(0.5依0.5)益,相對濕度為85%~95%條件下貯藏30 d 而不發(fā)生腐爛,且對草莓可溶性固形物含量和表皮色澤無顯著影響[25,36]。隨著貯期時(shí)間延長,果蔬的輻照效應(yīng)會逐漸減弱,復(fù)合保鮮技術(shù)可以彌補(bǔ)這一劣勢,在果蔬貯藏期間持續(xù)發(fā)揮作用。