潘磊 黃菁華

（1，山東省青島市即墨區(qū)動物疫病預防與控制中心 266200；2，山東省青島市即墨區(qū)動物衛(wèi)生安全服務中心 266200）

雞肉毒梭菌病是由肉毒梭菌引起的一種發(fā)病急、致死率高、死亡快，在濕熱季節(jié)危害比較嚴重的疾病。在當前倡導林下養(yǎng)雞、散養(yǎng)等綠色飼養(yǎng)方式下，該病常呈散發(fā)等流行趨勢，但因診斷比較難，如不注意防治容易引起較大的經(jīng)濟損失[1]。

1 雞肉毒梭菌病的病原簡介

本病多是由肉毒梭菌所產(chǎn)生的外毒素所引起的?，F(xiàn)在所見到的肉雞肉毒梭菌癥，都是由C 型毒素所引起的中毒癥狀。C型肉毒梭菌產(chǎn)生C1、C2 和D 三種毒素。對雞的致死因子為C1毒素，可以說產(chǎn)生C1 毒素的Ca 型菌為病原體。肉毒梭菌為革蘭氏陽性厭氧性，是可形成芽孢的大型桿菌，芽孢在土壤內(nèi)廣泛分布。從A 型到G 型的肉毒梭菌當中，C 型、D 型菌的發(fā)育要求厭氧度最高。

2 雞肉毒梭菌病的流行病學特點

肉毒梭菌癥，一般是經(jīng)口攝取了飼料中產(chǎn)生的毒素，毒素在消化道內(nèi)被吸收而引起的癥狀。雞的A 型肉毒梭菌癥就是按此機制而引起中毒的。飼料中毒素的產(chǎn)生一般有如下幾個因素：飼養(yǎng)條件不好的雞舍有可能會有老鼠等小動物進出，死亡的小動物或已死雞的尸體在雞舍內(nèi)腐爛產(chǎn)生毒素，雞攝取了被毒素污染的飼料后而發(fā)病；二是飼料或飲水被肉毒梭菌所污染，這是雞肉毒梭菌病流行的最主要原因，尤其是南方飼養(yǎng)條件不好的雞舍在潮濕的天氣條件下很容易造成本病的流行[2]。

3 雞肉毒梭菌病的臨床癥狀

肉毒梭菌癥的特征是麻痹。然而，也有不少病例呈現(xiàn)下痢（白?。?。產(chǎn)生C 型菌的毒素當中，C2 毒素不是神經(jīng)毒，證明具有致死作用和血管通透性亢進病作用，下痢是由C2 毒素所引起的。然而，C2 毒素經(jīng)口投與沒有毒素活性，如果下痢是由將C2 毒素引起的話，則可以說明其是在消化道內(nèi)產(chǎn)生的。肉毒梭菌癥的特異癥狀，最初引起翼和腿麻痹。隨著病程的進展，麻痹程度增強。食欲消失，從步行困難到不能起立，不能保持頭頸的正常高度與角度，將嘴觸到床面，呈現(xiàn)所謂“軟頸”癥狀。因為發(fā)生瞬膜麻痹，呈睡眠狀態(tài)。多數(shù)病雞在發(fā)病后2～10 日死亡。剖檢除可見腸黏膜充血或浮腫性病變以外，見不到明顯的病理學變化。

4 雞肉毒梭菌病的病理變化

雞的消化道中，產(chǎn)生C 型菌毒素的部位是盲腸。實驗中雖然能見到從雞盲腸吸收毒素，但活躍地吸收毒素的部位是小腸上部，尤其是十二指腸。并且，在盲腸內(nèi)產(chǎn)生的毒素，一旦活菌與芽孢一起被排出，則通過糞便污染可再被攝取。毒素由十二指腸被吸收，芽孢到達盲腸，再度發(fā)芽、增殖，產(chǎn)生毒素。因為被吸收的毒素是溶液，不能被吞噬，同時又不能被解毒和排出，在血液內(nèi)長期滯留。由于連續(xù)不斷地攝取，徐緩地使血中毒素水平上升，達到一定閾值時發(fā)病。

5 雞肉毒梭菌病的診斷

本病最確切的診斷，是從血中或肌胃洗液、盲腸內(nèi)容提取液中檢出C 型毒素，再予以鑒定。肌胃內(nèi)容物用適量的明膠稀釋液（將0.4%Na2HPO4·12H2O 用2N 鹽酸，調整到pH6.2 后，加0.5%明膠，加溫溶解）洗出，而盲腸內(nèi)容物懸浮在5～10ml稀釋液中，離心將上清作為檢體。以檢體0.5ml 給小白鼠腹腔內(nèi)注射，在經(jīng)1h 以上的潛伏期之后，呈現(xiàn)典型的癥狀（在腹壁震動之后，呈現(xiàn)陷凹，呼吸困難，四肢麻痹，眼球突出），在2～24h 內(nèi)死亡[3]。

小白鼠如發(fā)病、死亡的話，將C 型（C1) 抗毒素血清（10IU/ml）0.25ml 及檢體0.5ml 注射在腹腔內(nèi)，如毒素被中和時，則小白鼠不發(fā)病。中和反應中，使用其他型抗毒素或正常血清作為對照。因為雞對C1 型毒素感受性低，即或無癥狀，從血清內(nèi)、肌胃及盲腸內(nèi)容物中，都可檢出毒素。C 型肉毒梭菌的分離，要進行增菌培養(yǎng)，確定毒素產(chǎn)生再進行分離培養(yǎng)。增菌培養(yǎng)基以碳酸鈣加強化肉湯培養(yǎng)基為宜。處方是肉湯培養(yǎng)基內(nèi)補加碳酸鈣0.5%、酵母滲液1.0%、葡萄糖0.8%、硫酸銨1.0%、半胱氨酸0.1%，將pH 調整到7.6。接種檢體（盲腸、肌胃內(nèi)容物），80℃15min 加熱后，在厭氧缸內(nèi)37℃培養(yǎng)2 日。將增菌培養(yǎng)的離心上清，用明膠稀釋液5 倍稀釋，取0.5ml 注射于小白鼠腹腔內(nèi)。同時使用抗C1 血清，進行中和反應，以確認毒素。將確認有C 型毒素的增菌培養(yǎng)物，進行80℃15min加熱，涂抹在表面干燥的卵黃瓊脂平板上。

從發(fā)病肉雞的肌胃、小腸內(nèi)容物，經(jīng)常能得到C 型菌的純培養(yǎng)物。C 型菌落，雖然各式各樣，但必須能在其周圍見到珍珠樣帶光澤的環(huán)（脂酶反應）。將可疑菌落的菌，接種在碳酸鈣加強化肉湯培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)1 個月。純培養(yǎng)菌，不需要厭氧缸。用C 型菌純培養(yǎng)養(yǎng)液5 倍稀釋液0.5ml 給小白鼠腹腔內(nèi)注射，小白鼠1～3h 發(fā)病、死亡[4]。

6 預防與治療

清掃消毒，殺滅蒼蠅、蛆、蚊蟲等保持圈舍衛(wèi)生干燥，用次氯酸鈣、戊二醛等噴霧消毒，1 次/d，并做好滅蠅工作。及時取出死亡雞按進行無害化處理。病雞迅速隔離。雞舍要通風良好，為了避免糞與雞接觸，如有寬裕的地方，可將雞轉移到新雞舍去，加強雞舍消毒。

出現(xiàn)病雞的雞舍，用2%氫氧化鈉或次氯酸鈉液消毒后水洗，或撒布生石灰。進行雞舍周圍的土壤細菌學檢查，當存在有肉毒梭菌芽孢時，也要很好地消毒。雞舍內(nèi)要通風良好、干燥，避免過密飼養(yǎng)。

毒素性疾病，一旦發(fā)病，特異療法無效。然而，人的E 型肉毒梭菌中毒，發(fā)病后用抗毒素可見到治療效果。能夠步行及攝取飼料的輕癥病雞，進行隔離，充分供給飼料及飲水。出現(xiàn)軟頸癥狀，不能步行又不能自行采食的重病例，從經(jīng)濟方面來考慮，應予以淘汰。C 型肉毒梭菌對四環(huán)素、青霉素等有感受性，這些抗生物質經(jīng)口投與，可防止再產(chǎn)生毒素[5]。

建立程序化免疫方案，防治好禽流感、雞新城疫、雞傳染性支氣管炎雞白痢、禽霍亂、雞球蟲病等疾病，對于降低雞肉毒梭菌病的發(fā)生也具有重要的意義。

7 小結

當前雞肉毒梭菌病的診斷主要是依據(jù)肉毒素檢測和細菌分離鑒定、動物致病性實驗，這種檢測手段要求比較高，一般雞養(yǎng)殖場由于實驗條件有限而很難做到，對本病的診斷存在很大的難度。因此加強對養(yǎng)殖場的管理對防治本病有著重要的意義。養(yǎng)殖場應建立科學的飼養(yǎng)和管理方式，提高雞體整體免疫水平，保持環(huán)境清潔，杜絕外源性致病菌的侵入。