張智明，梁宛楠，張鳳強(qiáng)，柴 華

（哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，哈爾濱 150069）

豬支原體肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine，MPS），又稱(chēng)為豬喘氣病、豬地方性流行性肺炎，該病是一種呼吸道疾病，是豬的一種重要的接觸性傳染病，目前已經(jīng)在全球范圍內(nèi)廣泛分布，大多數(shù)國(guó)家的養(yǎng)豬場(chǎng)報(bào)道了該病[1]。其致病菌是豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp），該病原體可以感染幾乎所有品種和日齡的豬只，并且可以使豬體產(chǎn)生免疫抑制，降低對(duì)其他病原的免疫力，造成混合感染。一旦出現(xiàn)混合感染，會(huì)導(dǎo)致非常嚴(yán)重的后果，增加感染豬的死亡率，危害養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)利益。目前，該病對(duì)全世界養(yǎng)豬業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失十分巨大。豬支原體肺炎按照臨床表現(xiàn)可分為急性、慢性和隱性三型，急性豬支原體肺炎不常見(jiàn)，其特征是發(fā)病率可達(dá)100%，伴有發(fā)熱或不發(fā)熱的急性呼吸障礙；慢性豬支原體肺炎常見(jiàn)，主要特征是反復(fù)干咳和咳嗽，尤其是在飼喂或運(yùn)動(dòng)后，伴有發(fā)育不良；隱形豬支原體肺炎則表現(xiàn)為沒(méi)有臨床癥狀，僅偶爾咳嗽，只在剖檢時(shí)可以看到肺臟典型的病理變化，如在肺臟的各葉，尤其是心葉和尖葉出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的肉樣或胰樣病理變化[2]。

我國(guó)規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)的豬肺炎支原體的感染率非常廣泛。數(shù)據(jù)表明，我國(guó)豬場(chǎng)豬支原體肺炎的發(fā)病率一般為30%～50%，個(gè)別豬場(chǎng)的感染率甚至可達(dá)85%以上[3]，而由此造成的直接經(jīng)濟(jì)損失每年可高達(dá)40 億元[4]。因此，對(duì)于豬支原體肺炎的防治生豬養(yǎng)殖從業(yè)人員都非常重視。對(duì)于豬支原體肺炎的控制，一般可以采用抗生素或免疫疫苗來(lái)進(jìn)行治療或預(yù)防。但隨著國(guó)家限制使用抗生素政策的影響，以及出現(xiàn)的耐藥性和藥物殘留問(wèn)題，疫苗接種將成為預(yù)防本病最為重要的手段[5]。因此，免疫效果良好的疫苗將會(huì)不斷的被開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。我國(guó)目前市場(chǎng)上生產(chǎn)和銷(xiāo)售的豬肺炎支原體按性質(zhì)可分為滅活疫苗和活疫苗[6]，按照類(lèi)別可分為進(jìn)口疫苗和國(guó)產(chǎn)疫苗。而市場(chǎng)上占有率較高的則為進(jìn)口的滅活疫苗（包括哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司由輝瑞動(dòng)保轉(zhuǎn)讓的瑞倍適和瑞倍適-旺）。國(guó)產(chǎn)活疫苗的應(yīng)用范圍，由于其肺內(nèi)接種的免疫方式而受到了一定的限制。進(jìn)口疫苗盡管滅活效果好，但其價(jià)格較為昂貴[7]。因此，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上需要一種國(guó)產(chǎn)的、接種方便的滅活疫苗來(lái)降低養(yǎng)殖戶的防疫成本。為了達(dá)到該目的，在本研究中用制備的3批豬肺炎支原體滅活疫苗，對(duì)豬進(jìn)行免疫接種，研究對(duì)豬生長(zhǎng)性能的影響，為豬支原體肺炎滅活疫苗研制提供理論依據(jù)。

1 材 料

1.1 疫苗

豬肺炎支原體滅活疫苗，生產(chǎn)批號(hào)為202001、202002 和202003，由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備和保存。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

2 周齡的健康易感仔豬（經(jīng)ELISA 方法檢測(cè)，豬肺炎支原體血清抗體陰性），購(gòu)自黑龍江省哈爾濱市郊某豬場(chǎng)，品種為長(zhǎng)白豬。

2 方 法

2.1 疫苗免疫

2周齡健康易感仔豬20頭隨機(jī)分為4組，每組5 頭，其中3 組作為免疫組，分別接種實(shí)驗(yàn)室3 批制品（批號(hào)：202001、202002、202003），接種方式為頸部肌肉注射，接種劑量為2.0 mL·頭-1，對(duì)照組接種同量的生理鹽水，接種方式與接種量同免疫組。疫苗免疫后，對(duì)疫苗免疫豬的安全性進(jìn)行觀察，連續(xù)觀察28 d。試驗(yàn)分組情況見(jiàn)表1。

表1 對(duì)豬的生產(chǎn)性能影響試驗(yàn)分組

2.2 檢測(cè)方法

疫苗免疫后，按以下項(xiàng)目檢測(cè)：（1）疫苗免疫后連續(xù)28 d，免疫后系統(tǒng)觀察免疫豬的健康情況，包括存活、飲食、活動(dòng)、排便、眼睛結(jié)膜及其分泌物等。（2）疫苗免疫后連續(xù)28 d，觀察疫苗接種是否出現(xiàn)局部反應(yīng)：包括注射部位是否出現(xiàn)紅、腫、疹塊或硬塊，按壓接種部位豬是否有痛感，并將觀察結(jié)果詳細(xì)記錄。（3）疫苗免疫后連續(xù)28 d，觀察疫苗接種是否出現(xiàn)全身反應(yīng)：包括嘔吐、痙攣、口吐白沫、死亡等不良反應(yīng)，必要時(shí)可注射腎上腺素進(jìn)行急救。（4）免疫前和免疫后1 個(gè)月稱(chēng)取和記錄每頭豬的體重，并計(jì)算全程均只增重。

3 結(jié) 果

用3批豬肺炎支原體滅活疫苗進(jìn)行豬的生產(chǎn)性能影響試驗(yàn)。

接種后試驗(yàn)豬全部健活，精神狀態(tài)良好，行為、采食和飲水正常，無(wú)其他全身不良反應(yīng)；注射局部吸收良好，無(wú)紅腫、硬結(jié)；免疫后1個(gè)月每頭豬的體重及全程均只增重均優(yōu)于對(duì)照組的增重情況，結(jié)果見(jiàn)表2～3。

表2 對(duì)豬的生產(chǎn)性能影響臨床觀察結(jié)果

表3 對(duì)豬的生產(chǎn)性能影響體重測(cè)量結(jié)果

4 討論與結(jié)論

由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司制備的豬肺炎支原體滅活疫苗，與目前國(guó)產(chǎn)活疫苗的接種方式有顯著的區(qū)別。目前國(guó)產(chǎn)活疫苗一般需要進(jìn)行肺內(nèi)接種，對(duì)接種技術(shù)的要求比較高，對(duì)接種人員的要求也比較高，如果未經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)指導(dǎo)或培訓(xùn)，在接種時(shí)很容易對(duì)接種豬造成傷害[8]。因此，肺內(nèi)接種的豬肺炎支原體活疫苗的應(yīng)用和推廣，受到一定程度的限制[9]。在進(jìn)行滅活疫苗制備時(shí)，首先考慮了接種途徑，使制備的疫苗能夠以較為方便的方式進(jìn)行接種，以解決活疫苗接種過(guò)程中的不足。而影響滅活疫苗接種方式的重要因素，一般都與佐劑有關(guān)[10-13]。在制備過(guò)程中，經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，最終選擇一種進(jìn)口佐劑，作為豬支原體肺炎滅活疫苗的佐劑，并取得了良好的免疫效果。同時(shí)，對(duì)制備疫苗的安全性以及對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的影響進(jìn)行了測(cè)定。在本試驗(yàn)中疫苗接種后，接種的豬全部健活，神狀態(tài)良好，行為、采食和飲水正常，沒(méi)有出現(xiàn)應(yīng)激、死亡等全身不良反應(yīng)；沒(méi)有出現(xiàn)體溫升高的情況；疫苗接種的局部吸收良好，無(wú)紅腫、硬結(jié)；按壓無(wú)痛感；免疫后1個(gè)月，免疫組的豬平均體重為，均在12 kg 以上，全程均只增重均在8 kg以上，與空白對(duì)照組相比效果較好。從以上的數(shù)據(jù)可以看出，本研究制備豬肺炎支原體滅活疫苗在用使用劑量接種豬后，疫苗的安全性良好，同時(shí)。對(duì)于豬的生產(chǎn)性能無(wú)任何不良的影響，甚至還有一定的促進(jìn)作用。

本研究制備豬肺炎支原體滅活疫苗安全性良好，對(duì)豬的生產(chǎn)性能有一定的促進(jìn)作用。