涂永麗，周宏炫，譚書明，羅繼偉

(貴州大學(xué) 釀酒與食品工程學(xué)院，貴州 貴陽(yáng)，550025)

消化不良主要表現(xiàn)是由消化功效減弱、內(nèi)部絮亂所引發(fā)的胃腸道不適的系統(tǒng)性疾病。隨著人們生活質(zhì)量的提高及生活方式的改變，發(fā)病率呈現(xiàn)不斷升高趨勢(shì)[1]。據(jù)流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)在門診中占消化內(nèi)科疾病的1/3, 發(fā)病率18%～23%,嚴(yán)重影響患者的生活水平[2-3]，這類消化疾病持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，給患者身心健康造成嚴(yán)重的影響[4]，并帶來昂貴的醫(yī)藥費(fèi)用[5]。目前臨床上主要使用合成藥，在消化疾病患者的初步階段治療效果較好，但對(duì)長(zhǎng)期治療效果卻不理想[6]。因此，從天然植物中探索副作用小、促消化功能的食品原材料具有較高的市場(chǎng)前景和社會(huì)價(jià)值。

刺梨又名送春歸、團(tuán)糖二等, 薔薇科多年生灌木[7]，主要分布在中國(guó)西南地區(qū)，尤其是貴州龍里、盤州等地[8]。其營(yíng)養(yǎng)成分豐富，具有滋補(bǔ)開胃健脾的功效[9]。此外，刺梨果實(shí)中含有超氧化物岐化酶、有機(jī)酸、黃酮、多糖、多酚、微量元素及人體所需的氨基酸物質(zhì)等[10-13]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究，刺梨可以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力和延緩衰老、降血糖、降血脂、解酒、健胃消食等功效[14-19]。李永渝等[20]研究發(fā)現(xiàn)刺梨可以增強(qiáng)胃腸蠕動(dòng)，使膽汁、胰液流量增加，促進(jìn)消化的作用。李貽等[21]經(jīng)由體外模擬刺梨消化，得出胃蛋白酶、胰酶能增進(jìn)消化及抗氧化活性。其他研究顯示，刺梨中的有機(jī)酸組分不僅是其果實(shí)品質(zhì)和特殊風(fēng)味的重要組成因子, 它可能還具有和其他活性物質(zhì)一起共同促進(jìn)消化及其他作用[11]。目前，關(guān)于研究刺梨汁促消化作用及其機(jī)制研究鮮有報(bào)道。所以本文以刺梨原汁及不同程度的濃縮后連續(xù)灌胃模型小鼠15 d，大鼠28 d后，探討刺梨汁的促消化作用，并以此為刺梨汁開發(fā)輔助健脾開胃食品及其促消化機(jī)理提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、動(dòng)物與試劑

刺梨果實(shí)原汁，貴州省貴陽(yáng)市龍里縣工業(yè)園區(qū)；刺梨汁高、中、低劑量組分別為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮6倍、4倍、刺梨原汁，分別于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)小鼠：18～22 g的KM種雄性小鼠(SCXK (湘) 2019—0014)，SD大鼠180～200 g(SCXK(湘)2019—0014)，湖南省長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司。復(fù)方地酚諾酯片，國(guó)藥準(zhǔn)字(H32022716)，健胃消食片(批號(hào)18111036)，江中藥業(yè)股份有限公司；活性炭粉，阿拉丁試劑(上海)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

R-201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海申勝生物技術(shù)有限公司；游標(biāo)卡尺；剪刀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品的配制

復(fù)方地芬諾酯片：取復(fù)方地酚諾酯片0.05 g,用研缽研碎呈粉末后加水至0.1 L,配制成質(zhì)量濃度為0.5 mg/mL的混懸液，當(dāng)天配制。

墨汁：取100 g阿拉伯樹膠粉溶于400 mL蒸餾水中，配成250 g/L的透明溶液，再放入50 g活性碳粉，煮沸3次，用蒸餾水定容至500 mL，4 ℃冷藏，用前混勻。

健胃消食片：用研缽研磨成細(xì)粉，用水制成0.133 g/mL的混懸液，當(dāng)天配制。

1.3.2 動(dòng)物分組及喂養(yǎng)

將小鼠造模成功后，按照體重隨機(jī)分成6組(n=10),分別是模型組、空白組、陽(yáng)性組、刺梨汁低、中、高劑量組每天分別灌胃0.3、0.6、1.2 g/kg。大鼠按照體重隨機(jī)分成5組(n=8)，每天分別以10 mL/kg進(jìn)行灌。小鼠模型組灌胃復(fù)方地芬諾酯混懸液，陽(yáng)性組灌胃健胃消食懸浮液，刺梨汁中、高劑量組分別給予相應(yīng)濃縮倍數(shù)的刺梨汁，低劑量組給予原汁。15 d后測(cè)定小腸的蠕動(dòng)功效；大鼠灌胃28 d，早上9點(diǎn)測(cè)定記下大鼠的飲食量，一周稱一次體重。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)定大鼠體重、體重增加量、攝食量、飼料利用率、消化酶。

表1 各組小鼠的分組及喂養(yǎng)Table 1 Grouping and feeding of mices in each group

表2 各組大鼠的分組及喂養(yǎng)Table 2 Grouping and feeding of rats in each group

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 小腸蠕動(dòng)的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)結(jié)束前禁食不禁水，16 h后各給藥組和對(duì)照組再灌胃1次樣品及生理鹽水。30 min后各組灌胃墨汁,25 min后斷頸死亡,打開腹腔分開腸系膜,剪取上端自幽門、下端至回盲腸部位的腸管,置于托盤上,輕輕將小腸拉成直線,量取腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”,從幽門至墨汁前沿為“小腸推進(jìn)長(zhǎng)度”[22]。

(1)

小腸推動(dòng)率的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換,X=sin-1Ρ,式中P為小腸推進(jìn)率。

1.4.2 大鼠體重、體重增重、攝食量和食物利用率的測(cè)定

灌胃28 d后，結(jié)束前禁食不禁水24 h后，計(jì)算體重增加量和食物利用率，食物利用率計(jì)算如公式(2)所示：

(2)

1.4.3 大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量的測(cè)定

胃液1 mL置于50 mL三角瓶中,配制15 mL 0.05 mol/L HCl溶液搖勻,放入新鮮制作的蛋白管。塞好瓶口,在37 ℃恒溫箱中孵育24 h后,拿出蛋白管,用游標(biāo)卡尺量取蛋白管兩端前后透明處的長(zhǎng)度(mm)。取4端處之值求其平均值。計(jì)算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量[22]，如公式(3)和公式(4)所示：

胃蛋白酶活性/(U·mL-1)

=4端蛋白管透明部分長(zhǎng)度均值2×16

(3)

胃蛋白酶排出量/(U·h-1)

=胃蛋白酶活性×每小時(shí)胃液量

(4)

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

全部數(shù)據(jù)采取SPSS 21.0軟件進(jìn)行方差分析，P<0.05或P<0.01為具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Orgin制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 刺梨對(duì)小鼠小腸蠕動(dòng)的影響

消化不良主要與小腸的蠕動(dòng)有關(guān)[23]。經(jīng)過不同劑量刺梨汁灌胃小鼠，測(cè)定小腸的推進(jìn)功效。復(fù)方地芬諾酯是一種治療功能性腹瀉的藥物，配以抗膽堿藥阿托品, 協(xié)同加強(qiáng)對(duì)腸管蠕動(dòng)的抑制,采用其誘導(dǎo)小鼠模型已經(jīng)成為檢驗(yàn)促消化效果的試驗(yàn)方法[24]。刺梨汁對(duì)小鼠小腸的蠕動(dòng)結(jié)果如1圖所示。與正常組相比，模型組小腸推進(jìn)率下降了52.77%，具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，表明小鼠在灌胃給予復(fù)方地芬諾酯后，腸道蠕動(dòng)抑制模型建立成功。與模型組相比，刺梨汁中、高劑量、陽(yáng)性組小腸推進(jìn)率提高了45.83%、51.35%、43.93%(P<0.05，P<0.01)；濃縮汁高劑量與陽(yáng)性組相比，明顯提高小腸推進(jìn)率(P<0.05)。彭章蒙等[25]研究白蘿卜促消化作用，發(fā)現(xiàn)中、高2個(gè)劑量組小腸推進(jìn)長(zhǎng)度及推進(jìn)率轉(zhuǎn)化值顯著增長(zhǎng)(P<0.05)。

圖1 刺梨汁對(duì)小鼠小腸蠕動(dòng)的影響Fig.1 Effect of Rose roxburghii Tratt juice on small intestinal peristalsis in mice注：##表示與正常組相比較P<0.01；*表示與模型組相比較 P<0.05；**表示與模型組相比較P<0.01

2.2 刺梨對(duì)大鼠體重、體重增加量、攝食量和食物利用率的影響

消化不良導(dǎo)致食欲減退、攝食量明顯減少，由此導(dǎo)致體重減輕、食物利用率下降；反之，消化功能越好則攝食量、體重增加量越大、食物利用率越高[26]。刺梨汁對(duì)大鼠體重的影響如圖2所示，對(duì)大鼠體重增加量、攝食量及食物利用率如表3。由圖2可知，刺梨汁低、中、高劑量組與空白組相比較，對(duì)大鼠體重?zé)o顯著性影響(P>0.05)。陽(yáng)性組在給藥14 d后與空白組相比大鼠體重顯著增加(P<0.05)。由表3可知，刺梨汁各劑量組對(duì)大鼠體重增加量和食物利用率沒有顯著性差異(P>0.05)，但攝食量顯著增長(zhǎng)(P<0.05)，與空白組相比，陽(yáng)性組、刺梨低、中、高劑量組分別增加攝食量5.66%、1.39%、2.64%、4.25%，表明刺梨汁可以提高大鼠食欲。

2.3 刺梨對(duì)大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量的影響

胃蛋白酶是由胃內(nèi)的胃蛋白酶原經(jīng)過胃酸活化后產(chǎn)生[27]。刺梨汁各劑量組對(duì)大鼠胃蛋白酶活性及胃蛋白酶排出量的影響見圖3，陽(yáng)性組、刺梨中、高劑量組與正常組相比，胃蛋白酶活性提高53.27%、33.41%、41.38%(P<0.05)，胃蛋白酶排出量提高58.41%、32.53%、38.19%(P<0.05)。表明刺梨汁可以增加胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。傅曼琴等[28]研究陳皮促消化，得出各活性物可以增長(zhǎng)胃蛋白酶活性和蛋白酶排出量。

圖2 刺梨汁對(duì)大鼠體重量的影響Fig.2 Effects of Rose roxburghii Tratt juice on body mass in rats

表3 刺梨汁對(duì)大鼠體重增加量、攝食量、食物 利用率的影響Table 3 Effects of Rose roxburghii Tratt juice on weight gain, food intake and food utilization in rats

圖3 刺梨汁對(duì)大鼠胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量的影響Fig.3 Effect of Rose roxburghii Tratt juice on the activity and excretion of pepsin in rats注：*表示與正常組相比較P<0.05,**表示與正常組相比較P<0.01

3 結(jié)論

本文通過15 d小鼠、28 d大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，并測(cè)定指標(biāo)對(duì)促消化功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。研究得出，刺梨中、高劑量組與模型組相比，小腸推進(jìn)率提高，高劑量組作用顯著(P<0.05)；刺梨不同劑量組與正常組相比，對(duì)大鼠體重增加量和食物利用率沒有顯著性差異(P>0.05)，但可以明顯增進(jìn)攝食量(P<0.05)；中、高劑量組可以提高胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量(P<0.05)。研究證明刺梨汁具有促消化功能，如將刺梨汁研發(fā)成具有消化功效的食品，將大力促進(jìn)食療領(lǐng)域新產(chǎn)品的研發(fā)。但目前關(guān)于刺梨汁促消化的機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。