[摘要]目的:探討冷凝集對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的干擾性和改善的對(duì)策。方法:實(shí)驗(yàn)對(duì)象為我院收治的80例接受孕前檢查和婚檢血型鑒定人群,從受檢者的靜脈血血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果中挑選出紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)≥35pg且血細(xì)胞分析儀報(bào)警信息為紅細(xì)胞(RBC)凝集的標(biāo)本,使用血細(xì)胞分析儀對(duì)為經(jīng)過(guò)處理的不同效價(jià)冷凝集素標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),并且所有標(biāo)本均采取37°C水浴法、血漿置換法以及預(yù)稀釋法處理,觀察并分析三種檢查的檢驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果:80例冷凝集素標(biāo)本中,直接上機(jī)檢查可見(jiàn)患者M(jìn)CV、MCH、MCHC水平均明顯增高,HCT指標(biāo)降低(P<0.05);37°C水浴法處理后MCH和MCHC指標(biāo)和預(yù)稀釋法、血漿置換法相比較高(P<0.05);血漿置換法處理后,PLT指數(shù)下降(P<0.05);預(yù)稀釋法處理后所用檢查項(xiàng)目均逐漸恢復(fù)正常。結(jié)論:和37°C水浴法、血漿置換法相比,采用預(yù)稀釋法處理冷凝集素標(biāo)本,可保證血常規(guī)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確度和有效性,并且操作簡(jiǎn)單,值得臨床推廣。
[關(guān)鍵詞]冷凝集;血常規(guī)檢驗(yàn);干擾性;改善對(duì)策
[中圖分類(lèi)號(hào)]R446.11
[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A
[文章編號(hào)]2096-5249(2021)24-0185-02
血常規(guī)檢驗(yàn)(blood routine examination)是臨床上常見(jiàn)的檢查方法之一,一般使用自動(dòng)化血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢驗(yàn),大大提高了血常規(guī)檢測(cè)的準(zhǔn)確性與效率[1]。本文采取37°C水浴法、血漿置換法和預(yù)稀釋法處理80例MCH≥35pg且血細(xì)胞分析儀報(bào)警信息為紅細(xì)胞凝集的標(biāo)本,觀察三種處理方法的血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果,并對(duì)結(jié)果和處理措施進(jìn)行分析,以期選出最優(yōu)的冷凝集標(biāo)本處理措施,確保血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性匯報(bào)如下。
1資料與方法
1.1一般資料實(shí)驗(yàn)對(duì)象為我院2019年2月至2020年6月收治的80例接受孕前檢查和婚檢血型鑒定人群。男女人數(shù)比例為42:38,最小23歲,最大33歲,平均年齡(28.4±3.7)歲。所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象基本信息對(duì)比無(wú)顯著差別(P>0.05),存在可比性。納入標(biāo)準(zhǔn):1年齡小于50歲;2紅細(xì)胞平均血紅蛋白量≥35pg;3經(jīng)告知后所有實(shí)驗(yàn)對(duì)象均同意參與。排除標(biāo)準(zhǔn):1患有嚴(yán)重心、腦血管疾病的患者;2患有惡性腫瘤的患者;3患有嚴(yán)重貧血癥的患者;4凝血功能?chē)?yán)重障礙的患者;5患有脂血癥、黃疸的患者;6發(fā)生溶血的患者。
1.2方法(1)儀器和試劑選用mindrayBc-5180全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套原裝試劑與質(zhì)控品。血常規(guī)檢測(cè)前對(duì)儀器進(jìn)行檢查校準(zhǔn),保證每日室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果均在設(shè)定的質(zhì)控范圍內(nèi)。健康成人O型2%洗滌RBC和O型臍血2%洗滌RBC為新鮮自制。(2)80例冷凝集素標(biāo)本均按以下方法進(jìn)行處理:1使用真空抗凝采集管抽取每例患者2份靜脈血,按照實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程正常進(jìn)行血細(xì)胞分析。2觀察每份冷凝集素標(biāo)本在血細(xì)胞分析儀上的報(bào)警信息、RBC直方圖。3在4°C室溫下制作血薄涂片瑞氏染色鏡檢。同時(shí)取試管一支加入混勻的標(biāo)本0.2mL和生理鹽水0.6mL混合均勻制作成4倍稀釋標(biāo)本;將稀釋標(biāo)本依次在室溫4°C、37°C條件下平衡5min后分別用肉眼和涂片顯微鏡觀測(cè)。4將標(biāo)本置37°C溫箱孵育0.5h后保溫上機(jī)測(cè)定,然后離心機(jī)分離血漿(離心率為3000r/min,持續(xù)時(shí)間為5min),采用離心機(jī)配套的移液器和吸頭取出上層血漿棄掉,樣本加入等量生理鹽水混合,反復(fù)三次后,上機(jī)檢測(cè)。5抗體特異性鑒定用健康成人O型2%洗滌RBC和O型臍血2%洗滌RBC分別與血漿等量混合,4°C平衡5min后分別觀測(cè)。如有凝集放置37°C溫箱孵育箱中平衡5min后再觀測(cè)有無(wú)凝集現(xiàn)象。6冷凝集素試驗(yàn)用血漿按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》要求操作,同時(shí)做對(duì)照。
1.3觀察指標(biāo)觀察并統(tǒng)計(jì)冷凝集素標(biāo)本經(jīng)過(guò)37°C水浴法、血漿置換法以及預(yù)稀釋法處理后的血小板(PLT)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、紅細(xì)胞比容(HCT)、紅細(xì)胞平均體積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)指標(biāo)。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法利用SPSS22.0專(zhuān)業(yè)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本次檢查結(jié)果進(jìn)行分析,計(jì)量資料以(x±s)表示,采用t檢驗(yàn),P<0.05可認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1觀察3種不同方法處理冷凝集素標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果由表1數(shù)據(jù)可知,采用預(yù)稀釋法處理冷凝集素標(biāo)本后,紅細(xì)胞相關(guān)指數(shù)、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白等指標(biāo)均恢復(fù)正常;37°C水浴法處理后紅細(xì)胞在血涂片上少量凝聚,其他兩種方法未見(jiàn)紅細(xì)胞凝聚。
3討論
血常規(guī)是臨床上較為常見(jiàn)的檢測(cè)方法之一,可以利用檢測(cè)血液中細(xì)胞形態(tài)以及數(shù)量等對(duì)疾病進(jìn)行診斷。當(dāng)人們體內(nèi)某一組織發(fā)生病變時(shí),血液中的某些成分便會(huì)發(fā)生病理性變化,對(duì)受檢者血液中的細(xì)胞形態(tài)和數(shù)量進(jìn)行檢查,可以對(duì)其身體狀況和部分疾病進(jìn)行診斷,為臨床診治提供有效依據(jù)。采用血細(xì)胞分析儀雖然提高了血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度,但容易受到冷凝集影響?;加幸略w肺炎和自身免疫性疾病患者的外周血中普遍存在冷凝激素。冷凝集素綜合征是指以微循環(huán)血栓、慢性溶血性貧血為主要特征的疾病,外界溫度降低和自身反應(yīng)性紅細(xì)胞凝聚均會(huì)造成該癥狀。冷凝激素是一種單克隆或者多克隆自身抗體,大部分淋巴網(wǎng)狀細(xì)胞腫瘤病人均伴有單克隆冷凝激素,支原體肺炎病人普遍存在多克隆冷凝激素。正常人體血清中基本都含有低滴度的冷凝激素,當(dāng)冷凝激素效價(jià)小于1:16時(shí)不影響血常規(guī)檢查結(jié)果,不具備臨床意義,效價(jià)越高對(duì)血常規(guī)檢查結(jié)果影響越顯著。
3.1冷凝集表現(xiàn)形式冷凝集容易對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性造成干擾,其能對(duì)RBC膜抗原的IgM產(chǎn)生作用,當(dāng)溫度低于31°C時(shí),冷凝激素會(huì)造成RBC聚集,在進(jìn)行血常規(guī)檢查時(shí)會(huì)出現(xiàn)RBC假性降低的情況,且造成MCV、MCH、MCHC水平異常升高,同時(shí)對(duì)WBC、PLT檢查結(jié)果造成影響,但這些現(xiàn)象具有可逆性。健康人群血液中的抗RBC抗體的效價(jià)相對(duì)較低,不容易導(dǎo)致RBC產(chǎn)生冷凝集;但當(dāng)人體發(fā)生病理性變化時(shí),如在多發(fā)性骨髓瘤、嚴(yán)重貧血的病人血液中冷凝集素的效價(jià)相對(duì)較高,容易誘發(fā)嚴(yán)重的冷凝集,從而發(fā)生相應(yīng)的臨床反應(yīng),其具有可逆性[2]。大部分人認(rèn)為只有在體溫溫度下降的情況下才會(huì)發(fā)生冷凝集現(xiàn)象,其實(shí)在溫度較高的條件下也容易發(fā)生冷凝集現(xiàn)象,這種患者冷凝集素的效價(jià)普遍較高,因此形成冷凝集的溫度范圍比較寬。
3.2冷凝集對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的影響全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的原理是細(xì)胞利用一定大小的孔徑產(chǎn)生不同的電阻信號(hào),而儀器收集信號(hào)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),但是如果血液中有高效價(jià)的冷凝集素,便會(huì)導(dǎo)致RBC聚集在一起穿過(guò)檢測(cè)孔,儀器不能準(zhǔn)確判斷通過(guò)的是一個(gè)細(xì)胞還是聚集在一起的細(xì)胞,從而將聚集在一起的細(xì)胞當(dāng)做單個(gè)細(xì)胞穿過(guò)檢測(cè)孔,產(chǎn)生電阻脈沖信號(hào)也僅有一個(gè),故對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)造成干擾,降低了紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果,使紅細(xì)胞遠(yuǎn)低于實(shí)際濃度,導(dǎo)致紅細(xì)胞假性降低;并且,紅細(xì)胞聚集在一起穿過(guò)檢測(cè)孔時(shí),極易被儀器當(dāng)做大紅細(xì)胞,造成脈沖振幅提高,進(jìn)而導(dǎo)致紅細(xì)胞平均體積增加和紅細(xì)胞分布圖異?,F(xiàn)象。臨床上主要使用37°C水浴加熱法預(yù)防冷凝激素對(duì)血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的影響,在一定程度上能減少RBC聚集,但血液中冷凝集效價(jià)較高時(shí),這種方法效果并不理想。血漿置換法主要使用生理鹽水置換血漿,從而消除血液中的冷凝集素,雖然能解決冷凝集問(wèn)題,但在置換后常常出現(xiàn)WBC和PLT指數(shù)下降的現(xiàn)象[3]。采用預(yù)稀釋法處理血液冷凝集現(xiàn)象,可有效降低冷凝集素效價(jià),使PLT、RBC、WBC、MCV、HCT、MCV等指標(biāo)恢復(fù)正。本文研究結(jié)果可看出,冷凝集現(xiàn)象對(duì)臨床血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生較大的影響,冷凝集素會(huì)導(dǎo)致RBC計(jì)數(shù)異常減少,MCHC水平明顯提升,如果在血常規(guī)檢查時(shí)處理不當(dāng),便會(huì)影響檢查結(jié)果,不利于醫(yī)生對(duì)患者的準(zhǔn)確診斷和治療,因此,在出具血常規(guī)檢驗(yàn)報(bào)告時(shí)可結(jié)合三種處理方法進(jìn)行綜合分析,可提高檢驗(yàn)準(zhǔn)確性。
綜上所述,37°C水浴法、血漿置換法、預(yù)稀釋法對(duì)解決血液中的冷凝集素均有效果,但冷凝集效價(jià)較高時(shí)37°C水浴法效果欠佳,存在一定局限性;血漿置換法容易導(dǎo)致WBC、PLT指數(shù)下降。預(yù)稀釋法對(duì)降低冷凝集素效價(jià)具有顯著效果,能有效提高血常規(guī)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性,并且操作方便,值得進(jìn)一步推廣。
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作者簡(jiǎn)介:鐘美梅(1986.02-),女,漢族,本科學(xué)歷,主管檢驗(yàn)師,研究方向:檢驗(yàn)。