曹彥衛(wèi)

（河北省林草花卉質(zhì)量檢驗(yàn)檢測中心，河北 石家莊 050081）

異菌脲是二甲酰亞胺類高效廣譜、觸殺型殺菌劑，能抑制蛋白激酶，控制許多細(xì)胞功能細(xì)胞內(nèi)信號(hào)，包括碳水化合物結(jié)合進(jìn)入真菌細(xì)胞組分的干擾作用。因此，它對(duì)葡萄孢屬、核盤菌屬、鏈孢霉屬、小菌核屬等菌具有較好的殺菌效果，對(duì)蠕孢霉屬、鏈格孢屬、鐮刀菌屬、絲核屬、伏革屬等菌也有效果，可以在多種作物上防治多種病害，如：核果類果樹上的菌核病，蘋果斑點(diǎn)落葉病，梨黑星病，馬鈴薯立枯病，葡萄、草莓和蔬菜的灰霉病等[1-2]。

本文從異菌脲的理化性質(zhì)、殘留分析方法、殘留規(guī)律研究等方面詳細(xì)論述異菌脲在水果、蔬菜中的殘留進(jìn)行的各項(xiàng)相關(guān)研究，以期深入了解該農(nóng)藥，更好為無公害果蔬生產(chǎn)服務(wù)。

1 異菌脲理化性質(zhì)

中文通用名為異菌脲，別名：咪唑霉、撲海因、桑迪恩。

英文通用名為iprodione；化學(xué)名稱為3-（3，5-二氯苯基）-1-異丙基氨基甲?；覂?nèi)酰脲。

1.1 理化性質(zhì)

異菌脲純品為非吸濕性晶體或粉末，白色無味。20℃蒸氣壓0.133MPa，熔點(diǎn) 134℃，密度 1.00（20℃），難溶于水，在水中溶解度13mg/L（20℃）。易溶于丙酮、二甲基甲酰胺等多數(shù)有機(jī)溶劑，酸性介質(zhì)中穩(wěn)定，堿性介質(zhì)中水解，其水溶液在紫外光下分解。無吸濕性，無腐蝕性。在通常貯藏條件下穩(wěn)定。

1.2 毒性

按中國農(nóng)藥毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，異菌脲屬低毒雜環(huán)類殺菌劑。原藥大鼠急性經(jīng)口LD50為3500mg/kg，兔急性經(jīng)皮LD50＞1000mg/kg。大、小鼠急性吸入LD50>13mg/L。虹鱒魚96h LD50為6.7mg/L，藍(lán)鰓魚96h LD50為 2.25～6.30mg/L。蜜蜂經(jīng)口 LD50＞400μg/頭。鵪鶉 LD50＞930mg/kg。

2 異菌脲殘留分析方法研究現(xiàn)狀

目前，我國對(duì)異菌脲殘留量分析方法的研究主要集中在樣品前處理和分析檢測兩大部分。

2.1 異菌脲殘留分析樣品前處理方法研究

近年來，國內(nèi)對(duì)異菌脲殘留檢測所采用的樣品前處理技術(shù)采用較常見的是固相萃取法（SPE）[3-7]和Qu ECh ERS 法[8-11]。

固相萃取法就是分析目的物通過在鍵合硅吸附劑與溶劑中進(jìn)行分配，而與干擾物分離，此方法已成為農(nóng)殘分析前處理的主要手段，發(fā)達(dá)國家代替液液萃取法（LLE）已廣泛應(yīng)用，各種不同結(jié)構(gòu)類型的農(nóng)藥都有相適應(yīng)的SPE 商品柱，適用范圍很廣[12]。固相萃取還具有它本身的特點(diǎn)：分析物與干擾物能有效地分離，減少背景的干擾；分析物的回收率高；有機(jī)溶劑的用量少，溶劑的低消耗減少對(duì)環(huán)境的污染；不需要超純?nèi)軇?；能處理小體積的樣品；無相分離操作，容易收集分析物組分；操作簡單、省時(shí)省力、易于自動(dòng)化，可同時(shí)處理多個(gè)樣品，提高分析質(zhì)量。

QuEChERS 是 Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged，Safty 的縮寫，由美國農(nóng)業(yè)部Anastassiadas等于2003 年提出，是目前農(nóng)藥殘留提取的典型手段，提取同時(shí)完成一次液液分配凈化[13]。詳細(xì)操作如下：稱取粉碎后的樣品適量，以乙腈為溶劑并加入提取鹽包（含 MgSO4、NaCl，pH 為 5～5.5），劇烈震搖后進(jìn)行勻漿提取，提取結(jié)束后離心，吸取一定量有機(jī)相于分散固相萃取管中進(jìn)行凈化，雜質(zhì)被吸附劑（如PSA 或GCB）及無水硫酸鎂除去后再次離心，上清液即為待測液[14-15]。是一種快速、簡便、廉價(jià)、有效、穩(wěn)定、安全的萃取技術(shù)，相比較其他方法，具有試劑用量少、操作簡單、速度快、精密度和準(zhǔn)確度高、價(jià)格低廉等特點(diǎn)[16-18]。

2.2 異菌脲殘留檢測方法的研究

目前，國內(nèi)異菌脲檢測方法的研究主要集中在氣相色譜法（GC）[19-27]、高效液相色譜法（GC-HPLC）[285-40]、串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS、（LC-MS/MS）[41-46]。

氣相色譜（GC）是一種經(jīng)典的分析方法。GC 常用于揮發(fā)性農(nóng)藥的檢測。使用氣相色譜法，多種農(nóng)藥可以一次進(jìn)樣，得到完全的分離、定性和定量測定。它具有操作簡單、分離效能高、靈敏度高、分析速度快、成本低以及應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，缺點(diǎn)是不適宜用于熱不穩(wěn)定化合物的檢測[19-27]，是目前眾多異菌脲殘留檢測中應(yīng)用最多的方法。

高效液相色譜法（HPLC）是以液體作流動(dòng)相的一種色譜法。它常用于分析極性強(qiáng)、分子量大、熱不穩(wěn)定、高沸點(diǎn)的離子型農(nóng)藥，尤其適合GC 不能分析的不易氣化或受熱容易分解的農(nóng)藥檢測[28-35]。它具有分析速度快的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)可有效地分離農(nóng)藥中的有害成分。在不揮發(fā)性農(nóng)藥的檢測方面尤為突出。缺點(diǎn)是對(duì)于某些含熒光物質(zhì)的農(nóng)藥種類，可能導(dǎo)致高效液相色譜法的檢測器對(duì)殘留物的分析不靈敏。

串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS、（LC-MS/MS），質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法現(xiàn)已越來越普及，它是在色譜的基礎(chǔ)上加上質(zhì)譜儀，通過對(duì)選定的母離子進(jìn)行二次碎裂后進(jìn)一步進(jìn)行監(jiān)測，具有更高的選擇性。該方法不僅能對(duì)待測組分進(jìn)行較好的分離，用來分析檢測待測物的含量，還能通過質(zhì)譜儀對(duì)未知物的結(jié)構(gòu)性質(zhì)特征進(jìn)行鑒定分析，避免氣相色譜、液相色譜的定性錯(cuò)誤，能有效排除復(fù)雜基質(zhì)干擾從而使檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠，這種檢測分析方法特別適合分析農(nóng)藥的降解途徑分析和多種殘留農(nóng)藥檢測分析，可對(duì)樣品中幾十或上百種農(nóng)藥殘留同時(shí)進(jìn)行定性定量分析檢測。該法具靈敏度高、抗干擾能力強(qiáng)，選擇性強(qiáng)，分析效率高等特點(diǎn)，是目前農(nóng)殘痕量分析的主流技術(shù)。尤其是 結(jié) 合 QuEChERS（Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged andSafe）方法，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行快速、高通量的檢測。缺點(diǎn)是檢測儀器昂貴，不適合在蔬菜水果檢測的生產(chǎn)部門和基層檢測部門推廣普及。

近年來國內(nèi)對(duì)異菌脲殘留分析研究的對(duì)象有蘋果[50-52]、葡萄[53-54]、梨[23][55]、草莓[26][43]、火龍果[27]、獼猴桃[40]、青菜[56]、蕃茄[37][42]、黃瓜[24][37][42][44]、油菜[57-58]、蔥等鱗莖類蔬菜[45]、雪蓮果[31]、糙米[19]和中藥材黃皮[30]、三七[25]、人參[35]等。

肖藝、張志勇等采用固相萃取—毛細(xì)管氣相色譜（SPE—GC）分析方法測定草莓果實(shí)中異菌脲殘留。方法平均添加回收率在88.15%～112.96%之間，標(biāo)準(zhǔn)偏差0.77%～4.54%[26]。2007 年，韓紅新等建立了高效液相色譜分析方法，研究了其在油菜籽中殘留的穩(wěn)定性；以丙酮提取和活性炭凈化為前處理方法，乙腈、水為流動(dòng)相，在215nm 處進(jìn)行定量測定分析，該方法準(zhǔn)確性和重復(fù)性好[49]。劉建平、駱洪等建立了QuEChERS 法提取大蔥等鱗莖類蔬菜中異菌脲，氣相色譜－三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法檢測的分析方法，結(jié)果：在 0.04～10.0μg／mL 范圍內(nèi)，異菌脲質(zhì)量濃度同響應(yīng)值具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.995；檢出限 0.0020～0.0062mg/kg 范圍內(nèi)；平均加標(biāo)回收率在84.2%～104.2%之間[45]。梁林、張愛娟等建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定黃瓜及番茄中異菌脲殘留，異菌脲在黃瓜和番茄基質(zhì)中的線性關(guān)系良好[42]。

筆者通過查閱分析近年來有關(guān)異菌脲在不同物種上的檢測方法的相關(guān)文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)采用氣相色譜法檢測的占多數(shù)，氣相色譜法多采用固相萃取法（（SPE）前處理技術(shù)的較多[23，26-27]，方法準(zhǔn)確性、重復(fù)性都很好而且操作簡單，成本較低。液相色譜法以丙酮提取和活性炭凈化或乙腈提取固相萃?。⊿PE）凈化，均能取得良好的準(zhǔn)確度和精密度，滿足農(nóng)藥殘留測定的要求。隨著串聯(lián)質(zhì)譜法的逐漸普及，2014 年后，異菌脲的檢測方法多以氣相色譜－三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法檢測的分析方法[45]和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的檢測方法[42]為主，該方法多采用QuEChERS 前處理技術(shù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行快速，高通量的檢測，該法具靈敏度高、抗干擾能力強(qiáng)，選擇性強(qiáng)，分析效率高等特點(diǎn)。

3 異菌脲的殘留規(guī)律研究

農(nóng)藥對(duì)人體是有毒害的，如果不科學(xué)、合理使用農(nóng)藥，農(nóng)藥還可通過食物鏈遷移和累積，對(duì)環(huán)境生物乃至人類產(chǎn)生危害。因此，研究農(nóng)藥在農(nóng)作物和環(huán)境中的降解規(guī)律，為制定農(nóng)藥的安全使用標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)的依據(jù)，是一項(xiàng)重要而又緊迫的工作。

近年國內(nèi)關(guān)于異菌脲在蘋果[51]、葡萄[53-54]、梨[52]、楊梅[58]、草莓[26]、青菜[55]、番茄[59]、蔥[61]、油菜[56-57]、三七[25]等農(nóng)作物中殘留動(dòng)態(tài)規(guī)律有過一些報(bào)道。

宋國春、于建壘研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)異菌脲在蘋果和土壤中消解較慢。在蘋果中半衰期為12.91～17.11d，藥后50d 消解90%以上；在土壤的半衰期為9.52~10.95d，藥后30d 消解90%以上。50%異菌脈懸浮劑500～1000 倍液，連噴 3～4 次，藥后 7、14d，收獲期蘋果和土壤中殘留量均未超過l0mg/kg[51]。曹彥衛(wèi)研究了異菌脲在梨和土壤中的降解動(dòng)態(tài)和最終殘留量。結(jié)果表明：異菌脲在梨上的半衰期為12d，施藥后45d 的消解率在 90%以上；藥后 7、14、21d 采集的梨中最高殘留量為0.37mg/kg，未超過我國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定（5mg/kg）的MRL 值，在梨上的安全間隔期為 7d[27]。韓永濤、張艷峰、王會(huì)利研究異菌脲在蔥中的消解符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程，半衰期為12.2~15.8d[60]。肖藝、張志勇等研究異菌脲在不同設(shè)施條件下草莓上的殘留消解方程均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，異菌脲大部分殘留于果實(shí)表面，果內(nèi)殘留遠(yuǎn)低于全果殘留；加倍劑量比推薦劑量殘留量高，降解慢[26]。

筆者綜合分析國內(nèi)關(guān)于異菌脲在不同農(nóng)作物中的殘留動(dòng)態(tài)規(guī)律研究報(bào)道，發(fā)現(xiàn)異菌脲在土壤中的半衰期一般為7.8~12.2d，異菌脲在不同作物中的半衰期為12~28.12d，殘留消解方程均符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程，加倍劑量比推薦劑量殘留量高，降解慢。異菌脲在作物中的殘留不會(huì)對(duì)一般人群健康造成不可接受的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)作物種類和環(huán)境條件（光照、溫度、濕度、土壤）等因素都影響到農(nóng)藥的降解性能。對(duì)于不同理化性質(zhì)的農(nóng)藥，農(nóng)藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定的，其降解速率就慢，在自然條件下就不易分解，半衰期就長；不同的作物種類不同程度的影響到農(nóng)藥在植株上的分布及降解；光照使農(nóng)藥產(chǎn)生的光解是化學(xué)農(nóng)藥在環(huán)境中消失的重要途徑[62-63]；土壤種類、pH 及有機(jī)質(zhì)含量等土壤主要性質(zhì)不同，農(nóng)藥的降解速率就不同，土壤對(duì)農(nóng)藥的吸附主要取決土壤有機(jī)質(zhì)的含量。通常土壤有機(jī)質(zhì)含量高，土壤對(duì)農(nóng)藥的吸附強(qiáng)，農(nóng)藥降解就慢[63-64]；高溫高濕的設(shè)施栽培中農(nóng)藥的降解速度要比露地栽培的快。