譚曉梅，劉昌順，湯慶發(fā)，唐 玲

（南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院/廣東省中藥制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/廣東省中藥制劑技術(shù)工程實(shí)驗(yàn)室 廣州 510515）

中醫(yī)藥是中華民族智慧結(jié)晶，理論體系完整，療效卓越，是世界傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)重要組成部分。中藥及其復(fù)方多成分、多途徑和多靶點(diǎn)對(duì)疾病的治療與其作用特點(diǎn)有關(guān)?；瘜W(xué)成分群是中藥發(fā)揮作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，是傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)藥領(lǐng)域之間最易實(shí)現(xiàn)溝通并達(dá)成共識(shí)的領(lǐng)域。有效成分群的體內(nèi)處置涉及吸收、分布、代謝和排泄（ADME）等過(guò)程，這些過(guò)程會(huì)對(duì)機(jī)體的作用產(chǎn)生不同程度的影響[1]。 “七情和合” 是中藥配伍的理論指導(dǎo)，配伍可以改善藥物性能，或提高療效，或降低毒副作用，以適應(yīng)復(fù)雜多變的病情需要。配伍 “增效減毒” 與功效成分在體內(nèi)過(guò)程的 “量效” 和 “時(shí)效” 相關(guān)[2]。辨證施治，方證相應(yīng)，是中醫(yī)診治疾病的指導(dǎo)思想，機(jī)體靶點(diǎn)在生理和病理狀態(tài)下活性存在差異，病理狀態(tài)下腸道吸收轉(zhuǎn)運(yùn)體、腸肝代謝酶、血漿結(jié)合蛋白等的表達(dá)、活性及功能的改變，均會(huì)影響中藥成分的體內(nèi)處置過(guò)程，可能呈現(xiàn)與生理動(dòng)物模型不同的藥動(dòng)學(xué)行為，從而影響方劑體內(nèi)作用趨向和作用強(qiáng)度[3]，因此，研究有效成分群在相應(yīng)癥候體內(nèi)過(guò)程及變化機(jī)制，可以加深對(duì)中藥復(fù)方內(nèi)涵的認(rèn)識(shí)。

1 中藥復(fù)方配伍及方證相應(yīng)功效成分體內(nèi)過(guò)程研究概述

中藥復(fù)方藥理效應(yīng)的發(fā)揮與功效成分在吸收、分布、代謝和排泄（ADME）不同環(huán)節(jié)的處置相關(guān)，研究配伍和生理及病理狀態(tài)對(duì)功效成分體內(nèi)過(guò)程的影響有助于闡明方劑 “增效減毒” 配伍規(guī)律和 “方證相應(yīng)” 理論科學(xué)內(nèi)涵。

1.1 闡明增效配伍規(guī)律

“增效” 配伍主要以 “相須” 和 “相使” 為主，藥物配伍對(duì)化學(xué)成分ADME的影響包括吸收效率、體內(nèi)靶向、滯留時(shí)程、生物轉(zhuǎn)化和排泄速率等，從而影響藥物體內(nèi)作用[4]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)復(fù)方中藥配伍組方的協(xié)同作用與其配伍后相應(yīng)功效成分生物利用度增加有關(guān)。P-糖蛋白（P-gp）是一種表達(dá)于腸上皮細(xì)胞表面的ATP依賴性轉(zhuǎn)運(yùn)體，主要功能是將腸細(xì)胞異物排出體外，通過(guò)排毒起到對(duì)機(jī)體的保護(hù)作用，是包括藥物分子在內(nèi)的異物進(jìn)入機(jī)體的主要生物屏障。大量研究發(fā)現(xiàn)諸多中藥化學(xué)活性成分是P-gp的底物，吸收過(guò)程受P-gp外排影響，導(dǎo)致其生物利用度較低，藥效作用有限?；赑-gp外排研究方劑配伍前后的腸道吸收差異，本課題組在葛根和天麻配伍研究中，大鼠藥動(dòng)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)相比于單味藥，兩者配伍可以增加6種葛根異黃酮成分的口服吸收，提高天麻效應(yīng)成分天麻苷和天麻苷元的血藥水平，由于這些成分都存在不同程度的腸道外排現(xiàn)象，進(jìn)一步腸道吸收機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，天麻可以通過(guò)抑制P-gp和多藥耐藥相關(guān)蛋白2（MRP2）介導(dǎo)的外排，促進(jìn)葛根異黃酮成分的腸道吸收，該促吸收作用與天麻中天麻苷結(jié)合P-gp蛋白，降低葛根異黃酮成分的外排有關(guān)[5]，提示葛根天麻配伍的協(xié)同增效作用與其效應(yīng)成分腸道吸收增加，口服生物利用度提高相關(guān)。

方劑 “君臣佐使” 組方理論中，引經(jīng)和調(diào)和是佐使藥的重要功效，其作用主要是引導(dǎo)君藥直達(dá)病所，增強(qiáng)療效。牛膝可以補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨，能 “引諸藥下行” ，廣泛用于骨關(guān)節(jié)炎的治療。在三妙丸配伍研究中，配伍牛膝減少了黃柏中小檗堿在心和肺的分布，提高了其在肝、腎的組織暴露；牛膝顯著增加了小檗堿和藥根堿在膝關(guān)節(jié)的藥物濃度，且這種引導(dǎo)藥物在組織 “從上往下” 分布的功效與劑量呈正相關(guān)[6]。引經(jīng)藥冰片 “引藥上行” 的證據(jù)近年來(lái)也被證實(shí)，丹參配伍冰片后，顯著提高了丹參素在腦組織中的含量，降低了其在心臟的組織暴露。冰片 “引藥上行” 的作用機(jī)制推測(cè)與其抑制腦部毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞上的P-gp外排，促進(jìn)藥物入腦有關(guān)[7]。由此可見(jiàn)，方藥配伍的增效機(jī)制涉及改善腸道吸收、提高病灶分布、調(diào)節(jié)血腦屏障促進(jìn)藥物攝取等藥物體內(nèi)過(guò)程的不同環(huán)節(jié)。

1.2 詮釋減毒配伍規(guī)律

“減毒” 組合常見(jiàn)于七情 “相偎” 和 “相殺” 配伍，特別是對(duì)于毒性藥物，配伍可以通過(guò)抑制毒性成分吸收，促進(jìn)有害成分代謝和排泄等方式，降低其體內(nèi)滯留和相應(yīng)毒性效應(yīng)，降低藥物毒副作用。麻黃石膏是臨床經(jīng)典藥對(duì)，石膏之寒能抑制麻黃峻烈，增強(qiáng)其宣肺平喘止咳之功。藥動(dòng)學(xué)研究表明，石膏能縮短麻黃生物堿類效應(yīng)成分的達(dá)峰時(shí)間，提高其體內(nèi)吸收速度，有利于及時(shí)發(fā)揮解熱、平喘等藥理作用，但石膏配伍促進(jìn)麻黃生物堿體內(nèi)消除，減低其表觀分布容積，縮短其半衰期，從而降低其體內(nèi)血藥水平和生物利用度，提示配伍可以避免毒效兩性的麻黃生物堿濃度過(guò)高，維持相對(duì)安全 “治療窗” 的同時(shí)，降低其體內(nèi)蓄積過(guò)量所致毒副作用[8]，揭示麻黃石膏相反合用之中寓有相輔之意的科學(xué)性。方劑配伍制約或減弱藥物毒性還與改變藥物在特定組織的分布有關(guān)。在甘草對(duì)馬錢子解毒的配伍研究中，連續(xù)口服給藥甘草酸溶液7天后，腹腔注射給予中毒劑量馬錢子堿溶液，發(fā)現(xiàn)腦/血AUC比值減少37.6%，并誘導(dǎo)腦部mdr1a mRNA的表達(dá)，提示甘草酸可以誘導(dǎo)P-gp表達(dá)，加速中樞藥物的外排，從而減少腦部藥物分布，降低馬錢子堿的中樞毒性[9]。

代謝是中藥成分體內(nèi)過(guò)程的必經(jīng)途徑，代謝性藥物的相互作用是影響效應(yīng)成分生物轉(zhuǎn)化的重要因素。杏仁作為小毒中藥，服用后其成分苦杏仁苷降解為氫氰酸，會(huì)抑制呼吸中樞引起中毒，配伍麻黃后能抑制急性毒性，主要與其改變苦杏仁苷代謝方式有關(guān)。苦杏仁苷存在D-和L-共兩種構(gòu)型，其中D-苦杏仁苷是杏仁效應(yīng)兼毒性成分。配伍麻黃后在體內(nèi)發(fā)生立體選擇性代謝，使D-苦杏仁苷轉(zhuǎn)化為無(wú)毒的L-苦杏仁苷，從而降低杏仁毒性，揭示麻黃杏仁 “減毒” 配伍合理性[10]。此外，排泄是清除體內(nèi)藥物的主要途徑，方劑減毒配伍可以加速藥物排泄，控制體內(nèi)藥物含量，防止蓄積中毒。膽汁排泄、糞便排泄和尿液排泄是藥物排出體外的主要途徑?；谀懼判沟奈旒和柚饕煞峙湮檠芯恐校羰顾巺擒镙悄芤种凭廃S連生物堿的吸收和膽汁排泄，臣藥白芍可以促進(jìn)黃連成分吸收和膽汁排泄，這既可保證效應(yīng)成分血藥濃度的產(chǎn)生，又能防止其體內(nèi)蓄積[11]，詮釋了戊己丸的配伍主次內(nèi)涵。糞便和尿液排泄是中藥活性成分的主要排泄途徑，在雷公藤配伍甘草的減毒機(jī)制研究中，聯(lián)合用藥促進(jìn)了雷公藤甲素從尿液中排泄，降低了其糞便途徑排泄，最終使雷公藤甲素從尿液和糞便的排泄總量增加一倍，提示促進(jìn)糞尿排泄可能是甘草減輕雷公藤毒性的重要機(jī)制[12]。

綜上所述，方劑減毒配伍機(jī)制涉及ADME各個(gè)環(huán)節(jié)，抑制毒性成分的生物利用度，降低其蓄積分布，抑制其生物轉(zhuǎn)化，促進(jìn)其消除排泄，都有助于方劑配伍的減毒作用。

1.3 揭示方證相應(yīng)理論內(nèi)涵

大量中藥成分吸收差、生物利用度低而主要滯留于腸道，提示腸道是諸多中藥及其復(fù)方作用的關(guān)鍵場(chǎng)所和靶點(diǎn)。藥物在腸道的處置涉及吸收轉(zhuǎn)運(yùn)、黏膜代謝、菌群生物轉(zhuǎn)化等環(huán)節(jié)，但這些處置進(jìn)程會(huì)受腸道病理因素影響而發(fā)生改變[13]。中醫(yī)藥治療神經(jīng)性疾病具有多成分多靶點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)，神經(jīng)系統(tǒng)與胃腸道系統(tǒng)的聯(lián)系（腦-腸軸）被證實(shí)與神經(jīng)性疾病發(fā)病有關(guān)。肉蓯蓉補(bǔ)腎陽(yáng)、益精血，歸腎經(jīng)和大腸經(jīng)，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)其具有良好神經(jīng)保護(hù)和抗抑郁作用。肉蓯蓉主要功效成分苯乙醇苷類主要經(jīng)胃腸道細(xì)菌代謝，降解為羥基酪醇和咖啡酸等更容易被吸收入血的產(chǎn)物，從而提高結(jié)腸血清素表達(dá)，改善腦內(nèi)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子水平，發(fā)揮抗抑郁作用。正常與病理模型大鼠的體內(nèi)過(guò)程差異研究發(fā)現(xiàn)，抑郁引起腸道菌群失調(diào)，代謝能力減弱，導(dǎo)致苯乙醇苷類成分的腸菌代謝產(chǎn)物苯乙醇苷元和咖啡酸衍生物及其相應(yīng)Ⅱ相代謝產(chǎn)物的代謝速率降低，吸收入血后排泄速率下降，提示病理環(huán)境有利于這些成分滯留于體內(nèi)，發(fā)揮對(duì)腸道局部和腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)控作用[14]，說(shuō)明相應(yīng)病理狀態(tài)下方藥成分的腸道處置有利于加速疾病轉(zhuǎn)歸。此外，肉蓯蓉功效成分腸道處置與抗抑郁的聯(lián)系，可能與其歸大腸經(jīng)的藥性理論有關(guān)。金蕎麥清熱解毒，健脾止瀉，用于潰瘍性結(jié)腸炎等疾病治療。組織分布研究發(fā)現(xiàn)金蕎麥提取物主要活性成分兒茶素、表兒茶素、原花青素B1和原花青素B2廣泛分布于血漿、肝、空腸和結(jié)腸組織，且其在結(jié)腸炎模型大鼠體內(nèi)的藥物濃度高于正常組，這些成分在腸道組織的含量顯著高于血漿和肝臟組織，提示金蕎麥活性成分在相應(yīng)病理腸道的高濃度分布，能夠有效保證其藥理效應(yīng)發(fā)揮[15]。

中醫(yī)藥理論提示，藥本為病而設(shè)，有是病則用是藥。由此表明，基于方藥臨床功效理論，以其功效成分體內(nèi)過(guò)程作為載體，是揭示方證相應(yīng)理論內(nèi)涵的重要方法。

2 葛根芩連湯配伍規(guī)律和方證相應(yīng)研究

葛根芩連湯源于《傷寒論》，由葛根、黃芩、黃連和炙甘草組成，解表清里，升清止利，主治傷寒表證未解，邪陷陽(yáng)明所致的協(xié)熱下利證。課題組基于中醫(yī)藥 “理法方藥” 理論，采用現(xiàn)代手段從配伍規(guī)律和方證相應(yīng)進(jìn)行了系列研究，揭示葛根芩連湯治病機(jī)理，研究結(jié)果對(duì)于中藥復(fù)方作用機(jī)理的現(xiàn)代研究具有一定的參考意義。

2.1 配伍對(duì)葛根芩連湯藥效和功效成分體內(nèi)過(guò)程的影響

葛根芩連湯不同配伍對(duì)其藥效學(xué)影響的研究，發(fā)現(xiàn)黃連體內(nèi)外抑菌作用最強(qiáng)，葛根和黃芩組合解熱作用最佳，黃連和炙甘草組合止瀉作用最好，全方治療協(xié)熱下利證效果最優(yōu)[16]。安全性研究表明單味黃連能使G6PD缺陷的痢疾桿菌感染模型大鼠紅細(xì)胞滲透脆性增加，全方配伍能顯著降低紅細(xì)胞滲透脆性[17]，提示方藥配伍的安全性。

葛根芩連湯中主要有異黃酮、黃酮和生物堿類等成分，其中異黃酮解熱止瀉，黃酮抗炎，生物堿抗菌止瀉。在功效成分體內(nèi)外配伍研究中發(fā)現(xiàn)，配伍煎煮出現(xiàn)大量沉淀，沉淀主要為黃芩黃酮和黃連生物堿，這可能與這兩類成分酸堿絡(luò)合形成絡(luò)合物有關(guān)[18]。沉淀中效應(yīng)成分在胃腸道轉(zhuǎn)化處置會(huì)影響其吸收，因此我們研究配伍對(duì)葛根芩連湯主要功效成分體內(nèi)移行過(guò)程的影響，發(fā)現(xiàn)配伍能促進(jìn)葛根中葛根素吸收，提高其達(dá)峰濃度和生物利用度[19]；配伍對(duì)黃芩中黃芩苷吸收影響不大，但可以減慢其消除速率從而提高體內(nèi)滯留時(shí)間[20]；配伍降低黃連中小檗堿血藥水平和生物利用度[21]。進(jìn)一步腸道吸收研究表明，黃連小檗堿吸收窗主要在小腸中上部，以一級(jí)動(dòng)力學(xué)被動(dòng)擴(kuò)散形式吸收[22]。小檗堿與葛根素配伍后，葛根素對(duì)小檗堿腸道吸收無(wú)影響，但小檗堿能濃度依賴性地促進(jìn)葛根素吸收，主要原因是小檗堿和葛根素都是P-gp底物，小檗堿競(jìng)爭(zhēng)性地與P-gp結(jié)合，從而促進(jìn)了葛根素吸收[23]，部分解釋了配伍可以提高葛根素生物利用度。小腸黏膜代謝發(fā)現(xiàn)，黃芩成分黃芩苷和漢黃芩苷能使葛根中大豆苷代謝為大豆苷元的速率提高，染料木苷轉(zhuǎn)化為染料木素的速率增加。苷元類代謝產(chǎn)物抗炎活性更強(qiáng)，更易于吸收，該研究提示葛根和黃芩協(xié)同配伍有助于緩解腸道黏膜炎癥和吸收入血解熱抗炎[24]。對(duì)14種功效成分藥動(dòng)學(xué)研究，葛根芩連湯在血內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間作用的成分主要為黃酮及異黃酮類，發(fā)揮抗炎解熱作用[25]。

整合葛根芩連湯配伍研究，發(fā)現(xiàn)藥效學(xué)結(jié)果和效應(yīng)成分體內(nèi)過(guò)程研究相一致。葛根和黃芩組合解熱作用較強(qiáng)，可能與配伍后其功效成分在體內(nèi)的生物利用度提高、滯留作用時(shí)程延長(zhǎng)和促進(jìn)抗炎活性更強(qiáng)的代謝產(chǎn)物產(chǎn)生有關(guān)。配伍導(dǎo)致黃連的小檗堿的血藥水平降低，推測(cè)由于抑制其吸收而延長(zhǎng)腸道局部滯留，發(fā)揮抑菌止瀉作用；同時(shí)因?yàn)辄S連成分吸收減少而降低了對(duì)紅細(xì)胞滲透脆性的影響，增加了用藥的安全性。通過(guò)以上配伍研究彰顯了全方配伍的優(yōu)越性。

2.2 葛根芩連湯在正常和感染性腹瀉小型豬體內(nèi)過(guò)程的研究

辨證論治，方證相應(yīng)，是中醫(yī)藥診治疾病的基本思想。方證相應(yīng)研究實(shí)踐中，我們提出假設(shè)：方藥在相應(yīng)病證機(jī)體下能最大限度發(fā)揮效應(yīng)。葛根芩連湯對(duì)臨床感染性腹瀉療效突出，我們建立與臨床高度相關(guān)的大腸埃希菌（E.coli）感染哺乳期西藏小型豬腹瀉模型，給藥3天顯著抑制E.coli數(shù)目，緩解腹瀉癥狀，降低血液白細(xì)胞數(shù)量和血清TNF-α和IL-6水平，表明方藥良好藥效作用[26]。為探討方藥效應(yīng)是否與相應(yīng)病理機(jī)體對(duì)功效成分的影響有關(guān)，課題組在正常和病理小型豬體內(nèi)進(jìn)行血漿藥動(dòng)學(xué)差異研究，發(fā)現(xiàn)腹瀉機(jī)體顯著提高解熱抗炎成分葛根素和漢黃芩素的血藥水平和生物利用度[27]，初步揭示方證相應(yīng)的科學(xué)性。腸道處置是影響葛根芩連湯功效成分藥動(dòng)學(xué)行為的重要環(huán)節(jié)，我們探討了生理與病理機(jī)體藥動(dòng)學(xué)差異是否與其成分腸道吸收和代謝改變相關(guān)。腸灌流實(shí)驗(yàn)表明，腹瀉能促進(jìn)葛根素、大豆苷、大豆苷元、黃芩苷和小檗堿的腸道吸收。小腸黏膜代謝發(fā)現(xiàn)腹瀉降低葛根素、大豆苷和甘草苷的代謝速率，提高大豆苷元和漢黃芩素的生物轉(zhuǎn)化速率[28]。以上結(jié)果與藥動(dòng)學(xué)研究一致，即腹瀉腸道延緩解熱抗炎成分生物降解，延長(zhǎng)活性更強(qiáng)代謝產(chǎn)物體內(nèi)作用，促進(jìn)其吸收入血，經(jīng)不同處置環(huán)節(jié)協(xié)同發(fā)揮葛根芩連湯整體藥效。

近年來(lái)發(fā)現(xiàn)腸道菌群失調(diào)是臨床腹瀉診治重要生物標(biāo)志，我們?cè)谀c道吸收和代謝基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究腸道菌群對(duì)葛根芩連湯清里止利的影響。模擬腸內(nèi)厭氧環(huán)境研究腸菌對(duì)葛根芩連湯成分的代謝作用，發(fā)現(xiàn)腹瀉能夠促進(jìn)糖苷類成分轉(zhuǎn)化為苷元，特別是加速腸菌代謝產(chǎn)物黃芩素和大豆苷元的生物轉(zhuǎn)化。這些成分抗炎止瀉活性優(yōu)于糖苷原型成分，提示腹瀉下方中成分的腸菌代謝有利于其效應(yīng)發(fā)揮[29]。葛根芩連湯被腸道菌群作用的同時(shí)，也在調(diào)整腹瀉腸菌結(jié)構(gòu)，恢復(fù)失調(diào)的腸道微生態(tài)。給藥腹瀉小型豬1周內(nèi)，腸道菌群結(jié)構(gòu)逐漸向正常狀態(tài)轉(zhuǎn)歸，最主要發(fā)現(xiàn)葛根芩連湯促進(jìn)產(chǎn)短鏈脂肪酸（SCFAs）細(xì)菌的生長(zhǎng)定植，提高腸內(nèi)SCFAs的含量，有助于通過(guò)抑制HDAC活性和NF-κB信號(hào)通路，改善黏膜炎癥反應(yīng)[30]。以上研究從葛根芩連湯與腸道菌群相互作用的角度，證實(shí)腸道菌群是方藥作用的關(guān)鍵媒介，揭示了其清里止利相關(guān)機(jī)理。

綜上所述，我們從葛根芩連湯藥效、功效成分體內(nèi)過(guò)程和 “藥-菌” 相互作用等研究，初步詮釋了其解表清里功效、方證相應(yīng)的科學(xué)內(nèi)涵。后期在組織分布研究中發(fā)現(xiàn)，口服葛根芩連湯后14種功效成分在腸道組織的分布水平較高[31]，其高濃度富集可能有利于腸道抗炎止瀉作用，這種 “腸道被動(dòng)靶向” 現(xiàn)象在正常和病理腸道的處置機(jī)理是否存在差異？部分功效成分的腸道被動(dòng)靶向?qū)ι镄?yīng)的影響，是否有利于發(fā)揮方證相應(yīng)的 “優(yōu)效” 作用？本課題組擬對(duì)以上問(wèn)題開展研究，進(jìn)一步揭示葛根芩連湯治病內(nèi)涵。

3 中藥復(fù)方功效成分體內(nèi)過(guò)程研究展望

中藥復(fù)方功效成分體內(nèi)過(guò)程研究在許多方面取得了進(jìn)展，但在PK-PD關(guān)聯(lián)、組分代謝和組方配伍的深入研究等方面仍存在諸多問(wèn)題，具體可以在以下幾方面開展研究。

3.1 整合PK-PD的研究

復(fù)方中藥配伍的 “增效減毒” 及方證相應(yīng)的 “優(yōu)效” 作用，與其功效成分體內(nèi)作用過(guò)程相關(guān)，通過(guò)PKPD模型建立藥代動(dòng)力學(xué)與藥效動(dòng)力學(xué)的聯(lián)系，是解析方藥效應(yīng)成分作用過(guò)程的可行方法。但由于中藥復(fù)方成分體系復(fù)雜，適應(yīng)證和生物活性指標(biāo)較多，探索成分體內(nèi)過(guò)程與生物效應(yīng)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，是中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)面臨的技術(shù)問(wèn)題。一個(gè)復(fù)方有多個(gè)藥理作用，可以針對(duì)主要和次要藥理作用的有效成分及其對(duì)應(yīng)的藥理指標(biāo)，在證的模型上，建立多個(gè)PK-PD模型，不僅可以表征中藥 “多成分多靶點(diǎn)” 體內(nèi)過(guò)程，還可以根據(jù)藥代參數(shù)指導(dǎo)臨床不同階段的組方及用藥。中藥中經(jīng)常有一類成分具有共同的藥理活性，如何根據(jù)各成分在藥效中的貢獻(xiàn)，對(duì)其藥代參數(shù)進(jìn)行權(quán)重建立PK-PD模型。基于復(fù)方中藥 “多靶點(diǎn)” 的作用特點(diǎn)，可以針對(duì)不同成分的作用場(chǎng)所和藥效作用，結(jié)合不同組織濃度暴露的PK研究和整體PD作用，建立靶向PKPD模型，綜合表征中藥多組分整體作用。

3.2 中藥腸內(nèi)處置與相關(guān)藥效的研究

中藥化學(xué)成分體內(nèi)暴露是發(fā)揮藥理作用的前提條件，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)很多中藥成分腸道吸收效率低，這種現(xiàn)象對(duì)于治療消化道疾病的方藥是有利的，然而對(duì)于治療阿爾茨海默癥、自閉癥、情緒障礙等神經(jīng)系統(tǒng)疾病[32]，高血糖、高血脂、高血壓等心血管系統(tǒng)疾病[33]的方藥，其良好療效與其低生物利用度的現(xiàn)象相矛盾。近年來(lái)腸道菌群與其他生理系統(tǒng)的聯(lián)系為難吸收成分治療疾病提供了啟示，如有些難吸收成分在腸內(nèi)可以通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)，修復(fù)屏障損傷，減輕黏膜炎癥，改善神經(jīng)遞質(zhì)的產(chǎn)生和傳遞等發(fā)揮作用；有些成分在腸內(nèi)存在生物轉(zhuǎn)化，通過(guò)轉(zhuǎn)化改變?cè)统煞峙c代謝產(chǎn)物的比重，這些變化都與藥效相關(guān)；還有些成分如中藥多糖經(jīng)腸道菌群生物轉(zhuǎn)化為具有免疫調(diào)節(jié)作用的SCFAs等，因此可以更廣泛更深入探討中藥與腸道內(nèi)環(huán)境的相互作用，揭示中藥腸內(nèi)處置與相關(guān)疾病的聯(lián)系，進(jìn)一步闡釋方藥治病內(nèi)涵。中藥配伍也會(huì)影響成分腸內(nèi)處置，特別是代謝環(huán)節(jié)的影響，繼而影響原型成分和代謝產(chǎn)物活性成分對(duì)藥效的整體作用，這也是揭示中藥配伍內(nèi)涵的重要視角。配伍后中藥成分對(duì)腸內(nèi)代謝酶位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，是成分常見(jiàn)的相互作用之一。根據(jù)中藥成分復(fù)雜、涉及代謝途徑較多的特點(diǎn)，可以在計(jì)算機(jī)模擬 “成分-代謝酶” 分子對(duì)接的基礎(chǔ)上，篩選成分競(jìng)爭(zhēng)代謝的蛋白靶點(diǎn)，再進(jìn)行成分競(jìng)爭(zhēng)代謝的體內(nèi)外驗(yàn)證，從分子水平探討配伍對(duì)中藥成分腸內(nèi)代謝的影響。

3.3 研究配伍對(duì)功效成分細(xì)胞藥代動(dòng)力學(xué)的影響

藥理效應(yīng)與藥物在靶細(xì)胞內(nèi)蛋白靶點(diǎn)直接結(jié)合有關(guān)，該過(guò)程涉及靶細(xì)胞對(duì)藥物的 “微觀” 處置。目前至少有1/3的藥物靶點(diǎn)位于細(xì)胞內(nèi)，包括DNA、核受體、各種激酶和代謝酶等，跨細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)是這些藥物進(jìn)入細(xì)胞的前提條件，然而P-gp和MRP等外排轉(zhuǎn)運(yùn)體會(huì)將藥物泵出細(xì)胞，降低細(xì)胞藥物濃度，從而降低藥物敏感性，產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象。此外，靶細(xì)胞外周藥物的分布滯留也會(huì)降低其胞內(nèi)濃度，因此中藥成分在細(xì)胞層面的 “增效減毒” 配伍研究可能是溝通其藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)差異的重要橋梁，如配伍人參皂苷Rh2可以克服細(xì)胞膜和核膜上高表達(dá)P-gp形成的 “雙重屏障” ，促進(jìn)其他藥物進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，發(fā)揮 “增效” 作用[35]。配伍甘草酸后，其代謝產(chǎn)物甘草次酸可促進(jìn)其他藥物在細(xì)胞內(nèi)的靶向分布，降低對(duì)周圍細(xì)胞器的毒性損傷[36]。因此，配伍對(duì)細(xì)胞內(nèi)成分處置過(guò)程以及成分與靶點(diǎn)結(jié)合的影響，是中藥治療效果的決定因素。針對(duì)細(xì)胞內(nèi)作用的靶點(diǎn)成分，研究其細(xì)胞/亞細(xì)胞器內(nèi)的暴露濃度經(jīng)時(shí)過(guò)程比研究血漿藥物濃度可能更具重要意義。在今后工作中，隨著細(xì)胞藥代動(dòng)力技術(shù)體系的建立，將細(xì)胞看作一個(gè)微觀有機(jī)整體，定量研究中藥成分配伍前后在細(xì)胞/亞細(xì)胞內(nèi)的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝動(dòng)力學(xué)過(guò)程[37]，闡明成分在細(xì)胞內(nèi)的處置及相互作用規(guī)律，發(fā)掘中藥成分體內(nèi) “微觀” 過(guò)程的配伍機(jī)制，對(duì)深入研究和探討中藥功效成分在體內(nèi)過(guò)程具有重要意義。

綜上所述，中藥復(fù)方的配伍和方證相應(yīng)，與功效成分在體內(nèi)的處置有關(guān)。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各種技術(shù)手段的引入和使用，有助于更深層次地研究復(fù)方中藥成分的體內(nèi)處置機(jī)制，進(jìn)一步闡述中藥配伍規(guī)律及方證相應(yīng)的科學(xué)內(nèi)涵，同時(shí)為中藥復(fù)方臨床應(yīng)用及現(xiàn)代中藥新藥的研發(fā)提供依據(jù)，進(jìn)一步促進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化。