韓斌 韓宇 崔珊 白崇生*

（1，陜西省榆林市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 719000；2，內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 010000）

口蹄疫（Foot-and-Mouth Disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-Mouth Disease Virus，F(xiàn)MDV）感染引起的一種偶蹄動(dòng)物熱性、急性、高度接觸性的傳染病。易感動(dòng)物達(dá)70 多種，主要侵害偶蹄類動(dòng)物，少見于人。該病以傳染性強(qiáng)、傳播速度快、危害嚴(yán)重而著稱[1]，能引起大面積流行，有時(shí)會(huì)發(fā)生世界性的大流行，這種流行不僅會(huì)造成經(jīng)濟(jì)上的巨大損失，同時(shí)也會(huì)影響動(dòng)物及其相關(guān)制品的進(jìn)出口貿(mào)易和國(guó)際關(guān)系，所以又被稱之為“政治經(jīng)濟(jì)病”[2]。國(guó)際動(dòng)物衛(wèi)生組織（Office International des Epizooties，OIE）故將FMD 列為法定上報(bào)動(dòng)物傳染病之首，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病之首[3]。FMD 在新流行地區(qū)發(fā)病率可達(dá)100%，老疫區(qū)發(fā)病率在50%以上，最有效的預(yù)防方法就是免疫注射[4]。

FMD 在免疫地區(qū)往往不斷呈點(diǎn)狀發(fā)病，為摸清榆林地區(qū)FMD 免疫抗體水平，本研究通過開展詳細(xì)的試驗(yàn)，為制定合理的豬O 型FMD 免疫程序和做好榆林地區(qū)豬O 型FMD 防控工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來源

本試驗(yàn)在榆林地區(qū)隨機(jī)選取6 個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)，其中3 個(gè)規(guī)模場(chǎng)（馬合某豬場(chǎng)、鎮(zhèn)川某豬場(chǎng)、魚河某豬場(chǎng)）的豬在試驗(yàn)開展期間只進(jìn)行了一次口蹄疫O 型滅活疫苗免疫。另外3 個(gè)規(guī)模場(chǎng)（古塔某豬場(chǎng)、青云某豬場(chǎng)、橫山某豬場(chǎng)）的豬在試驗(yàn)期間進(jìn)行了一次免疫后30d 又進(jìn)行了第二次加強(qiáng)免疫。每個(gè)場(chǎng)選取健康豬30 頭進(jìn)行采樣。

1.1.2 試驗(yàn)試劑

豬口蹄疫O 型滅活疫苗(O/Mya 98/XJ/2010 株+O/GX/09—7株)，購(gòu)自金宇保靈生物藥品有限公司，批號(hào)為：20 170702；口蹄疫O 型抗體液相阻斷ELISA 檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自中國(guó)農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號(hào)為：2017112004。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)樣品的采集和處理

本試驗(yàn)共進(jìn)行兩次樣品采集。各組試驗(yàn)豬群首次采血檢測(cè)于一免后21d 進(jìn)行。馬合某豬場(chǎng)、鎮(zhèn)川某豬場(chǎng)和魚河某豬場(chǎng)的試驗(yàn)豬第二次采血于一免后51d 進(jìn)行，古塔某豬場(chǎng)、青云某豬場(chǎng)和橫山某豬場(chǎng)的試驗(yàn)豬第二次采血于二免后21d 進(jìn)行。樣品采集處理方法：將試驗(yàn)豬仰臥或站立保定，于前腔靜脈采集靜脈血5ml，3000r/min 離心分離血清，將分離所得血清置于EP管中并做好標(biāo)記，-20℃保存待檢。

1.2.2 豬O 型FMD 免疫抗體水平的檢測(cè)

嚴(yán)格按照豬口蹄疫O 型液相阻斷ELISA 檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 第一次抗體水平檢測(cè)結(jié)果

由表1 可知，第一次免疫后21d 各規(guī)模場(chǎng)豬群豬口蹄疫O型滅活疫苗免疫抗體合格水平均未達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上，其中免疫抗體合格率最低的古塔某豬場(chǎng)免疫合格率僅為26.7%，免疫抗體合格率最高的為橫山某豬場(chǎng)66.7%。

2.2 第二次抗體水平檢測(cè)結(jié)果

由表2 可知，馬合某豬場(chǎng)、鎮(zhèn)川某豬場(chǎng)和魚河某豬場(chǎng)的試驗(yàn)豬只進(jìn)行了一次口蹄疫O 型滅活疫苗免疫，在一次免疫后51d 進(jìn)行第二次抗體水平檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示抗體水平均低于40%。古塔某豬場(chǎng)、青云某豬場(chǎng)和橫山某豬場(chǎng)的試驗(yàn)豬在第一次免疫后30d 進(jìn)行了第二次加強(qiáng)免疫，二免后21d 抗體水平最低的為76.7%，最高的達(dá)到100%。

2.3 兩次檢測(cè)免疫抗體水平變化趨勢(shì)

由附圖可知，未進(jìn)行二次加強(qiáng)免疫的馬合某豬場(chǎng)、鎮(zhèn)川某豬場(chǎng)和魚河某豬場(chǎng)的試驗(yàn)豬群的口蹄疫O 型滅活疫苗免疫抗體水平從免疫后21d 至免疫后51d 不斷下降，直至40%以下，免疫抗體合格率遠(yuǎn)低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%。一免后30d 進(jìn)行二次加強(qiáng)免疫的古塔某豬場(chǎng)、青云某豬場(chǎng)和橫山某豬場(chǎng)的試驗(yàn)豬二免后21d 免疫抗體水平較一免后21d 明顯增高，并且全部達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上。

表1 豬口蹄疫O 型滅活疫苗第一次免疫后21d 抗體水平

表2 豬口蹄疫O 型滅活疫苗一免后51d 和二免后21d 免疫抗體水平

3 分析討論

當(dāng)前，規(guī)?；涂茖W(xué)化養(yǎng)殖技術(shù)不夠發(fā)達(dá)的豬場(chǎng)偶爾抱有僥幸心理，認(rèn)為FMD 發(fā)生死亡率不高，并且存在免疫后一段時(shí)間豬采食量下降等副反應(yīng)，放松了對(duì)FMD 疫苗免疫的重視程度[5]。仔豬FMD 免疫抗體因受母源抗體水平的影響，首免日齡的確定必須充分考慮母源抗體的消長(zhǎng)變化。在實(shí)際生產(chǎn)中，當(dāng)母源抗體降至不完全保護(hù)水平時(shí)，對(duì)疫苗免疫效果的干擾較小，此時(shí)是接種疫苗的最佳時(shí)機(jī)。有研究表明，仔豬一般在35～40 日齡進(jìn)行FMD 首免較為合理[6]。目前，對(duì)于FMD 的防控，接種疫苗是一種國(guó)內(nèi)外應(yīng)用普遍而且科學(xué)有效的防控措施之一。榆林地區(qū)FMD 防控嚴(yán)格貫徹國(guó)家重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃方案，每年春、秋兩季全面實(shí)施FMD 強(qiáng)制免疫，其中規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)遵循程序化免疫原則，疫控部門指導(dǎo)規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)制定合理的免疫程序。但因不同養(yǎng)殖戶養(yǎng)殖防疫意識(shí)的薄弱和受傳統(tǒng)養(yǎng)殖思維的約束，對(duì)FMD 程序化免疫的科學(xué)開展存在不同差異。夏燕媚[7]研究表明，由于受到母源抗體的干擾，以及免疫程序不合理等原因，經(jīng)常發(fā)生FMD 免疫水平不理想，造成豬的個(gè)體或群體出現(xiàn)免疫空白。

從本試驗(yàn)FMD 免疫抗體檢測(cè)結(jié)果分析來看，榆林地區(qū)6個(gè)采樣豬場(chǎng)第一次免疫后21d 測(cè)得豬O 型FMD 免疫抗體合格率從最低26.7%到最高的僅為66.7%，所有試驗(yàn)豬場(chǎng)O 型FMD免疫抗體合格率水平均處于較低水平，未達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上。其中，35 日齡進(jìn)行首免的馬合某豬場(chǎng)和橫山某豬場(chǎng)免疫抗體水平最高，這與支霄剛[6]等研究結(jié)果一致。而30日齡進(jìn)行過一次FMD 免疫，95 日齡進(jìn)行第二次免疫（試驗(yàn)期間的第一次免疫）的古塔某豬場(chǎng)免疫抗體水平最低，分析原因可能與第一次免疫時(shí)母源抗體的影響，兩次免疫時(shí)間間隔太長(zhǎng)或免疫失敗等因素有關(guān)。綜合分析本試驗(yàn)第一次免疫后21d 抗體檢測(cè)結(jié)果表明，豬口蹄疫O 型滅活疫苗一次免疫后免疫抗體水平并不理想，不能達(dá)到有效的保護(hù)效果。這與謝翠松等[8]多次進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)的研究結(jié)果基本一致。

本試驗(yàn)第二次采樣檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，只進(jìn)行一次口蹄疫O 型滅活疫苗免疫的馬合某豬場(chǎng)、鎮(zhèn)川某豬場(chǎng)和魚河某豬場(chǎng)的豬FMD抗體水平持續(xù)發(fā)生下降。而加強(qiáng)免疫后的古塔某豬場(chǎng)、青云某豬場(chǎng)和橫山某豬場(chǎng)的豬FMD 免疫抗體水平發(fā)生上升，抗體合格率全部達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上，其中橫山某豬場(chǎng)的試驗(yàn)豬抗體合格率竟高達(dá)100%。本試驗(yàn)結(jié)果表明，豬群經(jīng)過一次口蹄疫O 型滅活疫苗免疫不能獲得良好的免疫保護(hù)率，必須加強(qiáng)免疫后才能達(dá)到較高的抗體水平，實(shí)現(xiàn)預(yù)期的免疫保護(hù)率。項(xiàng)朝榮等[9]報(bào)道，仔豬經(jīng)過一次免疫抗體很難達(dá)到完全保護(hù)水平，二免后抗體能達(dá)到完全保護(hù)水平且有效抗體持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致。此外，本試驗(yàn)采樣的6 個(gè)場(chǎng)中，3 個(gè)場(chǎng)的豬在間隔51d 時(shí)間內(nèi)未進(jìn)行二次加強(qiáng)免疫，豬群FMD 抗體水平持續(xù)走低，存在潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)。說明以上豬場(chǎng)存在免疫程序不合理或免疫意識(shí)薄弱等問題。這在一定程度上也反映了當(dāng)前榆林地區(qū)豬FMD 免疫中存在的問題，要想搞好全部FMD 防控工作，最大限度降低FMD 疫情發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，必須進(jìn)一步提高FMD 防控意識(shí)，加強(qiáng)FMD 免疫程序的宣傳和指導(dǎo)。

4 結(jié)論

榆林地區(qū)豬口蹄疫O 型滅活疫苗一次免疫后免疫抗體水平并不理想，免疫抗體合格率不能達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上，不能達(dá)到有效的保護(hù)效果。榆林地區(qū)豬口蹄疫O 型滅活疫苗經(jīng)一次免疫后抗體水平較低，如不進(jìn)行加強(qiáng)免疫，抗體將持續(xù)下降；一免30d 后進(jìn)行加強(qiáng)免疫能有效提高免疫抗體水平，免疫抗體合格率達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上，實(shí)現(xiàn)了理想的免疫保護(hù)效果。