范陳偉 姜曉東 吳旭干,3 成永旭,3

(1 上海海洋大學(xué)，水產(chǎn)科學(xué)國家級實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，上海 201306;2 上海海洋大學(xué)，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海201306；3 上海海洋大學(xué)，水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種中心上海市協(xié)同創(chuàng)新中心，上海 201306)

中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)俗稱河蟹、大閘蟹，是我國重要的養(yǎng)殖水產(chǎn)品之一，具有很高的經(jīng)濟(jì)和食用價(jià)值[1]。河蟹養(yǎng)殖一般分3個(gè)階段，分別是蟹苗培育階段(初孵幼體至大眼幼體)、扣蟹養(yǎng)殖階段(大眼幼體至扣蟹)和成蟹養(yǎng)殖階段(扣蟹至成蟹)[2]。我國在扣蟹養(yǎng)殖發(fā)展初期，主要從自然水域捕撈野生蟹苗進(jìn)行養(yǎng)殖。由于環(huán)境污染和過度捕撈，蟹苗自然資源迅速下降，已難以滿足不斷增長的市場需求[3]。20世紀(jì)80年代初，我國攻克河蟹蟹苗人工繁育的關(guān)鍵技術(shù)難題，實(shí)現(xiàn)了蟹苗的批量生產(chǎn)，打破了完全依賴用野生苗種進(jìn)行扣蟹養(yǎng)殖的局面，為我國扣蟹養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展奠定了基礎(chǔ)[4]。20世紀(jì)末以來，隨著河蟹育苗逐漸由工廠化向土池生態(tài)化發(fā)展，我國扣蟹養(yǎng)殖規(guī)模逐年擴(kuò)大，扣蟹產(chǎn)量從1998年的1.75萬t增加至2018年的6.2萬t，并表現(xiàn)出進(jìn)一步增長的趨勢[5]。

隨著河蟹土池育苗技術(shù)和扣蟹養(yǎng)殖技術(shù)的日趨完善，扣蟹產(chǎn)量逐年增加，扣蟹價(jià)格也隨之迅速下降，這使得扣蟹養(yǎng)殖業(yè)逐漸處于薄利競爭的狀態(tài)。為了降低扣蟹養(yǎng)殖成本，部分養(yǎng)殖戶使用小規(guī)格親本所產(chǎn)蟹苗進(jìn)行扣蟹養(yǎng)殖。小規(guī)格親本所產(chǎn)的子代養(yǎng)殖性狀低劣，混入市場后易導(dǎo)致河蟹種質(zhì)資源退化，因此扣蟹售價(jià)也往往較低[6]。與之相反，雖然大規(guī)格親本所產(chǎn)子代生長優(yōu)勢明顯且扣蟹售價(jià)較高，但大規(guī)格親本收購成本較高，且大規(guī)格抱卵蟹有著越冬成活率低和抱卵率不穩(wěn)定等缺陷，導(dǎo)致蟹苗售價(jià)偏高，增加了扣蟹養(yǎng)殖成本[7]。出于對扣蟹養(yǎng)殖成本及最終收益的考慮，目前扣蟹養(yǎng)殖所用的親本規(guī)格范圍較廣，如何挑選規(guī)格合適的親本所產(chǎn)大眼幼體用于扣蟹養(yǎng)殖，成為養(yǎng)殖戶關(guān)注的問題。本試驗(yàn)以不同規(guī)格河蟹親本所產(chǎn)子一代為研究對象，探索親本規(guī)格對其后代在扣蟹階段養(yǎng)殖性能的影響，以期為扣蟹養(yǎng)殖過程中親本規(guī)格的選擇提供理論參考。

表1 不同規(guī)格河蟹親本的平均體質(zhì)量

1 材料和方法

1.1 大眼幼體來源

河蟹親本于2017年11月采自常州市金壇水產(chǎn)站河蟹養(yǎng)殖基地，均為2齡長江水系池塘養(yǎng)殖河蟹成體，雌蟹體質(zhì)量為90～210 g，公蟹體質(zhì)量為140～310 g，選擇肢體健全、健康有活力的個(gè)體用于試驗(yàn)。親本活體運(yùn)輸至上海海洋大學(xué)如東河蟹遺傳育種中心后，根據(jù)其體質(zhì)量分為4個(gè)規(guī)格等級(規(guī)格I：雌90～110 g、雄140～160 g；規(guī)格Ⅱ：雌115～135 g、雄160～180 g；規(guī)格Ⅲ：雌140～160 g、雄220～240 g；規(guī)格Ⅳ：雌190～210 g、雄290～310 g)進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。每組均挑選60只雌體和30只雄體，將各規(guī)格親本分別放入4口條件相似的試驗(yàn)池塘(長×寬×深為14 m×11 m×2 m)中，池內(nèi)海水鹽度為18左右，池四周設(shè)有防逃圍網(wǎng)。親本入池2 d后開始投喂冰鮮帶魚，日投喂量為親本體質(zhì)量的2%～5%，具體根據(jù)殘餌和水溫情況靈活調(diào)整。4種規(guī)格親本的平均體質(zhì)量見表1。

2018年1月中旬排干池水，剔除交配池內(nèi)的所有雄蟹，同時(shí)檢查雌蟹的抱卵情況，各組雌蟹的抱卵率均超過了90%。隨后在相同的室外條件下開展親本越冬、掛籠和幼體培育等工作。2018年5月上旬將淡化之后的大眼幼體運(yùn)送至上海海洋大學(xué)崇明豎新基地，用于進(jìn)一步的扣蟹養(yǎng)殖試驗(yàn)。

1.2 養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)設(shè)置16個(gè)面積相等的圍隔(7.8 m×7.8 m)作為養(yǎng)殖池塘，圍隔四周設(shè)有雙層防逃網(wǎng)，防逃網(wǎng)上緣設(shè)置25 cm高的PE塑料防逃圍板。為保持試驗(yàn)組水質(zhì)一致，圍隔之間水體相互連通。每個(gè)圍隔中間有1個(gè)長×寬×深為6 m×4 m×0.7 m的水坑，水坑四周的平臺上種植水稻以凈化水質(zhì)。為了便于采樣和回捕扣蟹，在水坑中用毛竹架設(shè)1個(gè)長×寬×高為2 m×2 m×1 m的網(wǎng)箱，網(wǎng)片孔徑為0.425 mm，網(wǎng)箱內(nèi)外縫有30 cm高的防逃塑料板。每個(gè)網(wǎng)箱中放入約1 500只大眼幼體，每個(gè)規(guī)格組設(shè)4個(gè)平行網(wǎng)箱，網(wǎng)箱內(nèi)放置伊樂藻供幼蟹隱蔽和蛻殼。日投喂破碎料量為1～5 g，根據(jù)氣候、水溫和攝食情況進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。

河蟹在大眼幼體以及豆蟹階段蛻殼頻率高、成活率不穩(wěn)定。為避免各網(wǎng)箱之間成活率差距懸殊，影響最終生長性能的比較，6月中旬將每個(gè)網(wǎng)箱內(nèi)豆蟹的數(shù)量調(diào)整為400只(雌、雄各半)，并將網(wǎng)箱內(nèi)的伊樂藻替換為水花生，繼續(xù)進(jìn)行豆蟹至扣蟹階段的養(yǎng)殖。每天17:00投喂配合飼料，投飼量為幼蟹總體質(zhì)量的1%～6%。網(wǎng)箱中設(shè)有小型食臺，每次投喂4 h后，觀察并記錄飼料殘留情況，據(jù)此調(diào)整次日的投飼量。定期清理水花生，使其密度適中，防止其瘋長造成扣蟹缺氧和水質(zhì)惡化。每隔20 d左右用聚維酮碘對養(yǎng)殖網(wǎng)箱消毒，每隔3～4 d換水1次，以保證水質(zhì)符合扣蟹生長要求。

1.3 數(shù)據(jù)采集

1.3.1 幼蟹生長性能

調(diào)整密度時(shí)統(tǒng)計(jì)每個(gè)網(wǎng)箱內(nèi)豆蟹的數(shù)量，并稱量，據(jù)此計(jì)算大眼幼體至豆蟹階段的成活率、增重率(weight gain rate,WGR)和特定生長率(specific growth rate,SGR)。調(diào)整密度后，每月20日用抄網(wǎng)從每個(gè)網(wǎng)箱中各采樣200只豆蟹，雌、雄各半，用干毛巾輕輕擦拭蟹體表水分后，采用電子天平精確稱量(精確到0.01 g)，準(zhǔn)確記錄每只扣蟹的性別和體質(zhì)量，據(jù)此計(jì)算每個(gè)月的WGR和SGR，計(jì)算公式如下。

增重率(WGR，%)=100×(W2-W1)/W1

(1)

特定生長率(SGR，%/d)=100×(lnW2-lnW1)/(t2-t1)

(2)

式(1)～(2)中:W1和W2分別為日齡t1和t2時(shí)各組蟹的平均體質(zhì)量(g)。

1.3.2 幼蟹的成活率、早熟率、平均體質(zhì)量、產(chǎn)量和規(guī)格分布

養(yǎng)殖試驗(yàn)于11月20日結(jié)束。隨后將網(wǎng)箱內(nèi)的扣蟹全部撈出，分別統(tǒng)計(jì)每個(gè)網(wǎng)箱中雌、雄蟹的存活數(shù)量，并根據(jù)張列士等[8]的方法判別扣蟹是否性成熟，據(jù)此計(jì)算成活率和1齡性早熟率。根據(jù)每個(gè)網(wǎng)箱中統(tǒng)計(jì)的正?？坌泛?齡性早熟扣蟹的總體質(zhì)量和數(shù)量，分別計(jì)算雌、雄扣蟹和早熟蟹的平均體質(zhì)量，并據(jù)此計(jì)算每組正?？坌?、早熟蟹的產(chǎn)量以及總產(chǎn)量。對捕獲的所有正?？坌钒大w質(zhì)量進(jìn)行規(guī)格劃分，雌、雄各分為4個(gè)等級：0～1.99 g、2.00～3.99 g、4.00～5.99 g、≥6.00 g，分別統(tǒng)計(jì)4組扣蟹各規(guī)格等級所占的比例。

表2 不同規(guī)格親本的子一代在大眼幼體至豆蟹階段的養(yǎng)殖性能

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 26.0軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。采用Levene法對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，當(dāng)不滿足齊性方差時(shí)對百分比數(shù)據(jù)進(jìn)行反正弦或平方根處理。采用ANOVA法對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，取P<0.05為差異顯著。用EXCEL和GraphPad Prism軟件繪制相關(guān)圖表。

2 結(jié)果

2.1 生長情況

不同規(guī)格親本子一代在大眼幼體至豆蟹階段的養(yǎng)殖性能見表2。從表2中可以看出，各組豆蟹的平均體質(zhì)量無明顯差異，均在0.43 g左右。4組豆蟹的成活率和增重倍數(shù)同樣無顯著性差異(P>0.05)。

圖1為不同規(guī)格親本子一代在扣蟹階段的體質(zhì)量變化情況。無論是雌體還是雄體，各組扣蟹在8—11月的生長速度差異大體上與其親本的規(guī)格差異相一致，即大規(guī)格親本子一代的生長速度明顯快于小規(guī)格親本子一代。就雌體而言，Ⅰ組幼蟹在8—10月期間的平均體質(zhì)量顯著低于Ⅳ組幼蟹(P<0.05)，Ⅱ組和Ⅲ組幼蟹的體質(zhì)量相近，均介于Ⅰ組和Ⅳ組幼蟹之間(P>0.05)。就雄體而言，Ⅳ組幼蟹在9—11月的平均體質(zhì)量均顯著高于另外3組(P<0.05)，而在8月時(shí)僅顯著高于Ⅰ、Ⅱ兩組(P<0.05)。

扣蟹養(yǎng)殖期間增重率(WGR)的變化情況如圖2所示。隨著養(yǎng)殖時(shí)長的增加，各組幼蟹雌、雄個(gè)體的WGR均呈下降趨勢。就雌體而言，Ⅳ組幼蟹在7—8月的WGR顯著高于Ⅰ組和Ⅲ組，而在10—11月的WGR顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)。就雄體而言，Ⅳ組扣蟹在7—8月的WGR顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，其余各時(shí)間段內(nèi)各組WGR無顯著差異。各組幼蟹特定生長率(SGR)的變化趨勢以及差異性與增重率(WGR)相似(見圖3)。

2.2 成活率、早熟率、產(chǎn)量和規(guī)格分布

不同規(guī)格親本子一代在扣蟹養(yǎng)殖階段的養(yǎng)殖效果差異見表3。就平均體質(zhì)量而言，各組扣蟹最終平均體質(zhì)量均隨著親本規(guī)格的增加而增加，其中Ⅳ組扣蟹雄體的平均體質(zhì)量顯著高于其他3組(P<0.05)，并且Ⅳ組扣蟹整體的最終平均體質(zhì)量顯著高于Ⅰ組扣蟹(P<0.05)。各組扣蟹最終產(chǎn)量的差異情況與平均體質(zhì)量相一致，同樣是隨著親本規(guī)格的增加而增加，但各組間無顯著差異(P>0.05)。各組扣蟹最終的成活率差異較小，各組間無顯著性差異。各組扣蟹中均未發(fā)現(xiàn)1齡性早熟個(gè)體。

各組養(yǎng)成扣蟹規(guī)格分布情況見圖4。4組扣蟹的體質(zhì)量主要集中在2.00～3.99 g和4.00～5.99 g的規(guī)格區(qū)間，雌體中這2種規(guī)格分別占各組扣蟹總數(shù)的83.22%、83.17%、83.26%和71.63%，雄體中這2種規(guī)格分別占各組扣蟹總數(shù)的84.90%、85.72%、85.06%和64.06%。無論雌體還是雄體，Ⅰ組扣蟹0～1.99 g規(guī)格所占的比例顯著高于Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.05)，此外，Ⅳ組扣蟹2.00～3.99 g規(guī)格所占的比例顯著低于另外3組(P<0.05)，而該組≥6.00 g規(guī)格所占的比例顯著高于另外3組(P<0.05)。

表3 不同規(guī)格親本子一代扣蟹的平均體質(zhì)量、成活率和最終產(chǎn)量差異

3 討論

3.1 生長性能差異

河蟹在扣蟹階段的生長性能是河蟹養(yǎng)殖中極為重要的經(jīng)濟(jì)性狀，是衡量河蟹苗種質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)，關(guān)乎蟹種培育階段的經(jīng)濟(jì)效益和成蟹階段的進(jìn)一步養(yǎng)殖[9-10]。本研究以來自同一養(yǎng)殖群體的不同規(guī)格中華絨螯蟹作為親本繁育大眼幼體，并將其在相同條件下飼養(yǎng)至扣蟹，通過比較各組蟹苗在扣蟹養(yǎng)殖階段的體質(zhì)量、增重率、特定生長率、成活率以及最終產(chǎn)量的差異情況，探討中華絨螯蟹親本規(guī)格對其子代生長性能的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，各組幼蟹在相同養(yǎng)殖環(huán)境和管理?xiàng)l件下的生長性能存在一定差異，具體表現(xiàn)為大規(guī)格親本后代的生長速度明顯快于小規(guī)格親本的，親本規(guī)格與其子一代在扣蟹階段的生長性能呈一定的正相關(guān)關(guān)系。

本試驗(yàn)中，不同規(guī)格親本子代的生長性能存在差異可能是由于河蟹體質(zhì)量、大小和增重率等與生長相關(guān)的經(jīng)濟(jì)性狀均擁有較高的遺傳力，其表型性狀受環(huán)境因素的影響較小，因而在后代的生長性狀上得以體現(xiàn)[11-12]。這說明對大規(guī)格河蟹親本群體的連續(xù)多代選育可能有利于生長性能的變異逐步積累，并能夠穩(wěn)定遺傳下去，進(jìn)而達(dá)到改良中華絨螯蟹生長性狀的目的，因此，通過選擇育種提升甲殼動(dòng)物的生長性能潛力較大[13-14]。

3.2 養(yǎng)殖效果差異

本試驗(yàn)中Ⅳ組扣蟹的最終產(chǎn)量稍高于Ⅰ組扣蟹，結(jié)合優(yōu)質(zhì)蟹種售價(jià)較高的特點(diǎn)，足以證明大規(guī)格親本后代的經(jīng)濟(jì)效益優(yōu)勢[15]。雖然Ⅳ組扣蟹的平均規(guī)格較大，最終產(chǎn)量較高，但成活率相對較低。研究發(fā)現(xiàn)，蛻殼期間受到同類干擾以及蛻殼后同類相殘是扣蟹養(yǎng)殖階段死亡率高的原因之一，在一定的養(yǎng)殖空間中，平均規(guī)格較大的群體往往成活率較低[16-17]。由此可見，本試驗(yàn)中Ⅳ組扣蟹的整體成活率較低可能與其平均規(guī)格較大和產(chǎn)量較高有關(guān)。本試驗(yàn)4組扣蟹中均沒有觀察到1齡性早熟個(gè)體，而2017年在相同網(wǎng)箱中養(yǎng)殖的扣蟹，其1齡早熟率為2%～4%[18]，這可能是由于2018年7—8月陰雨天較多，水溫較低，扣蟹養(yǎng)殖期間積溫較低，因此扣蟹1齡早熟率也較低。

綜上，通過對中華絨螯蟹不同規(guī)格親本子一代在扣蟹階段養(yǎng)殖性狀的比較分析，發(fā)現(xiàn)中華絨螯蟹親本規(guī)格對其子代養(yǎng)殖性能有一定影響，大規(guī)格親本所產(chǎn)子一代在扣蟹階段的生長速度和養(yǎng)殖效果均好于小規(guī)格親本，因此建議在生產(chǎn)上選擇大規(guī)格親本的后代用于扣蟹養(yǎng)殖。