何紹港, 張啟月, 馬明陽, 張左嬌, 何玉華*, 張克勤
(1.吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動物科技學(xué)院,吉林左家 132109;2.吉林省白城市通榆縣包拉溫都保護(hù)局,吉林通榆 137200)
烏腺金絲桃屬于山茶目、藤黃科的中藥材,其在我國內(nèi)蒙古、黑龍江、吉林、河北,以及周邊國家均有分布。烏腺金絲桃含有大量的金絲桃素等11種生物活性成分(趙劍,2012),對各種出血有較好的療效,還能治療類風(fēng)濕等引起的各種疼痛,另外,還具有降低類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠血清中NO及VEGF表達(dá),促進(jìn)人肺癌A549細(xì)胞凋亡,抗抑郁等功效(王呈祥,2017)。
無抗飼料和生物飼料是養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的方向,飼料的安全關(guān)系到食品的安全,開發(fā)中草藥飼料添加劑,將中醫(yī)和中草藥融入到畜牧產(chǎn)業(yè)中是提高畜產(chǎn)品品質(zhì)的有效途徑。烏腺金絲桃是吉林左家自然保護(hù)區(qū)的代表性中草藥,開發(fā)左家地區(qū)區(qū)域特色飼料添加劑將會有廣闊的發(fā)展空間。本試驗(yàn)將烏腺金絲桃的水提液供小鼠飲用,研究其對小鼠的采食、增重、內(nèi)臟器官發(fā)育的影響,探討烏腺金絲桃在小鼠上應(yīng)用的效果,為烏腺金絲桃在飼料添加劑產(chǎn)品上的開發(fā)奠定基礎(chǔ),為烏腺金絲桃的藥用功能提供更加精準(zhǔn)的數(shù)據(jù)支持。
1.1 試驗(yàn)材料 烏腺金絲桃全株,由吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院中藥學(xué)院提供。
1.2 試驗(yàn)動物及飼養(yǎng)管理 選擇60只生長發(fā)育良好、體重為27~31 g的清潔級昆明小鼠,公母各半,購買于山東昊泰實(shí)驗(yàn)動物繁育有限公司,飼養(yǎng)小鼠的地點(diǎn)為左家校區(qū)動物科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)室,飼養(yǎng)室的溫度為20℃左右,濕度為30%~45%,24 h 采食和飲水(楊明建,2017)。
1.3 試驗(yàn)儀器 電磁爐 (C21-WH2105,美的集團(tuán))、電子分析天平(JY3002,上海贊維衡器有限公司)、懸掛式小鼠籠(HL-XG,合力科創(chuàng))、小鼠籠架(HL-XG,合力科創(chuàng))、小鼠用耳標(biāo)、耳號鉗(ST101,美國CLARKBIO)、手術(shù)剪(9.5 cm直頭,上海紅尊醫(yī)療器械有限公司)、手術(shù)刀等實(shí)驗(yàn)室常用器械。
1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將60只小鼠隨機(jī)的分成2組,即正常組和烏腺金絲桃組,每組30只,公母分別為15只,正常組飲用自來水,烏腺金絲桃組飲用烏腺金絲桃水提液。每次將250 g烏腺金絲桃用電磁爐燒水煮沸3 h,然后定容到1 L,喂給烏腺金絲桃組小鼠飲用。飼養(yǎng)時(shí)間33 d,前5 d為預(yù)飼期,后28 d為正式期,小鼠日糧組成和營養(yǎng)水平見表1。
表1 小鼠日糧組成和營養(yǎng)水平
1.5 測定指標(biāo)及方法
1.5.1 生長性能 以試驗(yàn)開始的第1天早上8:00小鼠的體重作為初始體重,以后每周稱量1次,試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早上8:00對小鼠進(jìn)行最后1次體重的稱量。每天早晨8:00飼喂前稱量飼喂的飼料量和前一天剩余的飼料量,根據(jù)采食量和試驗(yàn)天數(shù)計(jì)算平均日采食量(姚康,2005)。
平均日增重/(g/d)=(試驗(yàn)?zāi)w重-試驗(yàn)初體重)/試驗(yàn)天數(shù);
平均日采食量/(g/d)=試驗(yàn)期采食量/試驗(yàn)天數(shù);
料重比=平均日采食量/平均日增重。
1.5.2 器官指數(shù) 試驗(yàn)結(jié)束的最后一天早上8:00用2把鑷子分別夾住小鼠的尾根和頭部,然后用力拉伸,使小鼠的頸椎脫臼而死,然后馬上用手術(shù)剪剪開小鼠的腹部,并摘取小鼠的心臟、肝臟、腎臟、脾臟之后,剔除其上面的締組織及脂肪組織后稱量重量,分別計(jì)算各個(gè)器官的指數(shù) (周夢宇,2018;張乃珣,2017;張乃珣,2016) 。
器官指數(shù)/(mg/g)=器官重/體重。
1.6 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)所得結(jié)果用 “平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,數(shù)據(jù)的分析用 Excel和SPSS 19.0軟件進(jìn)行,用P<0.05表示差異顯著。
2.1 烏腺金絲桃對小鼠生長性能的影響 從表2可知,小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后,小鼠的末重略有升高,平均日增重呈降低的趨勢,平均日采食量也稍有降低,但烏腺金絲桃組和正常組相比無顯著差異 (P>0.05);烏腺金絲桃組的料重比有降低的趨勢,但與正常組相比未達(dá)到差異顯著水平(P>0.05)。
表2 烏腺金絲桃對小鼠生長性能的影響
2.2 烏腺金絲桃對小鼠器官指數(shù)的影響 從表3可知,小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后,烏腺金絲桃組心臟指數(shù)呈上升趨勢,與正常組相比未達(dá)到差異顯著水平(P>0.05);肝臟指數(shù)較正常組降低8.86%,差異顯著(P<0.05);脾臟指數(shù)稍有降低,與正常組相比無顯著差異 (P>0.05);腎臟指數(shù)呈上升的趨勢,較正常組增加26.54%,差異顯著(P<0.05)。
表3 烏腺金絲桃對小鼠器官指數(shù)的影響mg/g
3.1 烏腺金絲桃對小鼠生長性能的影響 本試驗(yàn)中小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后,末重、平均日增重、平均日采食量烏腺金絲桃組和正常組相比無顯著差異(P>0.05);烏腺金絲桃組料重比有降低的趨勢,但與正常組相比無顯著差異 (P>0.05)。料重比值越小,生產(chǎn)水平越高;料重比值越大,生產(chǎn)水平越差。可能是烏腺金絲桃中所含的烏腺金絲桃素、黃酮類物質(zhì)能夠?qū)δ撤N有害生物產(chǎn)生一定的抵抗作用和抗應(yīng)激作用,促進(jìn)了小鼠的生長(張翠月,2011)。
3.2 烏腺金絲桃對小鼠器官指數(shù)的影響 烏腺金絲桃性平、味苦,歸心經(jīng),對心臟有著良好的作用。用氯化鈣、氯仿制作心律失常的小鼠模型,然后用烏腺金絲桃提取物進(jìn)行治療,發(fā)現(xiàn)其對心律失常具有較好的保護(hù)作用,對于造模小鼠的心肌缺血癥狀的試驗(yàn)中,所得到的結(jié)果與民間療法的效果一致;除此之外還進(jìn)行了對心肌缺血之后對缺氧抵抗情況的研究,結(jié)果表明其能夠延長耐受時(shí)間,使血清中反映心臟功能的乳酸脫氫酶、肌酸激酶的含量降低,降低了對心臟的損害,提升心肌組織中的超氧化物歧化酶的活性,使脂質(zhì)過氧化物丙二醛的含量下降(李冀,2009;滕林,2008)。本試驗(yàn)中烏腺金絲桃水提液使小鼠的心臟指數(shù)增加,但差異不顯著(P>0.05),心臟指數(shù)升高可能是飲用烏腺金絲桃提取物使心臟增生或肥大。
肝臟具有解毒的功能,動物體產(chǎn)生的有毒物質(zhì)、代謝產(chǎn)物、飼料中的有毒成分等需要通過肝臟來分解。趙桂英(2015)用烏腺金絲桃粉給小鼠灌胃,劑量最高為45000 mg/kg,肝臟指數(shù)未發(fā)生顯著變化。本試驗(yàn)得到了與之相反的結(jié)論,小鼠飲用烏腺金絲桃水提液后肝臟指數(shù)降低,與正常組相比差異顯著(P<0.05),這可能是由于肝臟發(fā)生纖維性病變等因素影響了其生長發(fā)育,也可能是由于本試驗(yàn)所用烏腺金絲桃水提液的有效劑量較大,且飲水時(shí)間較長,本試驗(yàn)中脾臟指數(shù)也降低,但差異不顯著,脾指數(shù)下降會導(dǎo)致免疫力下降,脾指數(shù)下降可能由于脾臟萎縮或增長抑制等造成的,說明長期大劑量的服用烏腺金絲桃對肝臟、脾臟均會有一定損傷,但是對肝臟的損傷大于對脾臟的損傷。
關(guān)于烏腺金絲桃對腎臟發(fā)育的影響鮮見相關(guān)報(bào)道,本試驗(yàn)中,烏腺金絲桃水提液使小鼠的腎臟指數(shù)增加,與正常組相比差異顯著(P<0.05),可能存在某種成分影響了腎臟的生長發(fā)育(欒家杰,2012)。本試驗(yàn)把烏腺金絲桃加在小鼠的飲用水中,如果按照不同的水平添加到小鼠的日糧中是否會對腎臟產(chǎn)生影響有待進(jìn)一步的研究。
通過本研究得出烏腺金絲桃有益腎、強(qiáng)心的作用,但長期飼喂能夠降低肝臟指數(shù),但其作用的機(jī)理還需進(jìn)一步的研究。