張 軍

（法國詩華動物保健公司，北京 朝陽 100102）

豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus, PCV）屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，PCV無囊膜，是閉環(huán)單股DNA病毒，是世界上最小的動物病毒之一。自發(fā)現(xiàn)豬圓環(huán)病毒以來，人們一直關(guān)注該病對豬群的感染，盡可能地降低其對豬群的危害。

1 豬圓環(huán)病毒的類型

迄今已發(fā)現(xiàn)4種豬圓環(huán)病毒，PCV1（圓環(huán)病毒1型）最早發(fā)現(xiàn)于1974年，對豬沒有致病性。關(guān)于PCV2（圓環(huán)病毒2型）的研究最多，也是對豬群健康有明確危害的疾病。2016年美國首次發(fā)現(xiàn)PCV3（圓環(huán)病毒3型）后，世界上包括日本、韓國、瑞典、俄羅斯、泰國、巴西、丹麥、意大利和西班牙等國均報道檢出了該病毒。我國從2017年至今，有關(guān)PCV3的檢測和研究十分熱門，各地區(qū)的陽性檢出率居高不下[1]。PCV3與前兩種類型病毒基因同源性僅有31%～48%，傳統(tǒng)的PCV2疫苗幾乎不能提供交叉保護。除了家豬以外，PCV3還能在野豬、狗、奶牛、老鼠上檢出陽性，具有跨物種傳播或感染的可能性。健康豬和有臨床癥狀的豬都能檢測到PCV3，目前實驗室還無法分離病毒并復(fù)制出臨床癥狀，有關(guān)該病毒的致病性還有爭議，雖然有人認為PCV3與母豬繁殖障礙、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）和組織器官炎癥反應(yīng)有關(guān)[2]。2019年4月，我國學(xué)者在湖南省幾頭嚴重臨床患病豬只（有呼吸道、腸道和皮炎腎病綜合征癥狀）中檢測到新的圓環(huán)病毒類型，暫時命名為豬圓環(huán)病毒4型（PCV4），與水貂圓環(huán)病毒基因組最接近（66.9%）[3]，相關(guān)研究還處于起步階段。豬圓環(huán)病毒的發(fā)現(xiàn)歷史見圖1。

2 PCV2的感染貫穿豬的一生

豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）在環(huán)境中穩(wěn)定性強，目前我們采用的諸多殺滅非洲豬瘟病毒的方法不能將其滅活，病毒在56 ℃下持續(xù)存在1小時或75 ℃下存在15分鐘仍具有感染性[4]。PCV2的感染遍布全球養(yǎng)豬業(yè)，目前幾乎不可能實現(xiàn)凈化。

PCV2感染可導(dǎo)致母豬帶毒或公豬精液帶毒，從受精卵大約第4～5天透明帶破裂，病毒即可感染胚胎，直至懷孕30天，PCV2對胚胎的所有細胞都敏感，可造成胚胎死亡，如果殺死所有胚胎，母豬表現(xiàn)返情。由于PCV2傳播較慢，可能只是部分胚胎死亡，結(jié)果是母豬產(chǎn)仔數(shù)減少，這可以通過有效的PCV2種豬疫苗免疫得到明顯的改善。懷孕30～70天感染，PCV2對心細胞和肝細胞敏感，造成胎兒死亡而流產(chǎn)，死亡胎兒心肌肥大和壞死。懷孕70～114天感染，巨噬細胞是敏感細胞，感染胎兒生長變慢，造成所產(chǎn)仔豬均勻度變差（體重低的0.8千克，體重高的2千克）。仔豬出生后早期階段（6周齡前）感染，PCV2主要感染巨噬細胞和樹突樣細胞，引起免疫抑制，繼而發(fā)生系統(tǒng)性疾病，即PCV-SD（舊稱斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征，PMWS）。如果感染發(fā)生在中大豬，PCV2主要感染組織器官的上皮細胞和實質(zhì)細胞，引起肥育期肺部疾?。≒CV-LD）和腸道疾病（PCV-ED）[5]。損失最大的是亞臨床感染，肉眼看不到損失，但豬群生長緩慢，日增重降低，料重比升高，以及并發(fā)其他疾病，導(dǎo)致死亡率增加。后備母豬對PCV2亦為敏感，可造成配種失敗、產(chǎn)仔數(shù)減少和使用壽命縮短等（圖2）。

3 我國豬場當(dāng)前PCV2的感染特點

如上所述，豬圓環(huán)病毒2型可以感染豬的一生，不同生產(chǎn)階段的豬感染后臨床表現(xiàn)不同，人們將與PCV2相關(guān)的系列疾病稱為“豬圓環(huán)病毒病”（PCVD）或“豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病”（PCVAD）[6]。我國豬場普遍存在PCV2的感染，具有以下特點。

3.1 PMWS比例在下降

由于國內(nèi)PCV2疫苗的廣泛應(yīng)用，現(xiàn)在豬場較少見到典型的多系統(tǒng)衰竭綜合征的豬群，除非豬場處于藍耳病活躍感染期，或因防控非洲豬瘟壓力而停止免疫PCV2疫苗。需要注意的是，PMWS不僅發(fā)生于斷奶階段，4～16周齡的豬群都可能發(fā)生。

3.2 肥育期的感染比例在上升

國內(nèi)豬場PCV2疫苗往往在斷奶前后免疫1～2次，由于很多疫苗的保護持久性不夠，加上肥育豬飼養(yǎng)期延長，PCV2在肥育豬的感染十分普遍，存在上升趨勢。PCV2感染導(dǎo)致肥育豬發(fā)生肺部疾?。≒CV2-LD），是呼吸道病綜合征的最重要病因之一，盲目添加抗生素控制往往效果不理想。PCV2還會導(dǎo)致肥育豬的腸道上皮細胞損傷，造成腸道疾?。≒CV2-ED），病豬拉灰色、黃色或褐色稀糞便，繼發(fā)回腸炎、魏氏梭菌病等腸道疾病，加重腸道的感染，這在我國豬場十分普遍。此外，PCV2的亞臨床感染可導(dǎo)致肥育期巨大的經(jīng)濟損失。肥育期的PCV2感染被我國大部分豬場忽視了，最主要的原因是疾病的鑒別診斷問題，人們不知道自己豬場肥育豬發(fā)病的源頭其實是PCV2。

3.3 母豬繁殖障礙問題被低估

PCV2感染母豬可發(fā)生繁殖障礙（PCV2-RD），出現(xiàn)返情、流產(chǎn)、木乃伊胎、死胎和弱仔等，但由于其他垂直傳播感染的疾病也會導(dǎo)致類似癥狀，加上3胎以上的經(jīng)產(chǎn)母豬PCV2抗體陽性率普遍很高，人們往往低估了PCV2感染造成的母豬繁殖障礙。我們可以從4個方面評估母豬的感染壓力：死胎出現(xiàn)心肌肥大或心肌炎，qPCR檢測出高病毒拷貝數(shù)（＞105）；出生當(dāng)天同窩仔豬體重均勻度差別較大；5周齡（包括產(chǎn)房）前的仔豬出現(xiàn)超早期PMWS的感染癥狀；以現(xiàn)有的種豬繁殖潛力，配種、飼養(yǎng)和管理等手段都改善后，產(chǎn)仔數(shù)仍不滿意。雖然有一些專業(yè)人員提醒豬場關(guān)注母豬的PCV2疫苗免疫，但由于很多疫苗的研發(fā)設(shè)計和免疫方案是針對仔豬的，同樣的疫苗免疫在母豬上，對繁殖成績幾乎沒有改變，這進一步加劇了管理決策層的低估程度。

3.4 后備母豬無效免疫

國內(nèi)后備母豬的配種時間大約在210～300日齡，仔豬階段免疫的PCV2疫苗至此保護力大多非常低了，后備母豬的繁殖系統(tǒng)極易受到圓環(huán)病毒的侵害，這與同為單鏈DNA的細小病毒感染是類似的。豬場將用于仔豬的疫苗在后備母豬配種前“加強”免疫1次，希望能給第1次懷孕的母豬帶來足夠的保護，但結(jié)果卻事與愿違。母豬免疫的主要目的是保護繁殖系統(tǒng)，這是有別于仔豬免疫的。目的不同，所要求的疫苗種類、劑量和免疫方案也是不同的。爭辯是無意義的，簡單的試驗對比就能分辨出有效免疫與無效免疫的差別。現(xiàn)在普遍認為，后備母豬的第1次繁殖表現(xiàn)，往往代表了其終身的潛力，后備母豬PCV2的無效免疫降低了眾多優(yōu)秀品種的繁殖預(yù)期。

3.5 豬皮炎腎病綜合征高發(fā)

豬皮炎腎病綜合征（PDNS）是圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CVAD）的一種，但并非所有PDNS都是PCV2引起的，藍耳病、霉菌毒素、巴氏桿菌感染等都可能是其病因。PDNS病豬有全身性脈管炎和腎小球腎炎，多認為是Ⅲ型免疫超敏性反應(yīng)，中大豬高發(fā)[6-8]。近年來為了追求高效養(yǎng)殖，我國很多豬場忽視了養(yǎng)殖環(huán)境和動物福利的因素，豬皮炎腎病綜合征呈現(xiàn)高發(fā)態(tài)勢，由于皮膚特別是后肢和會陰部出現(xiàn)不規(guī)則的紅紫斑和丘疹，臨床上很容易被發(fā)現(xiàn)，有人會條件反射地“診斷”為PCV2感染，這是不科學(xué)的。通過更換疫苗的方式往往不能立即奏效，改善飼料質(zhì)量、加強通風(fēng)、添加清熱解毒的中藥等方式更為有效。有時候什么也不做，高溫高濕的季節(jié)一過，感染豬的比例也會大幅下降。毫無疑問，高效的PCV2疫苗免疫或多或少能夠降低PDNS的發(fā)病率，畢竟PCV2是其病因之一?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)皮炎腎病綜合征發(fā)病豬PCV3檢出率較高，相關(guān)研究還在開展之中。

3.6 仔豬先天性震顫呈散發(fā)狀態(tài)

仔豬先天性顫抖（Congenital tremor, CT），又稱“抖抖病”，現(xiàn)有國際上一般不將其視為圓環(huán)病毒相關(guān)疾病，但國內(nèi)很多書刊資料和專家講到PCV2時仍會提及CT。現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)CT有6種類型，B型沒有組織學(xué)損傷，人們對其所知甚少；AⅠ型是由經(jīng)典豬瘟引起；AⅢ和AⅣ型是染色體隱性遺傳所致；AⅤ由敵百蟲等化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致；AⅡ以前被認為與PCV2相關(guān)，現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)其病原是豬非典型性瘟病毒（Atypical porcine pestivirus, APPV），臨床上可以在新生仔豬上用APPV感染復(fù)制出癥狀[9]。APPV可以垂直傳播，造成胎兒中樞神經(jīng)損傷，新生仔豬脊髓髓鞘形成減少，四肢、頭部和全身出現(xiàn)震顫。我國仔豬先天性震顫呈散發(fā)態(tài)勢，個別豬場發(fā)病率較高，發(fā)病仔豬吃不到奶水導(dǎo)致餓死，存在一定的危害。

3.7 PCV2d成為主流感染基因型

目前已知PCV2有6個基因型，無論國外還是國內(nèi)PCV2d都已成為最流行的感染基因型。從PCV2a到PCV2b，再到PCV2d，基因型的逐漸分化有多種原因，包括疫苗接種壓力和自然選擇。PCV2d的出現(xiàn)與疫苗的廣泛使用有關(guān)。國內(nèi)使用的PCV2疫苗有PCV2a和PCV2b兩種基因型。進口疫苗都是基于PCV2a研制的，已被證明對PCV2d有較好的保護。有人擔(dān)心國產(chǎn)疫苗對于PCV2d保護率不夠，建議免疫兩次以上來降低風(fēng)險。PCV2核酸進化率為1.2×10-3位點/年，具有與單鏈RNA病毒類似的變異復(fù)雜性，全病毒疫苗的交叉保護更具優(yōu)勢[10-12]。

4 PCV2的鑒別診斷

典型的臨床癥狀和解剖病變引導(dǎo)我們關(guān)注或懷疑PCV2的感染，但還不足以達到診斷的標準。生長緩慢、消瘦、腹股溝淋巴結(jié)腫大等是PMWS的典型癥狀，但其他疾病也會導(dǎo)致類似問題。后肢及會陰部等壞死性或出血性病變、腎臟白斑、腎皮質(zhì)出血、全身性脈管炎、壞死性或纖維素性腎小球腎炎是PDNS的典型癥狀，但PCV2并非其唯一病因。懷孕后期流產(chǎn)和死胎、死亡胎兒心肌肥大、纖維組織增生或壞死性心肌炎是PCV2導(dǎo)致的繁殖障礙表現(xiàn)，但從這些表現(xiàn)也不能準確診斷出是PCV2的問題。肥育期感染導(dǎo)致的肺部疾病、腸道疾病和亞臨床感染就更加難以從臨床表現(xiàn)來判斷了。

PCV2廣泛感染，血清學(xué)抗體難以作為診斷標準?？贵w的動態(tài)變化可作為免疫監(jiān)測的參考，疫苗免疫后抗體水平一般先升高后下降，如果在下降的趨勢中突然再次上升，往往預(yù)示著野毒的感染。母源抗體對免疫的干擾作用可以通過抗體水平測定來完成。由于各種ELISA試劑盒的敏感性、特異性和符合率差異很大[13]，抗體水平動態(tài)監(jiān)測可以使用法國Synbiotics和我國哈爾濱獸醫(yī)研究所的阻斷ELISA試劑盒，母源抗體監(jiān)測可以采用西班牙Ingenasa試劑盒。

普通PCR無法作為診斷手段，因為PCV2廣泛分布，健康豬群往往也能夠檢測到陽性結(jié)果。熒光定量PCR（qPCR）可以測定血液或組織中的病毒載量，不僅能檢測出病毒的有無，還能反映出病變的程度。qPCR作為PCV2的診斷工具需要一定的群體數(shù)量，個體診斷最好采用更為精準的免疫組化（IHC）和原位雜交技術(shù)（ISH）。方法越精準，成本和代價越高。

5 PCV2的疫苗免疫

PCV2疫苗的上市曾被認為是動物疫苗技術(shù)最成功的典范，當(dāng)人們還在爭議PMWS的致病原因和感染機理時，接種PCV2疫苗的豬群“立竿見影”地擺脫了PMWS的困擾。現(xiàn)在歐洲與美國養(yǎng)豬場PCV2的疫苗免疫率達到90%以上，我國規(guī)模化豬場的免疫率也非常高。事實證明，即便是最好的PCV2疫苗也不是完美的。疫苗接種后可以降低病毒血癥、減少排毒，將病毒對生產(chǎn)成績的危害降低至可控范圍內(nèi)，但并不能完全阻止排毒和傳播。疫苗接種后R0（Basic Rproductive Number，基本傳染數(shù)）從5.2降到1.5，仍然在大于1，單靠PCV2疫苗難以做到疾病的凈化[14]。

5.1 疫苗種類

已經(jīng)上市的PCV2疫苗有3種：全病毒滅活疫苗、亞單位疫苗和嵌合疫苗，目前3種疫苗在我國都有商品化產(chǎn)品。世界上首個上市的PCV2疫苗即Circovac?是全病毒滅活疫苗，內(nèi)含全基因組基因編碼的所有組分，包括非結(jié)構(gòu)復(fù)制酶蛋白（Rep）和核衣殼蛋白（Cap），Rep蛋白產(chǎn)生的細胞免疫應(yīng)答對于防控PCVAD也很重要。亞單位疫苗是通過桿狀病毒或大腸桿菌表達Cap蛋白，體外折疊組裝形成空間構(gòu)象，即病毒樣顆粒（Virus-like particles, VLP）。由于全病毒疫苗病毒培養(yǎng)較為困難，生產(chǎn)成本高，國內(nèi)有些廠商在全病毒疫苗中添加生產(chǎn)更為容易的Cap蛋白，但目前已被我國明文禁止。嵌合疫苗是將PCV1的ORF2用PCV2的ORF2基因進行替換后構(gòu)建重組病毒滅活疫苗。

5.2 佐劑類型

目前國內(nèi)上市的PCV2疫苗佐劑包括水包油佐劑、水包油包水佐劑和水佐劑。水佐劑應(yīng)激小，免疫應(yīng)答快，但免疫持續(xù)期稍短。水包油佐劑應(yīng)激適中，免疫應(yīng)答稍慢，但免疫持續(xù)期久，對于肥育期的感染保護更好。

5.3 免疫目的

PCV2疫苗免疫母豬的目的是保護母豬的繁殖系統(tǒng)并提供高初乳水平保護產(chǎn)房仔豬和斷奶前期仔豬。免疫仔豬的目的是降低病毒載量、減少排毒，盡可能地降低PCV2對仔豬的生產(chǎn)表現(xiàn)。目的不同，對疫苗種類的要求和免疫方案都會有所不同。

5.4 免疫次數(shù)

免疫次數(shù)取決于疫苗的研發(fā)設(shè)計、生產(chǎn)工藝和疾病的感染壓力，與其聽從廣告宣傳，不如閱讀產(chǎn)品標簽。產(chǎn)品標簽上標注的免疫次數(shù)代表當(dāng)初疫苗研發(fā)和上市審批的標準，這是公正客觀的。

5.5 功效評估

生產(chǎn)數(shù)據(jù)和實驗室檢測相結(jié)合的評估方式能較好地反映出疫苗的功效。仔豬免疫可以統(tǒng)計死亡率、日增重、料重比等生產(chǎn)數(shù)據(jù)結(jié)合抗體應(yīng)答水平、病毒血癥水平等實驗室檢測手段來評估，中和抗體和細胞免疫雖然也很重要，但一般實驗室水平難以達到要求。母豬免疫可以統(tǒng)計總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、初生重、斷奶仔豬數(shù)、母豬斷奶至配種的天數(shù)、返情率等繁殖成績和抗體應(yīng)答水平來評估。

5.6 免疫失敗的原因

毫無疑問，國內(nèi)豬場存在大量的PCV2免疫失敗現(xiàn)象，由于PCV2感染較為緩慢，臨床癥狀不突出，亞臨床癥狀更多，很多的失敗免疫被忽視了。免疫失敗的原因有：疫苗選擇錯誤，用于仔豬的疫苗免疫在母豬往往是失敗的，有研究表明亞單位疫苗免疫的母豬不能阻止垂直傳播[15]；人為因素，儲藏和運輸沒有做到全程2～8 ℃，沒有注射入深部肌肉，擅自降低劑量，使用標簽標注劑量的一半等；免疫時間錯誤：免疫太早，不光是仔豬免疫應(yīng)答不充分，更重要是母源抗體干擾。免疫太晚，病毒已經(jīng)發(fā)生了感染，免疫預(yù)防的效果無法達到?？梢酝ㄟ^抗體水平監(jiān)測找到適合于自己豬場的最佳免疫窗口期。豬的健康，無論是母豬還是仔豬，場內(nèi)藍耳病過于活躍，PRRS病毒血癥期的大部分疫苗免疫都是失敗的。

6 應(yīng)付措施

6.1 5周齡之前出現(xiàn)PMWS感染癥狀

這是很罕見的，往往是非洲豬瘟復(fù)產(chǎn)場，場內(nèi)大部分都是新母豬，母源抗體保護不足導(dǎo)致超早期感染。這種情況下，仔豬提前免疫已經(jīng)來不及，需要在母豬產(chǎn)前3周免疫兩次種豬用的PCV2疫苗來解決。

6.2 肥育期感染

首先檢查當(dāng)前所用疫苗，如果是兩針型疫苗只免疫了1次，需要再加強免疫1次。如果免疫次數(shù)已經(jīng)參考標簽說明正確執(zhí)行了，仍存在肥育期的感染，需要在原來免疫的基礎(chǔ)上，在肥育期PCVAD出現(xiàn)的前1個月再免疫1次疫苗。這樣有些豬場會出現(xiàn)商品豬免疫3次PCV2疫苗的現(xiàn)象。事實證明，這樣做是值得的，這種情況往往在水佐劑疫苗上比較常見。

6.3 母豬繁殖障礙問題

PCV2疫苗要像細小病毒一樣在后備母豬配種前免疫兩次。公豬每年需要免疫2～3次，經(jīng)產(chǎn)母豬的免疫可以根據(jù)上述方法評估感染壓力后決定是否免疫，如果免疫可以跟胎免疫或每年普免3次。免疫要選擇對種豬有效的疫苗。

6.4 皮炎腎病綜合征問題

首先檢查豬舍環(huán)境，改善通風(fēng)、濕度、密度等因素，這是最要緊的。然后檢查是否存在上述的PCV2疫苗免疫失敗問題。此外，因為藍耳病、霉菌毒素和一些細菌感染也會導(dǎo)致PDNS的出現(xiàn)，這些因素也要排查解決。PDNS發(fā)病豬群可以用清熱解毒的中藥和抗炎藥物（如卡巴匹林鈣、地塞米松等）有效緩解癥狀。夏季蚊蟲叮咬導(dǎo)致的皮膚性問題不屬于皮炎腎病綜合征，但只要找到問題的源頭，也能很容易地解決。

6.5 PCV3高陽性問題

現(xiàn)在國內(nèi)很多豬場反應(yīng)，自己場內(nèi)的豬群呈PCV3陽性，特別是臨床不太穩(wěn)定的豬場，擔(dān)憂PCV3是其主要的病因，四處打聽是否有PCV3疫苗供應(yīng)。PCV3是否有致病性還屬未知，即使致病也沒有必要恐慌。至少從目前來看，嚴重發(fā)病的豬群都能在PCV3之外找到致病原，現(xiàn)在懷疑PCV3與母豬繁殖障礙、皮炎腎病綜合征、器官炎性反應(yīng)有關(guān)，與藍耳病、PCV2、經(jīng)典豬瘟混合感染比較普遍。有關(guān)PCV3病毒分離和致病性還處于實驗室研究階段，我們生產(chǎn)上先做好PCV2的防控，先把已知的和容易做好的事項盡可能地完善。

6.6 做好生產(chǎn)管理工作

PCV2疫苗上市前，豬場遵照“Madec 20法則”能夠大幅降低PMWS的發(fā)病率，但操作起來較為繁瑣，其流程不比今天非洲豬瘟防控措施簡單?！癕adec 20法則”包括全進全出、實體隔斷、減少寄養(yǎng)、改善豬舍環(huán)境、杜絕混群、及時移除病豬和嚴格控制飼養(yǎng)面積等，這些措施在今天也不過時，仍值得借鑒。

6.7 藍耳病防控

國內(nèi)大部分豬場無法實現(xiàn)藍耳病的凈化或無法維持藍耳病的長期陰性，保持存欄豬群廣泛“弱陽性”感染的動態(tài)平衡是比較現(xiàn)實的策略和目標。這其中后備母豬的入群馴化非常關(guān)鍵，即使是自己場內(nèi)挑選的后備母豬也要在入群前做好馴化工作，通過實驗室檢測的方法確保馴化的生物工具（如經(jīng)產(chǎn)母豬胎衣、保育豬糞便病料等）是非洲豬瘟陰性的，使用藍耳病弱毒疫苗是較安全的選擇之一。堅持監(jiān)測豬群藍耳病的感染動態(tài)，及時通過閉群、藥物保健等方式進行干預(yù)，確保藍耳病的長期穩(wěn)定。藍耳病穩(wěn)定了，PCV2的防控將變得更加容易，選擇合適的疫苗和制定實用的免疫計劃，在一線生產(chǎn)中全面落地執(zhí)行即可。

7 總結(jié)

豬圓環(huán)病毒包括PCV1、PCV2、PCV3和PCV4，在我們豬場都已檢出。其中對豬群健康危害最嚴重也是最確切的是PCV2。PCV2導(dǎo)致的豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾病包括仔豬系統(tǒng)性疾病（原PMWS）、肥育期腸道和肺部疾病、亞臨床感染、皮炎腎病綜合征和母豬繁殖障礙。PCV2診斷需要結(jié)合臨床和實驗室檢測結(jié)果綜合評估，診斷越精準，成本和代價越高。疫苗是控制PCVAD的主要手段，豬場根據(jù)自身感染壓力選擇有效疫苗并制定適宜的免疫方案，一線生產(chǎn)中盡量避免疫苗的免疫失敗。