武蕓,王春林,王麗朋,張臘臘,胡浩斌
1(隴東學(xué)院 化學(xué)化工學(xué)院,甘肅 慶陽(yáng),745000)2(隴東學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,甘肅 慶陽(yáng),745000)
茄科枸杞屬植物黑果枸杞是重要的藥食同源植物[1-2],果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富、因其具有抗氧化[3-4]、抗動(dòng)脈粥樣化[5]、抗炎[6]、抗疲勞[7-8]、增強(qiáng)腸道屏障功能[9]、防治心腦血管疾病[10]、防痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎[11]等功效,而成為現(xiàn)階段枸杞栽培與育種的熱點(diǎn)。經(jīng)查閱大量文獻(xiàn),有關(guān)黑果枸杞的研究多為育種、栽培種植[12-13],化學(xué)成分多見花青素[14-16]、多糖[17-18]等。多酚是一類含有羥基和苯環(huán)的極性化合物,近年來(lái),由于其在抗炎、抗氧化、抗腫瘤等方面顯示出良好作用而具有廣泛的應(yīng)用前景[19],成為生命科學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一,被稱為繼膳食纖維之后的“第七類營(yíng)養(yǎng)素”[20]。關(guān)于黑果枸杞多酚純化分離研究未見報(bào)道。
本文采用靜態(tài)吸附法比較了9種大孔樹脂對(duì)黑果枸杞粗多酚的吸附、解吸性能,重點(diǎn)研究了HPD500大孔樹脂對(duì)黑果枸杞多酚的吸附的動(dòng)力學(xué)、熱力學(xué)特性、吸附機(jī)理、動(dòng)態(tài)純化工藝條件,并對(duì)純化多酚進(jìn)行了抗氧化性分析。研究結(jié)果有利于開發(fā)黑果枸杞資源,提高其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
植物原料,2018年6月至8月,課題組成員考察并采集于甘肅省民勤縣,經(jīng)隴東學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院副教授馬世榮鑒定。低溫鼓風(fēng)干燥后機(jī)械粉碎、0~5 ℃密封保存、備用。
沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào):110831-201605,質(zhì)量分?jǐn)?shù)90.8%),購(gòu)于中國(guó)食品藥品鑒定研究所。實(shí)驗(yàn)用大孔樹脂,購(gòu)于滄州寶恩化工有限公司。
DHG型電熱鼓風(fēng)干燥箱,上海一恒科學(xué)儀器有限公司;FZ102微型植物試樣粉碎機(jī),北京中興偉業(yè)儀器有限公司;BSA224S型電子天平,北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;SB-5200DTD型超聲波清洗機(jī),寧波新芝生物科技有限公司;800離心機(jī),常州國(guó)華電器有限公司;RE-5203旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,上海亞榮生儀器廠;7230G可見分光光度計(jì),上海精密科學(xué)儀器有限公司;CHA-S氣浴恒溫振蕩器,江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠;精密蠕動(dòng)泵BT100-2 J/YZ1515x,保定蘭格恒流泵有限公司;HHS電熱恒溫水浴鍋,上海醫(yī)療器械五廠;PHS-3C酸度計(jì),上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司。
1.3.1 樹脂的預(yù)處理
實(shí)驗(yàn)中所用9種大孔樹脂名稱和性質(zhì)如表1所示,樹脂預(yù)處理方法參考相關(guān)文獻(xiàn)[21]。
1.3.2 黑果枸杞多酚粗提液的制備
以60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇為溶劑,在最佳工藝條件下進(jìn)行超聲輔助提取,將提取液減壓濃縮至無(wú)醇味,轉(zhuǎn)移至1 000 mL容量瓶中,用蒸餾水定容、搖勻,備用。
1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及多酚質(zhì)量濃度的測(cè)定
配制9.325~65.276 μg/mL的沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,采用福林酚法[22]繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=0.012 65C+0.025 58(R=0.998 77),實(shí)驗(yàn)中所測(cè)各種測(cè)定液多酚濃度均以沒食子酸當(dāng)量計(jì)。
采用福林酚法測(cè)定實(shí)驗(yàn)中各種測(cè)定液(提取液、靜態(tài)吸附前、后溶液、動(dòng)態(tài)吸附上樣液與洗脫液、純度測(cè)定溶液)的多酚濃度,并根據(jù)公式(1)計(jì)算相應(yīng)溶液的多酚質(zhì)量濃度Y[22]:
(1)
式中:Y=C0、Ce、Cd、Cg等,表示各種測(cè)定液的多酚質(zhì)量濃度,mg GAE/mL;C,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的質(zhì)量濃度,μg/mL;DF,稀釋倍數(shù);V,各種測(cè)定液的總體積,mL。
1.3.4 靜態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)
準(zhǔn)確稱取2.0 g不同類型的大孔樹脂于錐形瓶中,分別加入一定濃度的黑果枸杞多酚稀釋液50 mL,在轉(zhuǎn)速 120 r/min,25 ℃下氣浴振蕩24 h,測(cè)定并計(jì)算吸附前、后溶液中多酚的質(zhì)量濃度。樹脂吸附達(dá)到飽和后,用蒸餾水沖洗除去樹脂表面殘余樣品,以50 mL 60%乙醇為溶劑,保持轉(zhuǎn)速120 r/min、25 ℃氣浴振蕩進(jìn)行解吸,24 h后,測(cè)定并計(jì)算解吸液中多酚的質(zhì)量濃度,各種大孔樹脂對(duì)黑果枸杞多酚的吸附量、吸附率與解吸率計(jì)算如公式(2)~公式(4)所示:
(2)
(3)
(4)
式中:Q,吸附量,mg/g;C0、Ce,吸附起始及終了時(shí)吸附液中的多酚質(zhì)量濃度,mg/mL;W,樹脂質(zhì)量,g;V0,吸附液體積,mL;E,吸附率,%;P,解吸率,%;Cd,解吸終了時(shí)解吸液中多酚的質(zhì)量濃度,mg/mL;Vd,解吸液體積,mL。
1.3.5 吸附動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
稱取2.0 g 處理好的HPD500大孔樹脂于三角瓶中,加入50 mL一定濃度的黑果枸杞多酚稀釋液,以120 r/min的轉(zhuǎn)速下恒溫氣浴振蕩,溫度為25 ℃,每隔30 min取1 mL上清液測(cè)定,計(jì)算吸附量,以吸附時(shí)間為橫坐標(biāo)、吸附量為縱坐標(biāo)繪制靜態(tài)吸附曲線,采用公式(5)、公式(6)描述吸附過(guò)程并建立動(dòng)力學(xué)方程。
1.3.6 吸附熱力學(xué)實(shí)驗(yàn)
準(zhǔn)確稱取5份2.0 g的HPD500大孔樹脂于150 mL三角瓶中,將黑果枸杞多酚提取液稀釋為0.007、0.012 5、0.025、0.05、0.1 mg/mL,各加入50 mL,293 K恒溫振蕩吸附,吸附完成后測(cè)定上清液中多酚的質(zhì)量濃度并計(jì)算吸附量Qe,繪制1/Qe~1/Ce及l(fā)nQe~lnCe關(guān)系曲線,采用公式(10)和公式(11)進(jìn)行等溫吸附模型擬合并建立熱力學(xué)方程。303 K、313 K、323 K操作相同。
1.3.7 靜態(tài)吸附所用到的方程
靜態(tài)吸附用到的方程如公式(5)~公式(11)所示:
準(zhǔn)一級(jí)動(dòng)力學(xué)模型
ln(Qe-Qt)=lnQe-K1t
(5)
準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)模型
(6)
液膜擴(kuò)散模型
-ln(1-F)=kt
(7)
顆粒內(nèi)擴(kuò)散模型
Qt=kt0.5
(8)
化學(xué)反應(yīng)控制模型
1-(1-F)1/3=kt
(9)
Langmuir方程
(10)
Freundlich方程
(11)
式中:Qt、Qe,HPD500樹脂對(duì)黑果枸杞多酚t時(shí)刻及吸附平衡時(shí)的吸附量,mg/g;F=Qt/Qe;Qmax,HPD500樹脂對(duì)黑果枸杞多酚的最大吸附量,mg/g;Ce,吸附平衡的多酚質(zhì)量濃度,mg/mL;K1、K2,動(dòng)力學(xué)參數(shù);k,擴(kuò)散系數(shù);KL、KF,HPD500樹脂吸附黑果枸杞多酚的熱力學(xué)模型參數(shù);1/n,樹脂吸附強(qiáng)度。
1.3.8 動(dòng)態(tài)吸附與解吸工藝參數(shù)的考察
稱取HPD500大孔樹脂15.0 g,濕法裝柱(樹脂柱體積25 mL,高度185 mm),層析柱規(guī)格為φ13 mm×200 mm,分別考察上樣流速(1.2、2.4、3.6、4.8 BV/h)、上樣體積、pH(2.5、4.5、6.5、8.5、10.5)、上樣液濃度(0.6、0.8、1.0、1.2 mg/mL)對(duì)吸附率的影響。
完成動(dòng)態(tài)吸附的基礎(chǔ)上,考察洗脫劑濃度(40%、50%、60%、70%、80%乙醇)和洗脫流速(1.2、2.4、3.6、4.8 BV/h)對(duì)解吸率的影響。
1.3.9 黑果枸杞多酚純度測(cè)定
將黑果枸杞多酚粗提液及動(dòng)態(tài)純化后的洗脫液分別在0.05 MPa、48 ℃條件下利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾除去溶劑,避光、25 ℃鼓風(fēng)干燥,得黑果枸杞多酚粗品與精制品,分別準(zhǔn)確稱取0.2 g,少量60%乙醇溶解,蒸餾水分別定容至100 mL,即為測(cè)試液,測(cè)定多酚濃度,采用公式(12)計(jì)算粗多酚與精制多酚的純度:
(12)
式中:w為多酚質(zhì)量純度,mg/g;Cg為粗品及精制品測(cè)試液多酚濃度,mg/mL;n為稀釋倍數(shù);100為溶液體積,mL;m,多酚質(zhì)量,0.2 g;1 000為單位換算系數(shù)。
1.3.10 純化黑果枸杞多酚抗氧化性實(shí)驗(yàn)
(1)羥自由基清除實(shí)驗(yàn) 參考NAGA等[23]報(bào)道的方法測(cè)定,并采用公式(13)計(jì)算黑果枸杞精制多酚及抗壞血酸的羥自由基清除率:
(13)
式中:Ax0、A0、Ax分別是510 nm處樣品本底液、空白對(duì)照液及測(cè)試液的吸光度。
(2)超氧陰離子自由基清除實(shí)驗(yàn) 將5.9 mL pH=7.4的0.05 mol/L Tris-HCl緩沖溶液與0.1 mL 60 mmol/L的連苯三酚溶液在10 mL石英比色皿中迅速混合,25 ℃預(yù)熱15 min,以Tris-HCl緩沖溶液為參比,在325 nm處測(cè)其吸光度,開始計(jì)時(shí),每隔30 s讀取1次數(shù)值A(chǔ)325 nm,至240 s時(shí)為止,ΔA0=A325 nm,240 s-A325 nm,30 s。用1 mL樣品溶液與4.9 mL上述Tris-HCl緩沖溶液代替5.9 mL緩沖溶液做相同的實(shí)驗(yàn),ΔA=A325 nm,240 s-A325 nm,30 s。通過(guò)公式(14)計(jì)算黑果枸杞精制多酚及抗壞血酸的超氧陰離子自由基清除率:
(14)
1.3.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
數(shù)據(jù)處理采用Origin 8.0 軟件繪圖和擬合。
對(duì)9種大孔樹脂進(jìn)行吸附和解吸操作后評(píng)價(jià)其對(duì)黑果枸杞多酚的純化性能,結(jié)果見表1。由表1可知,HPD500是孔徑為5.5~7.5 nm的極性樹脂,對(duì)黑果枸杞多酚的吸附率為72.72%、解吸率為84.86%,比較而言,此樹脂對(duì)黑果枸杞多酚有良好的吸附和解吸效果,可能與它有較大的比表面積,能提供較多吸附位點(diǎn)有關(guān)。因此,筆者選擇HPD500大孔樹脂進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),以探討其對(duì)黑果枸杞多酚的吸附分離特性。
表1 九種大孔樹脂的吸附率與解吸率
2.2.1 吸附動(dòng)力學(xué)曲線
實(shí)驗(yàn)擬合得到的吸附動(dòng)力學(xué)曲線見圖1。由圖1可知,吸附過(guò)程經(jīng)歷了快速吸附(0~300 min)、慢速吸附(300~720 min)、吸附平衡(720~1 440 min)3個(gè)階段,吸附速率與吸附劑表面吸附位點(diǎn)與固液兩相吸附質(zhì)的濃度差有關(guān)。
圖1 吸附動(dòng)力學(xué)曲線
2.2.2 吸附動(dòng)力學(xué)模型
采用準(zhǔn)一級(jí)、準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)模型分別描述吸附過(guò)程,線性回歸得出動(dòng)力學(xué)參數(shù)K1、K2、Qe,見表2。
表2 動(dòng)力學(xué)模型及相關(guān)系數(shù)
根據(jù)表2,準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)模型的相關(guān)系數(shù)為0.999 24,平衡吸附量理論值為17.143 8 mg/g,表明準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)模型能更好地描述HPD500樹脂對(duì)黑果枸杞多酚的吸附過(guò)程,吸附過(guò)程可能通過(guò)共用電子或交換電子完成[24]。
2.2.3 吸附控制機(jī)制的分析
相關(guān)文獻(xiàn)顯示,一般大孔樹脂吸附過(guò)程由外擴(kuò)散、液膜擴(kuò)散、顆粒內(nèi)擴(kuò)散、吸附質(zhì)與大孔樹脂內(nèi)部活性基發(fā)生化學(xué)反應(yīng)4個(gè)連續(xù)的步驟構(gòu)成[25]??赏ㄟ^(guò)快速混合消除外擴(kuò)散對(duì)吸附速率的影響,因此,考慮后3步的吸附控制情況[26]。
將動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)通過(guò)公式(7)~公式(9)分別進(jìn)行線性擬合,結(jié)果見表3,繪制顆粒內(nèi)擴(kuò)散模型曲線,如圖2所示。
表3 HPD500樹脂對(duì)黑果枸杞多酚擴(kuò)散擬合方程及相關(guān)參數(shù)
根據(jù)EWA等的研究成果,如果顆粒內(nèi)擴(kuò)散模型為唯一控制步驟,模型擬合得到的結(jié)果應(yīng)為1條曲線,而且經(jīng)過(guò)原點(diǎn)[27]。由圖2可以看出,顆粒內(nèi)擴(kuò)散模型曲線近似為2條相交且不經(jīng)過(guò)坐標(biāo)原點(diǎn)的直線,所以不是唯一控制步驟,表3中3種模型的相關(guān)系數(shù)均大于0.9小于1,順序?yàn)椋夯瘜W(xué)反應(yīng)模型>液膜擴(kuò)散>顆粒內(nèi)擴(kuò)散,說(shuō)明化學(xué)反應(yīng)模型對(duì)吸附過(guò)程控制顯著且受其余二者影響。
圖2 HPD500大孔樹脂吸附黑果枸杞多酚的顆粒內(nèi)擴(kuò)散模型動(dòng)力學(xué)曲線
2.3.1 靜態(tài)吸附等溫線
將靜態(tài)等溫實(shí)驗(yàn)所得1/Qe~1/Ce及l(fā)nQe~lnCe關(guān)系分別進(jìn)行線性擬合,根據(jù)Langmuir方程和Freundlich方程計(jì)算模型參數(shù),結(jié)果如表4、表5所示。
表4 Langmuir熱力學(xué)方程及相關(guān)系數(shù)
表5 Freundlich熱力學(xué)方程及相關(guān)系數(shù)
根據(jù)表4、表5,Langmuir方程較Freundlich方程更好地描述了吸附過(guò)程,R2均大于0.99。293~323 K的吸附等溫線表明平衡吸附量隨溫度的升高而減小,Langmuir方程擬合參數(shù)KL、qm隨溫度的變化情況與此相符。
2.3.2 靜態(tài)吸附熱力學(xué)參數(shù)
吸附自由能變?chǔ)通過(guò)Gibbs方程(15)計(jì)算[28]:
(15)
式中:X,平衡溶液中吸附質(zhì)的摩爾分?jǐn)?shù);Q,吸附量;T,熱力學(xué)溫度,K。
若吸附等溫線符合Langmuir,ΔG采用公式(16)計(jì)算,其中K為L(zhǎng)angmuir方程中的模型參數(shù)KL,R是氣體常數(shù)[8.314 J/(mol·K)]。
ΔG=RTlnK
(16)
吸附焓變?chǔ)及吸附熵變?chǔ)采用Gibbs-Helmholtz方程[29]得到,如公式(17)所示,結(jié)果見表6。
ΔS=(ΔHΔG)/T
(17)
由表6可知,ΔG<0,ΔH<0,ΔS<0說(shuō)明HPD500大孔樹脂吸附黑果枸杞多酚可自發(fā)進(jìn)行且為放熱熵減過(guò)程,降低溫度可增強(qiáng)吸附效果、提高吸附率。
2.4.1 上樣流速和上樣體積
按“1.3.8”中的方法分別以1.2、2.4、3.6、4.8 BV/h的上樣流速上樣,其泄漏點(diǎn)(流出液濃度達(dá)到上樣濃度的10%)分別為240 mL(9.6 BV),200 mL(8.0 BV),160 mL(6.4 BV),110 mL(4.4 BV)可見到達(dá)泄漏點(diǎn)時(shí)的上樣量隨上樣流速的增大逐漸減小,結(jié)果見圖3。由于上樣速度過(guò)快,黑果枸杞多酚與樹脂接觸時(shí)間較短,導(dǎo)致吸附率較低,上樣速度過(guò)慢,多酚與樹脂充分接觸,實(shí)驗(yàn)循環(huán)周期延長(zhǎng),綜合考慮,選取上樣流速為2.4 BV/h為宜,上樣量8.0 BV。
圖3 不同流速的吸附泄漏曲線
2.4.2 上樣pH
按“1.3.8”中的方法考察pH對(duì)吸附率的影響,結(jié)果如圖4所示。由圖4可以看出,HPD500樹脂對(duì)黑果枸杞多酚的吸附率在酸性條件較高且變化幅度不大,黑果枸杞粗多酚樣品原液pH為6.5,綜合考慮實(shí)驗(yàn)中保持黑果枸杞多酚原液pH。
圖4 上樣液pH對(duì)吸附率的影響
2.4.3 上樣濃度
上樣濃度對(duì)吸附率的影響結(jié)果如圖5所示。由圖5可以看出,吸附率隨上樣濃度的增加先增大后減小,當(dāng)上樣質(zhì)量濃度增至0.8 mg/mL時(shí),吸附率達(dá)到了最大值94.29%,原因是上樣液濃度較低時(shí),吸附推動(dòng)力小,吸附速率小,相同時(shí)間內(nèi)導(dǎo)致吸附率較小,上樣濃度增大,上樣液中雜質(zhì)也隨之增多,與多酚形成競(jìng)爭(zhēng)吸附、從而影響吸附效果。因此,選擇0.8 mg/mL為適宜的上樣濃度。
圖5 上樣液濃度對(duì)吸附率的影響
2.4.4 洗脫劑濃度
以上述得到的較佳動(dòng)態(tài)吸附條件對(duì)黑果枸杞多酚粗提液進(jìn)行吸附并計(jì)算吸附量,固定洗脫速率為2.4 BV/h,考察洗脫劑濃度(體積分?jǐn)?shù))對(duì)解吸率的影響,結(jié)果如圖6所示。
圖6 洗脫劑體積分?jǐn)?shù)對(duì)解吸率的影響
由圖6可知,隨著洗脫劑濃度的增加,解吸率先增大后減小且變化速率較快、曲線較陡峭,當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí),此時(shí)洗脫劑與黑果枸杞多酚極性相似使解吸率達(dá)到最大值87.75%。因此,洗脫劑選用60%乙醇。
2.4.5 洗脫劑流速
60%乙醇不同洗脫流速下的洗脫曲線見圖7。由圖7可以看出,在4種流速下,多酚洗脫流出液區(qū)間約為10~150 mL時(shí),流出130 mL后樹脂中的多酚量極少,因此,選用10~130 mL為純化多酚流出液收集區(qū)間,計(jì)算10~130 mL不同洗脫劑流速下獲得的多酚洗脫量,發(fā)現(xiàn)流速為2.4 BV/h時(shí)多酚的洗脫量最大,為123.06 mg,且峰較集中、沒有明顯拖尾現(xiàn)象。因此確定2.4 BV/h為洗脫流速。
圖7 動(dòng)態(tài)洗脫曲線
黑果枸杞多酚純化前后純度測(cè)定結(jié)果如表7所示。由表7可以看出,經(jīng)過(guò)HPD500大孔樹脂分離純化后,純度提高了2.36倍,表明HPD500大孔樹脂對(duì)黑果枸杞多酚有較好的純化作用,能夠?qū)崿F(xiàn)成分的富集。
表7 純化前后總多酚的純度
2.6.1 羥自由基清除能力
羥自由基清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖8。由圖8可以看出,羥自由基清除率隨黑果枸杞多酚和抗壞血酸濃度的增大而增大,通過(guò)清除率-濃度回歸曲線計(jì)算黑果枸杞多酚及抗壞血酸的半數(shù)抑制濃度分別是1.309 0、5.642 0 mg/mL,可見,黑果枸杞多酚對(duì)羥自由基的清除能力強(qiáng)于抗壞血酸。
圖8 黑果枸杞多酚及抗壞血酸的羥自由基清除能力
2.6.2 超氧陰離子自由基清除能力
超氧陰離子自由基的清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖9所示。由圖9可知,黑果枸杞多酚質(zhì)量濃度為0.20 mg/mL、抗壞血酸質(zhì)量濃度為0.03 mg/mL時(shí),二者清除率均達(dá)到了100%,通過(guò)清除率-濃度回歸曲線計(jì)算黑果枸杞多酚及抗壞血酸的半數(shù)抑制濃度IC50分別是0.070 8、0.007 26 mg/mL,可見黑果枸杞多酚對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用弱于抗壞血酸。
圖9 黑果枸杞多酚及抗壞血酸的超氧陰離子自由基清除能力 scavenging force of Lycium ruthenicum polyphenols and ascorbic acid
通過(guò)對(duì)9種大孔樹脂吸附分離效果的考察,確定了HPD500為黑果枸杞粗多酚較佳的分離樹脂。準(zhǔn)二級(jí)動(dòng)力學(xué)模型能很好地描述了HPD500樹脂對(duì)黑果枸杞多酚的吸附過(guò)程(R2>0.99),動(dòng)力學(xué)參數(shù)為K2=0.020 2;吸附熱力學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,吸附過(guò)程符合Langmuir方程(R2>0.99),且為自發(fā)放熱過(guò)程。
HPD500樹脂動(dòng)態(tài)純化黑果枸杞多酚的較佳工藝條件為:8 BV質(zhì)量濃度為0.8 mg/mL的黑果枸杞粗提液為上樣液,上樣流速為2.4 BV/h,60%(體積分?jǐn)?shù))的乙醇溶液以2.4 BV/h流速洗脫,用量6 BV,純度較純化前提高了2.36倍。
黑果枸杞多酚有較強(qiáng)的羥自由基和超氧陰離子自由基清除能力,可作為潛在的抗氧化劑來(lái)源。