河南省南陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心（473003）王文雷 史曉林

乙型肝炎是一種嚴(yán)重威脅人類健康的傳染性疾病，也是一種嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題，據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)報(bào)道，全球有20億左右人數(shù)感染乙型肝炎病毒，同時(shí)每年約有超過(guò)約75萬(wàn)人死于乙肝導(dǎo)致的肝硬化、肝癌等疾病[1][2]。因此，嬰幼兒時(shí)期接種乙肝疫苗，對(duì)降低乙肝感染風(fēng)險(xiǎn)、減少乙肝發(fā)生率及死亡率具有重要意義。乙型肝炎表面抗體（HBsAb）是判斷疫苗接種后體內(nèi)是否產(chǎn)生抗體的重要指標(biāo)，通過(guò)檢測(cè)其水平可評(píng)估疫苗接種效果[3]。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）為臨床主要檢測(cè)方法，但受到標(biāo)本濃度影響會(huì)出現(xiàn)漏診、誤診現(xiàn)象，具有一定局限性。近年來(lái)，由于微粒子酶免疫分析法（MEIA）對(duì)血清HBsAb靈敏度較高，同時(shí)還可定量檢測(cè)其水平，被大家廣泛接受。本研究選取392例接種乙肝疫苗的嬰幼兒作為研究對(duì)象，旨在探究MEIA法對(duì)血清HBsAb的診斷價(jià)值。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取392例接種乙肝疫苗的嬰幼兒（2018年6月～2019年10月）作為研究對(duì)象，其中女128例，男264例，年齡6個(gè)月～4歲，平均（2.11±0.25）歲；均按照0個(gè)月、1個(gè)月、6個(gè)月三針免疫接種程序接種乙肝疫苗；均為首次接種乙肝疫苗；知情本研究，簽署同意書(shū)。

1.2 方法 在接種乙肝疫苗后取靜脈血4ml，離心（轉(zhuǎn)速3000r/min，時(shí)間10min），分離，取血清分為2等份，于-20℃低溫保存待測(cè)。

1.2.1 儀器、試劑 雅閣全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀（美國(guó)，12000）及配套試劑，Biocel酶標(biāo)儀（12010），ELISA試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司），Biocel洗板機(jī)（1A201）。

1.2.2 ELISA法 采用雙抗原夾心法對(duì)血清HBsAb進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.2.3 MEIA法 采取雙抗原夾心法對(duì)血清HBsAb進(jìn)行檢測(cè)，待被測(cè)抗體和包被在微粒上抗原充分進(jìn)行結(jié)合，再將其和標(biāo)記堿性磷酸酶（ALP）抗原充分進(jìn)行結(jié)合，ALP可催化4-甲基傘形酮磷酸鹽，可使其分解為熒光性物質(zhì)，通過(guò)觀察熒光性物質(zhì)含量評(píng)估抗體濃度。

1.3 評(píng)估標(biāo)準(zhǔn) MEIA法評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)熒光物質(zhì)濃度＞10IU/L時(shí)，則檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，當(dāng)熒光物質(zhì)濃度≤10IU/L時(shí)，則檢測(cè)結(jié)果為陰性。ELISA法評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：樣本吸光度或CUTOFF值＞1.0S/CO即為陽(yáng)性，樣本吸光度或CUTOFF值≤1.0S/CO即為陰性。

1.4 觀察指標(biāo) ①比較ELISA法及MEIA法兩種檢測(cè)方法血清HBsAb陽(yáng)性率。取1份血清HBsAb標(biāo)本，經(jīng)ELISA法和MEIA法檢測(cè)三次，取三次檢查結(jié)果平均值。②比較ELISA法及MEIA法血清HBsAb最低檢測(cè)結(jié)果。對(duì)血清HBsAb標(biāo)本進(jìn)行倍比稀釋，分別采用ELISA法和MEIA法檢測(cè)三次，取三次檢查結(jié)果平均值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示、χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ELISA法及MEIA法血清HBsAb陽(yáng)性率392份標(biāo)本經(jīng)MEIA法檢出血清HBsAb標(biāo)本陽(yáng)性332份，陽(yáng)性率為84.69%，經(jīng)ELISA法檢出血清HBsAb標(biāo)本陽(yáng)性284份，陽(yáng)性率為72.45%；與ELISA法比較，MEIA法檢出血清HBsAb陽(yáng)性率明顯提高（P＜0.05），見(jiàn)附表1。

附表1 ELISA法及MEIA法血清HBsAb陽(yáng)性率比較[n(%)]

2.2 比較ELISA法及MEIA法血清HBsAb最低檢測(cè)結(jié)果 MEIA法血清HBsAb最低檢測(cè)水平低于ELISA法（P＜0.05），可見(jiàn)MEIA法的靈敏度較高，見(jiàn)附表2。

附表2 ELISA法及MEIA法HBsAb最低檢測(cè)結(jié)果比較

3 討論

當(dāng)前，臨床通過(guò)ELISA法對(duì)血清HBsAb進(jìn)行檢測(cè)，以達(dá)到對(duì)接種乙肝疫苗的效果判斷，但通過(guò)長(zhǎng)期試驗(yàn)及臨床數(shù)據(jù)顯示，其重復(fù)性較高、靈敏度較差、且無(wú)法對(duì)血清HBsAb水平進(jìn)行定量檢測(cè)，具有較大局限性[4]。因此，尋找一種靈敏、高效、可定量檢測(cè)血清HBsAb水平的方法評(píng)估乙肝疫苗接種效果具有重要意義。

本研究通過(guò)MEIA法及ELISA法對(duì)嬰幼兒乙肝疫苗全程接種后血清HBsAb水平進(jìn)行檢查對(duì)比發(fā)現(xiàn)，MEIA法檢查血清HBsAb陽(yáng)性率84.69%高于ELISA法的72.45%，MEIA法檢查血清HBsAb最低檢測(cè)水平低于ELISA法（P＜0.05），可見(jiàn)采用MEIA法對(duì)接種乙肝疫苗后血清HBsAb進(jìn)行定量檢測(cè)具有較高的陽(yáng)性檢出率，且靈敏度較高。孟改利等[5]學(xué)者在MEIA法檢測(cè)血清HBsAb水平中指出，MEIA法較ELISA法具有較高的HBsAb陽(yáng)性率，且靈敏度也較高，與本研究結(jié)果一致。本研究通過(guò)兩種不同方法對(duì)比發(fā)現(xiàn)，ELISA法需抗體、抗原于固相表面充分進(jìn)行反應(yīng)，而參與反應(yīng)的僅為孔底接觸部分，而其他部分抗體或抗原需進(jìn)行擴(kuò)散處理，使得固相抗體、抗原進(jìn)行充分接觸，這一過(guò)程稱為逐漸平衡過(guò)程，因此檢測(cè)操作時(shí)間較長(zhǎng)；同時(shí)由于ELISA法需進(jìn)行手動(dòng)操作，需將結(jié)合狀態(tài)抗原、抗體及游離狀態(tài)抗原、抗體進(jìn)行準(zhǔn)確分離，因此需反復(fù)進(jìn)行洗板、加樣等操作，容易引發(fā)人為誤差，使得準(zhǔn)確度、靈敏度較低。MEIA法利用熒光酶免技術(shù)方法，采用全自動(dòng)酶免分析儀對(duì)血清HBsAb含量進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定，使得檢測(cè)標(biāo)本從開(kāi)始加樣操作處理直到得出結(jié)果，均由儀器完成，進(jìn)而降低人為操作造成的誤差，達(dá)到快速、自動(dòng)、準(zhǔn)確、定量的檢查，提高檢測(cè)準(zhǔn)確性及靈敏性[6]。

綜上所述，采用MEIA法對(duì)接種乙肝疫苗后血清HBsAb進(jìn)行定量檢測(cè)具有較高的陽(yáng)性檢出率，可對(duì)血清HBsAb濃度變化進(jìn)行觀察，進(jìn)而判斷免疫效果，同時(shí)還可根據(jù)血清HBsAb濃度變化確定下次接種疫苗時(shí)間。