姜西迪,阮崇美,劉 燦,徐艷麗,蒲 越,張佳佳,張家龍,熊永潔,李 靜
(安徽科技學(xué)院動物科學(xué)學(xué)院,安徽 鳳陽 233100)
隨著人們科學(xué)養(yǎng)犬意識的提高,許多主人會給犬進(jìn)行絕育手術(shù)。公犬絕育術(shù)損傷小,可預(yù)防犬的睪丸炎、前列腺疾病等生殖系統(tǒng)疾?。?-2],可改變?nèi)牟涣剂?xí)性,是動物醫(yī)院中常見的小手術(shù)。國內(nèi)和國外已經(jīng)有大量的研究報告稱,犬絕育后,體重出現(xiàn)上升的趨勢,還有可能出現(xiàn)肥胖的現(xiàn)象[3-4]。犬的去勢術(shù)指的就是切除公犬的睪丸、附睪和部分輸精管。去勢手術(shù)雖然成本低,操作簡單,但會影響犬的生長和發(fā)育[5]。脂肪的代謝過程受遺傳因素、生理生化因素(激素、酶)和營養(yǎng)水平因素的影響。研究表明,去勢術(shù)對動物的生長發(fā)育和飼料利用率有一定的影響[6],去勢術(shù)能降低睪酮的含量影響血清中脂類代謝的能力[7],生理水平的雄性激素可以抑制動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展,可以改善脂質(zhì)的代謝[8]。該試驗通過測定雄性犬去勢前后血清膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白,分析去勢術(shù)對血脂代謝的影響,為研究去勢手術(shù)對機(jī)體的影響提供參考。
酒精、碘酊、注射器、一次性采血針、真空管、常用手術(shù)器械包、麻醉藥(速眠新Ⅱ,生產(chǎn)批號:20170901)、酚磺乙胺、青霉素、蘇醒靈、離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠,型號:DL-5-B)、全自動血清生化分析儀(德國邁瑞公司,型號:BS-200)等。
試驗分去勢組和非手術(shù)組兩組,每組隨機(jī)選擇6條健康、年齡相近的雄性中華田園犬。在做去勢術(shù)前一天禁食12 h,禁飲4 h,然后稱重,頸靜脈采血,離心,制成的血清用邁瑞生化分析儀測血脂指標(biāo)。然后對去勢組中華田園犬進(jìn)行去勢手術(shù),在術(shù)后的第14天、第21天對兩組犬稱重并進(jìn)行采血,離心,用邁瑞生化分析儀測血脂指標(biāo)。
12只健康、體重相近的雄性中華田園犬,年齡在1~2歲,飼養(yǎng)于安徽科技學(xué)院實驗動物中心,飼喂鼎新犬糧(生產(chǎn)廠家:保定市寵康寵物飼料制造有限公司)。其營養(yǎng)成分:粗蛋白≥28%,粗纖維≤4.5%,粗脂肪≥16%,鈣≥1.1%,粗灰分≤9%,磷≥0.9%,亞油酸≥1.4%。每天飼喂2次,籠養(yǎng),自由飲水,進(jìn)行常規(guī)驅(qū)蟲和免疫。
術(shù)前對犬進(jìn)行全身檢查,檢查各項生理指標(biāo)是否正常,然后進(jìn)行全身麻醉,麻醉后,仰臥保定,兩后肢外展,充分暴露術(shù)部,陰囊部剪毛、清洗、消毒,參考《獸醫(yī)外科手術(shù)學(xué)》[9]教材中的操作方法,在陰囊最低部位的陰囊縫際向前的腹中線上,根據(jù)犬睪丸大小做2~3 cm切口。左手指將兩側(cè)睪丸推擠到陰囊底部繃緊,切開皮膚和皮下組織,顯露鞘膜,推頂一側(cè)陰囊后方,使睪丸連同鞘膜向切口內(nèi)突出,并使鞘膜繃緊,切開鞘膜,使睪丸從鞘膜切口內(nèi)露出,剪開附睪尾韌帶,將睪丸系膜撕開,繼續(xù)牽引睪丸,充分顯露精索,用“三鉗法”鉗夾精索:在精索的近心端鉗夾第一把止血鉗,在第一把止血鉗的近睪丸側(cè)的精索上,緊靠第一把止血鉗鉗夾第二、三把止血鉗,于第一把止血鉗處進(jìn)行結(jié)扎,當(dāng)?shù)谝粋€結(jié)扣接近打緊時,松去第一把止血鉗,并使線結(jié)于第一把止血鉗的精索壓痕處打方結(jié),為更加牢固也可打成三疊結(jié)。在第二與第三把止血鉗之間切斷精索,用鑷子夾持少許精索組織,松開第二把止血鉗,確認(rèn)無出血后松鑷子,還納精索,另一側(cè)同法,間斷縫合皮下組織和皮膚,保持傷口的清潔,避免犬舔咬傷口,防止出現(xiàn)感染。手術(shù)過后,要注意犬陰囊的變化,術(shù)后在安靜的環(huán)境下5~7 d可以痊愈。非手術(shù)組正常飼養(yǎng)。
采用頸靜脈采血的方法,先扎口保定,再側(cè)臥位保定,用電動剃毛刀將其頸部的被毛剃去,使用酒精、碘酒消毒采血位置的皮膚。拉直犬的頸部,使犬的頭部盡量抬高,再用左手大拇指壓住頸部下方靜脈,直至靜脈充分暴露,然后右手拿一次性采血針,針頭由下而上沿著血管扎入,防止因為犬的身體晃動而產(chǎn)生滑動。使用無抗凝劑采血管每條犬各取5 mL血,用離心機(jī)離心,制成的血清在-70℃下保存。
試驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理,結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用One-Way ANOVA數(shù)據(jù)分析方法進(jìn)行比較,P<0.05表明差異顯著,P<0.01表明差異極顯著。
由表1可見,去勢組的甘油三酯在去勢第21天顯著(P<0.05)高于非手術(shù)組。與第0天相比,去勢組的甘油三酯在去勢第14天無顯著(P>0.05)變化,在去勢第21天顯著(P<0.05)升高。
表1 去勢術(shù)對雄性犬甘油三酯的影響 單位:mmol/L
由表2可見,與非手術(shù)組相比,去勢組犬去勢第21天總膽固醇顯著(P<0.05)低于非手術(shù)組。與第0天相比,去勢組的總膽固醇在去勢第14天無顯著(P>0.05)差異,在去勢第21天顯著(P<0.05)下降。
表2 去勢術(shù)對雄性犬總膽固醇的影響 單位:mmol/L
由表3可見,與非手術(shù)組相比,去勢組HDL在去勢第14天、第21天顯著(P<0.05)下降。與第0天相比,去勢組的HDL在去勢第14天、第21天顯著(P<0.05)下降。
表3 去勢術(shù)對雄性犬高密度脂蛋白的影響 單位:mmol/L
由表4可見,與非手術(shù)組相比,去勢組LDL在去勢第14天顯著(P<0.05)升高,在去勢第21天極顯著(P<0.01)升高。與第0天相比,去勢組LDL在去勢第14天顯著(P<0.05)升高,在去勢第21天極顯著(P<0.01)升高。
表4 去勢術(shù)對雄性犬低密度脂蛋白的影響 單位:mmol/L
由表5可見,去勢組與非手術(shù)組中華田園犬的體重差異不顯著。
表5 去勢術(shù)對體重的影響 單位:kg
成年犬甘油三酯正常值范圍為0.25~2.50mmol/L,成年犬膽固醇正常值范圍為2.75~8.00 mmol/L。動物體內(nèi)血清甘油三酯和總膽固醇含量的增減可作為反映脂肪代謝和肝功能的指標(biāo)[10]。高脂血癥是指由于脂質(zhì)代謝紊亂而導(dǎo)致血清中甘油三酯、總膽固醇及低密度脂蛋白中的一種或多種血脂水平超過正常范圍的疾病。目前關(guān)于去勢和激素與脂代謝水平之間影響關(guān)系的研究很多,徐久平[11]發(fā)現(xiàn)對前列腺癌患者做完去勢手術(shù)后,都出現(xiàn)血脂代謝異常的現(xiàn)象,而且雄性激素的含量也下降,可能會導(dǎo)致這些病人的心血管疾病的發(fā)生率增加。張興隆等[12]對去勢皖南牛的研究表明,去勢能降低皖南牛血液睪酮含量,短期內(nèi)抑制皖南牛的體重與體尺增加。宋天增等[13]對去勢綿羊的研究表明,去勢能夠降低雄性崗巴綿羊血液睪酮含量。任國慶等[14]研究發(fā)現(xiàn),生理水平的睪酮可通過調(diào)節(jié)血脂和增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力對抗動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展。雄性激素在動物體內(nèi)脂肪分布調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用[15],可促進(jìn)脂肪的分解過程,雄性激素影響體脂分布、脂質(zhì)代謝和脂肪細(xì)胞功能[16]。
表1和表4顯示手術(shù)組的甘油三酯和低密度脂蛋白的含量出現(xiàn)上升,原因很可能是手術(shù)降低了雄性激素的分泌水平,從而出現(xiàn)公犬的活動量減少,進(jìn)而消耗的能量減少,沒有消耗的能量就會以脂肪的形式儲存起來,從而發(fā)生體重的增加。一般來說年齡越大的犬,高密度脂蛋白含量會越低,運(yùn)動量減少,也會降低高密度脂蛋白的含量。該試驗中,去勢組的總膽固醇水平在手術(shù)后第21天呈現(xiàn)顯著下降,與類似研究結(jié)果不一致,可能與犬的品種、年齡、日糧營養(yǎng)與運(yùn)動量有關(guān)。表5顯示去勢組與非手術(shù)組的體重差異不顯著,可能因為試驗的周期較短。HDL是公認(rèn)的能夠抵抗動脈硬化的有益因子,其能抑制平滑肌細(xì)胞的增生,且能降低低密度脂蛋白被細(xì)胞攝入的速率。表4顯示,HDL降低,是因為其與低密度脂蛋白、膽固醇有生理上的拮抗作用,故LDL升高可能與HDL下降有關(guān)。
該試驗存在的問題:因設(shè)置假手術(shù)組耗費(fèi)大量人力和物力,未設(shè)置去勢假手術(shù)組。去勢手術(shù)屬于小型手術(shù),損傷小,恢復(fù)快,由于手術(shù)造成的機(jī)體影響不大,建議將來的研究可增加去勢假手術(shù)組。
該試驗證明,去勢術(shù)會影響機(jī)體脂類的代謝,導(dǎo)致去勢組甘油三酯升高,總膽固醇和高密度脂蛋白下降,低密度脂蛋白上升。