劉海龍,高 磊,張治方,呂天元,張亞輝,楊 鑫,梁玉磊

(1. 中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第九二六醫(yī)院，云南 開遠(yuǎn) 661699；2. 河北中醫(yī)學(xué)院，河北 石家莊 050200)

運(yùn)動(dòng)疲勞是由運(yùn)動(dòng)引起的機(jī)體生理改變而導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)能力暫時(shí)下降的現(xiàn)象，最初研究圍繞體育運(yùn)動(dòng)開展，抗運(yùn)動(dòng)性疲勞是為了提高運(yùn)動(dòng)員的競技成績。隨著研究不斷深入，應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)大，臨床實(shí)踐中，部分康復(fù)患者由于恢復(fù)心切，常因自主超強(qiáng)度訓(xùn)練，引發(fā)運(yùn)動(dòng)性疲勞，導(dǎo)致治療方案不能正常開展，影響療效。快速消除運(yùn)動(dòng)性疲勞，對(duì)康復(fù)訓(xùn)練患者同樣具有重要意義。近些年來針灸在抗運(yùn)動(dòng)性疲勞方面的應(yīng)用取得了一定成果[1-2]，艾灸神闕穴也具有緩解運(yùn)動(dòng)疲勞的作用[3-7]，但其相關(guān)作用機(jī)制仍不明確。本研究以一次性力竭運(yùn)動(dòng)大鼠為研究對(duì)象，模擬過度康復(fù)訓(xùn)練患者，觀察不同干預(yù)方法對(duì)一次性力竭運(yùn)動(dòng)后4 h大鼠血清尿素氮(BUN)、乳酸脫氫酶(LDH)、血乳酸(BLA)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)、皮質(zhì)醇、睪酮水平及睪酮/皮質(zhì)醇值的影響，以探討艾灸神闕穴治療運(yùn)動(dòng)疲勞的價(jià)值及可能作用機(jī)制，為該法的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組 清潔級(jí)SD大鼠50只，雄性，體質(zhì)量(200±10)g，購于河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SCXK(冀)2013-1-003。按照隨機(jī)數(shù)字表將大鼠隨機(jī)分為空白組、對(duì)照組、力竭組、神闕組、非經(jīng)非穴組，每組10只，分籠飼養(yǎng)，每籠5只。飼養(yǎng)室溫度保持在20～24 ℃，濕度50%左右，明暗各12 h(光照7:00—19:00)，所有動(dòng)物自由進(jìn)食水。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d，并分別于第3天、第6天適應(yīng)游泳1次，3 min/次。實(shí)驗(yàn)遵循動(dòng)物管理相關(guān)規(guī)定。

1.2主要試劑與儀器 BUN試劑盒、Cr試劑盒(長春匯力生物技術(shù)有限公司，中國)，LDH試劑盒、BLA試劑盒、CK試劑盒(南京建成生物工程研究所，中國)，皮質(zhì)醇試劑盒、睪酮試劑盒(天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司，中國)。自制恒溫水箱(Φ200 cm×80 cm)；細(xì)艾條(Φ7 mm×11.7 cm,河南南陽漢醫(yī)艾絨有限公司，中國)；自制艾灸專用大鼠盒[8](國家實(shí)用新型專利ZL201120193244.8)；TDL-5-A型離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠，中國)；AU400全自動(dòng)生化分析儀[克勒格瓦尼(上海)分析儀器有限公司，中國]。

1.3模型制備 適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，參照文獻(xiàn)[9]建立游泳力竭模型。除空白組、對(duì)照組外，其余組大鼠均置于恒溫水箱[水深50 cm，水溫(30±2) ℃]，尾根部束體質(zhì)量5%的鉛皮(套在距基1～5 cm處)，行一次性力竭運(yùn)動(dòng)。力竭標(biāo)準(zhǔn):大鼠游泳動(dòng)作明顯失調(diào)，不能再堅(jiān)持；下沉水過鼻尖5 s，無力返回水面。造模過程中，力竭組和非經(jīng)非穴組各有1只大鼠死亡。

1.4干預(yù)方法 神闕組：力竭游泳結(jié)束后，即刻將大鼠置于艾灸專用大鼠盒中，溫和灸神闕穴15 min。非經(jīng)非穴組：力竭游泳結(jié)束后，即刻將大鼠置于艾灸專用大鼠盒中，溫和灸非經(jīng)非穴點(diǎn)(雙側(cè)脅下髂嵴上25 mm，后正中線旁開20 mm處)[10]15 min。力竭組：力竭游泳結(jié)束后，即刻將大鼠置于艾灸專用大鼠盒中15 min，不予治療干預(yù)。對(duì)照組：將大鼠置于艾灸專用大鼠盒中，溫和灸神闕穴15 min。空白組：將大鼠置于艾灸專用大鼠盒中15 min，不施任何干預(yù)。

1.5觀察指標(biāo)

1.5.1力竭時(shí)間 由專人記錄各造模大鼠力竭游泳時(shí)間，精確到0.1 s。

1.5.2血清生化指標(biāo) 力竭游泳結(jié)束后4 h，各組大鼠行乙醚輕度麻醉，然后斷頭取血約5 mL，于4 ℃，3 000 r/min離心10 min (離心半徑8 cm), 之后取上清液，-80 ℃冷凍保存待測。采用全自動(dòng)生化分析儀測定血清BUN、LDH、BLA、Cr、CK、皮質(zhì)醇、睪酮水平，所有測試由河北中醫(yī)學(xué)院科研中心完成。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠力竭游泳時(shí)間比較 力竭組大鼠力竭游泳時(shí)間為(425.33±33.61)s，非經(jīng)非穴組為(426.15±34.07)s，神闕組為(423.04±33.81)s，3組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2各組大鼠血清BLA、Cr、BUN、CK、LDH水平比較 與空白組比較，對(duì)照組大鼠血清BLA、Cr、BUN、CK、LDH水平均無明顯變化(P均>0.05)，力竭組大鼠血清BLA、BUN、CK、LDH水平均明顯升高而Cr水平明顯降低(P均<0.05)；非經(jīng)非穴組大鼠血清BLA、Cr、BUN、CK、LDH水平與力竭組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，神闕組大鼠血清BLA、BUN、CK、LDH水平均明顯低于力竭組和非經(jīng)非穴組(P均<0.05)，Cr水平均明顯高于力竭組和非經(jīng)非穴組(P均<0.05)。見表1。

2.3各組大鼠血清血睪酮、皮質(zhì)醇含量及睪酮/皮質(zhì)醇值比較 與空白組比較，對(duì)照組大鼠血清睪酮、皮質(zhì)醇水平及睪酮/皮質(zhì)醇值均無明顯變化(P均>0.05)，力竭組大鼠血清睪酮水平及睪酮/皮質(zhì)醇值均明顯降低而皮質(zhì)醇水平明顯升高(P均<0.05)；非經(jīng)非穴組大鼠血清睪酮、皮質(zhì)醇水平及睪酮/皮質(zhì)醇值與力竭組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，神闕組大鼠血清睪酮水平及睪酮/皮質(zhì)醇值均明顯高于力竭組和非經(jīng)非穴組(P均<0.05)，皮質(zhì)醇水平均明顯低于力竭組和非經(jīng)非穴組(P均<0.05)。見表2。

表1 各組大鼠血清BLA、Cr 、BUN、CK、LDH水平比較

表2 各組大鼠血清血睪酮、皮質(zhì)醇水平及睪酮/皮質(zhì)醇值比較

3 討 論

疲勞的產(chǎn)生與長時(shí)間或高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致體內(nèi)能量物質(zhì)消耗、乳酸等代謝產(chǎn)物蓄積等因素有關(guān)[11]。游泳是強(qiáng)迫性消耗性運(yùn)動(dòng)，游泳時(shí)間的長短可反映機(jī)體組織、臟器的健康狀況，反映機(jī)體綜合的生理活力[12]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，造模各組大鼠力竭游泳時(shí)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明各組大鼠的生理活力均衡。

糖原是機(jī)體能源儲(chǔ)備的主要形式，主要存在于骨骼肌和肝臟，肌糖原主要為肌肉運(yùn)動(dòng)提供能量。一般認(rèn)為，機(jī)體運(yùn)動(dòng)早期，肌糖原分解釋放三磷酸腺苷(ATP)，隨后逐漸分解脂肪，當(dāng)運(yùn)動(dòng)進(jìn)一步持續(xù)時(shí)，機(jī)體便分解蛋白質(zhì)，以彌補(bǔ)肌肉能量的不足。BLA是肌糖無氧代謝產(chǎn)物，其濃度升高，使血液pH值下降，機(jī)體細(xì)胞工作能力下降，其是反映機(jī)體疲勞程度的重要指標(biāo)之一[13]。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)被消耗，肌肉組織分解加強(qiáng)，肌肉萎縮，Cr生成減少[14]，同時(shí)蛋白質(zhì)分解，代謝產(chǎn)生BUN。BUN含量隨運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的增加而增加，其也是判斷機(jī)體疲勞程度指標(biāo)之一[15]。CK主要分布在心肌、骨骼肌和腦組織中[16]，血清CK主要源于骨骼肌，過度訓(xùn)練后，CK從細(xì)胞內(nèi)大量溢出入血[17]，導(dǎo)致組織內(nèi)ATP合成障礙，肌肉收縮能力降低, 運(yùn)動(dòng)能力下降。血清LDH主要源于骨骼肌，當(dāng)組織細(xì)胞受到破壞時(shí)，LDH從細(xì)胞內(nèi)溢出進(jìn)入血液，引起血清LDH活性升高，其也被認(rèn)為是判斷運(yùn)動(dòng)后肌肉損傷程度的重要指標(biāo)[18-19]。

睪酮由下丘腦-垂體-性腺軸釋放，與運(yùn)動(dòng)能力、肌肉力量的增長和疲勞恢復(fù)等有密切關(guān)系，其可促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成，尤其是肌肉蛋白質(zhì)的合成，減弱氨基酸分解代謝，又可通過提高肌肉糖原合成能力，增加其糖原的儲(chǔ)備，對(duì)于大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后能源物質(zhì)的補(bǔ)充恢復(fù)起到至關(guān)重要的作用[20]。研究表明，短時(shí)間高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后4～6 h睪酮濃度達(dá)到最低點(diǎn)[21]。皮質(zhì)醇由下丘腦-垂體-腎上腺軸釋放，在運(yùn)動(dòng)中主要維持機(jī)體糖代謝正常，促進(jìn)肝外組織蛋白分解，保持血糖濃度穩(wěn)定，為運(yùn)動(dòng)提供能量[22]?？偟膩碚f，血睪酮濃度反映體內(nèi)合成代謝的情況, 皮質(zhì)醇濃度反映體內(nèi)分解代謝的情況，通常把睪酮與皮質(zhì)酮比值作為衡量合成-分解代謝平穩(wěn)指標(biāo)，其可以反映機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力及疲勞程度[23]。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組血清BLA、Cr、BUN、CK、LDH、睪酮、皮質(zhì)醇水平及睪酮/皮質(zhì)醇值均無明顯變化，說明單純艾灸神闕穴對(duì)正常機(jī)體能量代謝及血睪酮、皮質(zhì)醇的影響不顯著；非經(jīng)非穴組上述各指標(biāo)與力竭組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明單純艾灸療法對(duì)機(jī)體刺激作用也不明顯；神闕組血清BLA、BUN、LDH、CK、皮質(zhì)醇水平明顯低于力竭組，Cr、睪酮水平及睪酮/皮質(zhì)醇值明顯高于力竭組，說明艾灸神闕穴可通過調(diào)節(jié)能量物質(zhì)代謝及睪酮、皮質(zhì)醇水平以改善機(jī)體的疲勞狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)為臨床采用艾灸神闕穴方法治療運(yùn)動(dòng)疲勞提供了一定實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。