王海營(yíng),駱賢群,張遠(yuǎn)安
(湛江市畜牧技術(shù)推廣站,廣東 湛江 524094)
豬流行性腹瀉(PED)是流行范圍很廣的一種急性腸道傳染病,引起此病的病原為豬流行性腹瀉病毒(PEDV),我國(guó)首發(fā)是在1971年的上海市,目前,已在華南、華東和華北等地區(qū)廣泛流傳,造成大批仔豬死亡,損失巨大。發(fā)病后典型的癥狀為嘔吐、腹瀉,而且常與豬傳染性胃腸炎、豬圓環(huán)病毒混合感染,對(duì)養(yǎng)豬業(yè)的威脅巨大。
PEDV屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬,近似球形,表面有囊膜,囊膜上有纖突,向四周呈放射性分布。PEDV對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)力不強(qiáng),甲酚、2%的氫氧化鈉、福爾馬林溶液等一般的消毒藥就可以將其殺死。由于此病在傳播過(guò)程中常常伴隨著基因的變異,給疾病的預(yù)防工作帶來(lái)了很大的困難。經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn),PEDV在變異過(guò)程中宿主沒(méi)有發(fā)生變化,PEDV變異的主要分子基礎(chǔ)為RNA的點(diǎn)突變、缺失、插入以及不同毒株之間的同源重組,這就造成PEDV變異類型多,其中流行于我國(guó)的PEDV在S基因的變異最為明顯。
養(yǎng)豬場(chǎng)中此病的主要傳染源為發(fā)病豬和帶毒豬。病毒通過(guò)運(yùn)輸病豬或帶毒豬的車輛、被病毒污染的飼料、鞋或者其他的污染物傳入豬群,在經(jīng)過(guò)消化道感染健康豬。豬傳染性腹瀉的發(fā)病具有季節(jié)性,寒冷的冬末春初最易發(fā)病,主要集中在11月至次年的2月,夏季或者秋季偶有發(fā)病。PED主要呈暴發(fā)性流行,已經(jīng)發(fā)生過(guò)此病的豬群,第二年一般不會(huì)再發(fā)生,但是也有少數(shù)的豬場(chǎng),每年的冬春季節(jié)都有架子豬、斷奶仔豬等發(fā)病。豬場(chǎng)內(nèi)一頭豬發(fā)病后,大約1周左右同圈或相鄰豬圈的豬就會(huì)相繼發(fā)病,病程持續(xù)2~3周結(jié)束。
各個(gè)年齡段的豬都對(duì)PEDV有易感性,但是感染程度不同,7日齡以內(nèi)的仔豬最易感染,發(fā)病率最高,臨床癥狀也最明顯。哺乳仔豬、架子豬、育肥豬發(fā)病率高達(dá)100%,母豬的發(fā)病率相對(duì)較低,大約為15%~80%。我國(guó)從1995年開(kāi)始就運(yùn)用豬流行性腹瀉和傳染性胃腸炎二聯(lián)滅活苗或二聯(lián)弱毒苗就行預(yù)防免疫,取得了很大的成效,但是從2006年起,在免疫豬群中又開(kāi)始了PED的流行蔓延。豬流行性腹瀉和傳染性胃腸炎的臨床癥狀很相似,從臨床上很難區(qū)別,而且混合感染的病例增多,雖然已經(jīng)應(yīng)用疫苗免疫,但是仍然會(huì)出現(xiàn)爆發(fā)流行。
此病的潛伏期很短,新生仔豬為24~36h,育肥豬為48h。發(fā)病初期體溫升高,精神頹廢,沒(méi)有食欲,出現(xiàn)腹脹、嘔吐,然后出現(xiàn)劇烈的水樣腹瀉,糞便顏色為黃綠色、灰黃色或灰色,惡臭難聞,內(nèi)含有黃白色的凝乳塊并混有氣泡,腹瀉嚴(yán)重的時(shí)候幾乎全部為水。年齡越小癥狀越明顯,尤其是7d以內(nèi)的仔豬經(jīng)過(guò)3~4d的腹瀉,會(huì)導(dǎo)致脫水死亡,病死率高達(dá)50%。出生后隨即感染發(fā)病的病死率高達(dá)100%。斷奶豬、育肥豬、母豬的病程長(zhǎng),大約為7d左右,經(jīng)過(guò)治療會(huì)逐漸康復(fù),少數(shù)病豬會(huì)發(fā)展為僵豬。成年豬癥狀不嚴(yán)重,數(shù)天可以康復(fù)。
發(fā)病豬的主要病理變化在小腸,腸內(nèi)充滿淡黃色液體,腸粘膜變薄,有出血點(diǎn),小腸的絨毛變短,甚至有的萎縮消失。胃內(nèi)沒(méi)有東西,或有大量的黃白色凝乳塊,或有淡黃色液體。
豬流行性腹瀉與其他病毒性腹瀉病的臨床癥狀和病理特征很相似,僅憑臨床經(jīng)驗(yàn)很難做出準(zhǔn)確的判斷,容易造成誤診,要想確診還要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。
3.2.1 ELISA法ELISA是 診 斷PED的最常用的方法。ELISA方法特異性好,與TGEV、IBV等其他的病毒沒(méi)有交叉反應(yīng)??梢詸z測(cè)糞便中PEDV抗原或者血清中PEDV抗體,檢測(cè)迅速、方便,已經(jīng)廣泛應(yīng)用。
3.2.2 免疫熒光法 直接免疫熒光法(FAT)是目前應(yīng)用較為廣泛的特異性診斷方法。用病死豬的小腸等病料做成冷凍切片或抹片,采用FAT來(lái)檢查,有較高的檢出率,一般可達(dá)91.4%,結(jié)果比較準(zhǔn)確可靠。
3.2.3 間接血凝試驗(yàn) 間接血凝試驗(yàn)也是特異性較高的PED血清學(xué)診斷方法,此種方法和熒光抗體染色法相比較來(lái)說(shuō),前者的敏感性更強(qiáng)。
3.2.4 PCR診斷法2007年,依據(jù)TaqMan探針熒光定量分析原理,Kim O等人首次建立了多重實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法,同時(shí)檢測(cè)了豬傳染性胃腸炎病毒和豬流行性腹瀉病毒,對(duì)潛伏、隱性感染的豬流行性腹瀉病例給出了快速診斷方法。這種方法可以檢測(cè)出患病組織中的病毒含量,因此對(duì)早期診斷和病勢(shì)的判斷有積極的意義。此方法敏感性高,污染少,用時(shí)短,已經(jīng)成為檢測(cè)病原的重要方法之一。
3.2.5 膠體金抗體檢測(cè)方法 隨著生物技術(shù)的發(fā)展,人們將膠體金技術(shù)引入到了免疫學(xué)之中,經(jīng)過(guò)多年的改進(jìn)和發(fā)展,逐漸形成中膠體金免疫層析診斷法,并應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。2011年,張利勃等人運(yùn)用膠體金技術(shù)對(duì)豬流行性腹瀉疾病進(jìn)行了檢測(cè),這種檢測(cè)方法敏感性、準(zhǔn)確率高,可以在基層防疫檢疫人員中廣泛推廣應(yīng)用。