王子璇，蔡亞瑋，郭明磊，王學(xué)靜，陳立功＊，王麗娟，戴美麗，張曉云

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 071001；2. 平山縣西柏坡五豐蛋雞養(yǎng)殖專業(yè)合作社 050400；3.河北省畜牧獸醫(yī)研究 071000；4.河北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳 050000；5.大廠回族自治縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 065300；6.遷西縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 064300）

支氣管堵塞僅為家禽疾病癥候表現(xiàn)， 并非單一性疾病，造成其形成的原因是多方面的，并且有許多誘導(dǎo)和疊加因素，必需進(jìn)行系統(tǒng)分析[1]，才能有效診斷與防制。 該病發(fā)病快，病程較長(zhǎng)，雞群發(fā)病率高，治療效果不顯著，死亡率較高，臨床剖檢多為支氣管堵塞導(dǎo)致窒息死亡， 通常給白羽肉雞養(yǎng)殖行業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失。

1 案例背景

2019 年12 月， 河北省保定市某14 棟42 萬只規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)21 日齡白羽肉雞開始陸續(xù)發(fā)病，病初雞群表現(xiàn)為甩鼻、咳嗽等呼吸道癥狀，尤以夜間為甚。少有稀便。2～3d 后雞群癥狀加重，表現(xiàn)為呼嚕、怪叫、伸頸張嘴等呼吸癥狀。 少數(shù)病雞流淚、面部腫脹，有時(shí)可見肉雞突然尖叫，仰臥死亡，且死亡多為偏大雞只，常規(guī)治療效果不佳。 隨著肉雞日齡的增加， 死亡率自發(fā)病后不斷提高，雞群采食量逐漸下降，30 日齡時(shí)各棟雞舍肉雞日死亡淘率達(dá)1%以上。

2 臨床癥狀[2]

能夠引起雞呼吸道癥狀的疾病主要包括雞新城疫 （美國(guó)型）（ND）、傳染性鼻炎（IC）、雞慢性呼吸道病（MG）、傳染性支氣管炎（IB）（呼吸型）等。

ND 最明顯的癥狀為食欲降低或消失， 感到口渴， 精神不濟(jì)，不愿走動(dòng)，垂直縮頸或翅膀下垂，張口呼吸，眼睛半開或全閉，與睡著的樣子相似。

IC 的臨床癥狀是在鼻道和鼻竇的上呼吸道上有漿液性或黏液性分泌物流出，并時(shí)常伴隨著面部水腫。 患有此病的雞的下呼吸道可聽到啰音，病雞一般會(huì)出現(xiàn)腹瀉、食欲降低、飲水量下降等現(xiàn)象。

MG 是由雞毒支原體的感染引起的， 此病的特征為呼吸啰音、咳嗽、流鼻涕，結(jié)膜炎。

IB 是由傳染性支氣管炎病毒引起的支氣管堵塞。 肉雞的臨床癥狀一般為15～30 日齡易發(fā)病， 通常在10 日齡后表現(xiàn)甩鼻、咳嗽癥狀。 雞群發(fā)病初期，采食量停止增加或者稍有降低。 大部分病雞精神狀態(tài)較好，但也有少數(shù)病雞出現(xiàn)呆立不動(dòng)、逆毛和排泄黃色糞便的癥狀。 少數(shù)病雞面部腫脹、眼睛流淚。 如雞癥狀嚴(yán)重，會(huì)表現(xiàn)出伸頸張口呼吸，且大部分在短時(shí)間內(nèi)死亡。 夜晚比白天更易死亡， 且在雞群中往往是體型較大的肉雞因支氣管阻塞而先死亡，往往在劇烈運(yùn)動(dòng)中突發(fā)死亡[3]。

3 剖檢病變

為了進(jìn)一步了解病因，取20 只新鮮死雞進(jìn)行剖檢，重點(diǎn)觀察與呼吸道病癥相關(guān)氣管、支氣管、肺臟等呼吸系統(tǒng)的變化，并對(duì)其他各內(nèi)臟器官進(jìn)行病變觀察，記錄如下。

圖1 氣管出血見黏液

圖2 氣管和支氣管內(nèi)見干酪樣物

病雞面部腫脹（3/20），鼻腔見黏液（9/20），氣管腔內(nèi)見黏液（9/20），氣管下端黏膜出血（12/20），支氣管內(nèi)見質(zhì)地堅(jiān)實(shí)的黃白色干酪樣物（15/20），肺臟局部顏色呈暗紅色（8/20），或有泡沫樣分泌物（7/20），腺胃黏膜輕微出血（6/20），小腸黏膜輕度出血（6/20）， 盲腸扁桃體出血（13/20），直腸黏膜出血（8/20），腎臟腫脹、顏色呈暗紅色（9/20）。 氣囊炎（7/20）、心包炎（5/20）和肝周炎（4/20）。

從剖檢病變可以看出，氣管下端黏膜出血、支氣管內(nèi)見質(zhì)地堅(jiān)實(shí)的黃白色干酪樣的雞只比例均大于50%，另外部分病雞表現(xiàn)氣囊炎、心包炎和肝周炎等細(xì)菌性感染病變，綜合分析后懷疑雞群發(fā)生了傳染性支氣管炎（和或禽流感）和大腸桿菌病的混合感染。 為進(jìn)一步了解病癥，需對(duì)病毒與細(xì)菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 病毒PCR 檢測(cè)

無菌操作采取具有典型病變的肉雞氣管和支氣管病料， 進(jìn)行病毒的分離與鑒定按常規(guī)方法進(jìn)行病毒RNA 的提取。按試劑盒說明書或文獻(xiàn)規(guī)定的方法分別進(jìn)行AIV (H5、H7、H9 亞型) 、NDV 和IBV 的RT-PCR 檢測(cè)。

4.2 細(xì)菌分離與鑒定

無菌操作采取具有典型病變的肉雞氣管和支氣管內(nèi)容物，分別接種至十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板 （用于綠膿桿菌的培養(yǎng)）、麥康凱瓊脂平板（大腸桿菌的培養(yǎng)）、伊紅美藍(lán)瓊脂平板（大腸桿菌選擇性分離與培養(yǎng)）和甘露醇氯化鈉瓊脂（金黃色葡萄球菌）平板，37℃培養(yǎng)24～48h。 挑取生長(zhǎng)的典型菌落進(jìn)行純培養(yǎng)；純培養(yǎng)后細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)特性觀察、革蘭氏染色和形態(tài)觀察。

5 結(jié)果與討論

5.1 病毒PCR 檢測(cè)結(jié)果

電泳結(jié)果顯示采集的病料呈H9 亞型AIV 陽性，IBV 陽性，H5、H7 亞型AIV 陰性。

5.2 細(xì)菌分離與鑒定結(jié)果

細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果表明，十六烷三甲基溴化銨瓊脂、甘露醇氯化鈉瓊脂無菌生長(zhǎng)。 麥康凱瓊脂平板上初次培養(yǎng)的菌落為表面光滑、邊緣整齊、圓形隆起的紅色菌落。 伊紅美藍(lán)瓊脂平板上的菌落具有紫黑色帶金屬光澤。 且兩種平板上的菌落純培養(yǎng)物鏡檢均為兩端鈍圓的革蘭氏陰性紅色短桿菌。 根據(jù)以上可判斷分離出的細(xì)菌為大腸桿菌。

根據(jù)臨床癥狀、病理學(xué)檢查和病原學(xué)檢查結(jié)果，結(jié)合發(fā)病期該地流行病特點(diǎn)，初步判定2019 年冬季河北某養(yǎng)殖場(chǎng)白羽肉雞發(fā)生了“支氣管阻塞”，符合該病的流性特征，該雞場(chǎng)患病肉雞病料中檢測(cè)到的病原包括IBV、H9 亞型AIV 和大腸桿菌。

隨著家禽養(yǎng)殖規(guī)?；⒓s化程度越來越大，受多種因素的影響，家禽呼吸道疾病發(fā)病率逐年增加，使因 支氣管堵塞窒息而死的病例時(shí)有發(fā)生，且支氣管堵塞多由病毒、細(xì)菌等微生物的混合感染而引起，治療效果差，病程長(zhǎng)。 一般認(rèn)為由傳染性支氣管炎病毒、H9 亞型禽流感病毒、新城疫病毒等的單一或混合感染，大腸桿菌、綠膿桿菌、鏈球菌等的單一或混合感染或支原體和霉菌感染等。

本次病例實(shí)驗(yàn)室診斷由于只限于對(duì)主要懷疑病原進(jìn)行檢測(cè)，是否還存在其它病原混合感染情況還需進(jìn)一步研究。

6 支氣管堵塞防制技術(shù)

鑒于肉雞支氣管堵塞發(fā)病迅速、致死率高，對(duì)于病毒病要以預(yù)防為主，防先于治的原則，加強(qiáng)防控及診制。 在預(yù)防過程中，要了解發(fā)病原因，從源頭上降低發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。 支氣管堵塞發(fā)生的外部原因主要是病毒病的流行、環(huán)境刺激、疫苗應(yīng)激等，內(nèi)部主要原因?yàn)槿怆u自身的生理結(jié)構(gòu)[4]、機(jī)體自身的免疫性能等。 在對(duì)該病充分了解的基礎(chǔ)上，提出以下相關(guān)建議。

6.1 構(gòu)建生物安全體系，實(shí)施生物安保措施

基于疫病傳染源、傳染途徑以及易感動(dòng)物三大要素，疫病防控只要做到打破這個(gè)閉環(huán)就能有效阻斷疫病的流行。 注重生物安全體系隔離、傳播控制和環(huán)境衛(wèi)生三個(gè)主要基本要素，實(shí)施科學(xué)飼養(yǎng)、嚴(yán)格消毒[5]、增強(qiáng)肉雞抵抗力、降低易感動(dòng)物等技術(shù)手段，打造生物安全防線[6]。

6.2 提高管理措施，改善環(huán)境，減少各種應(yīng)激

加強(qiáng)環(huán)境監(jiān)控，做好清潔衛(wèi)生，合理控制溫濕度，改善雞舍內(nèi)空氣質(zhì)量，提高飼養(yǎng)管理水平。 孫靜等針對(duì)雞多發(fā)性支氣管堵塞方面研究認(rèn)為，環(huán)境方面主要是因?yàn)楦邷馗稍?、受涼、溫差過大、過速太大、密度大、空氣污濁造成誘因[7]。 那么我們就要在飼養(yǎng)管理和環(huán)境方面盡可能地排除這些誘因， 如增加雞舍內(nèi)的濕度，降低飼養(yǎng)的密度，合理設(shè)定負(fù)壓等減少各種應(yīng)激[8，9]。

6.3 控制繼發(fā)感染，進(jìn)行藥物預(yù)防

由于目前尚無有效預(yù)防IB 變體的疫苗，所以養(yǎng)雞生產(chǎn)者轉(zhuǎn)而關(guān)注大腸桿菌引起的繼發(fā)感染， 從而通過降低死亡率來降低生產(chǎn)損失。 大腸桿菌在一般情況下并不是致病菌，但可能由于氣候寒冷、通風(fēng)不良以及氨氣濃度上升，并且同時(shí)家禽發(fā)生應(yīng)激的原因，使之成為致病菌，從而對(duì)機(jī)體造成損害。 所有損害呼吸和免疫系統(tǒng)的疾病都會(huì)給大腸桿菌開道[10]。另外還要做好霉菌的防護(hù)[11]。 發(fā)病早期建議使用抗病毒中藥[12]、根據(jù)藥敏結(jié)果選擇敏感抗菌藥物、抗支原體藥物（土霉素或強(qiáng)力霉素）、抗應(yīng)激藥物（維生素C）等進(jìn)行藥物預(yù)防。

6.4 免疫接種

在飼養(yǎng)的過程中，我們要加強(qiáng)種雞的免疫，從而使雛雞擁有較高的母源抗體。 肉雞雞群要做好禽流感（H9 亞型）、IB 和ND的免疫[13]。疫苗接種是預(yù)防和控制動(dòng)物冠狀病毒病最為有效的方法，但是病毒毒株的變異非?？欤匦栝_發(fā)適應(yīng)流行毒株的疫苗開發(fā)，才能有效進(jìn)行預(yù)防[14]。

6.5 治療

在治療方面，采取藥物治療、藥物聯(lián)用、標(biāo)本兼治的用藥原則[15]，即早期控制炎癥滲出，中期促進(jìn)干酪物溶解，后期擴(kuò)張支氣管、溶解栓塞物。治療本病時(shí)應(yīng)聯(lián)合用藥，同時(shí)保肝護(hù)腎。藥物選擇的標(biāo)準(zhǔn)：一是具有消炎作用，二是能夠利用呼吸道栓塞化解，三是助肺臟恢復(fù)機(jī)能，四是無毒副、無抗藥性，五是藥物達(dá)肺臟時(shí)間要短，并能抑制病原持續(xù)性發(fā)展，修復(fù)受損器官和組織，呼吸道癥狀得以緩解[7]。