朱孟一，傅松玲*，孟 然，倪 正，張 榮，任 杰

青桐幼苗對水分脅迫的生長及生理響應

朱孟一1，傅松玲1*，孟 然1，倪 正1，張 榮2，任 杰3

(1. 安徽農(nóng)業(yè)大學林學與園林學院，合肥 230036：2. 巢湖市林業(yè)技術推廣中心，巢湖 238008；3. 安徽省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)工程研究所，合肥 230031)

青桐觀賞效果好，但對其受水分脅迫后的響應機理研究較少，制約了該物種下游產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。為了探究青桐幼苗耐水程度及作用機理，對30%田間持水量（T1）、70%田間持水量（T2）、100%田間持水量（T3）和130%田間持水量（T4）水分脅迫下的青桐幼苗生長指標（株高、莖粗、葉面積）、生物量分配（葉生物量比、莖生物量比、根生物量比）與光合指標（凈光合速率、蒸騰速率、胞間CO2濃度、氣孔導度）進行分析。結果表明，隨著水分脅迫程度的增加，幼苗的各指標表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢，當土壤達到T2條件時，幼苗各指標綜合表現(xiàn)最佳；T3條件下青桐幼苗凈光合速率最高，地上生物量分配較T2條件下高出4%；T2條件下，青桐幼苗葉面積最大，達到196.186 mm2，比葉面積最大，達到512.48，總生物量積累最多，達到17.14 g。當土壤水分達到T2條件時，最適合青桐幼苗生物量積累，可以為幼苗順利過冬提供充足的儲備碳；T4條件下脅迫時間達到10 d，幼苗生長情況出現(xiàn)拐點，脅迫前10 d內幼苗生長較快，但當水分持續(xù)性脅迫超過10 d后，幼苗生長趨勢減弱，同時萌發(fā)出氣生根用以響應淹水情況；T1條件下，對青桐幼苗影響極大，最不適合幼苗生長發(fā)育。研究結果為青桐幼苗受水分脅迫后的響應機制提供了理論基礎。

青桐；水分脅迫；生長指標；生物量分配；光合指標

青桐（Linn. f.），別名中國梧桐，安徽省鄉(xiāng)土樹種。其樹干端直，樹皮綠色且平滑，葉大冠美。由于觀賞效果好、管理成本低，天然分布于山區(qū)丘陵，現(xiàn)廣泛用于城市行道樹，巢湖市2017年將青桐定為市樹。近年來巢湖夏季汛期水淹嚴重，甚至大部分生活區(qū)域被潮水淹沒，人們生活嚴重受阻，城市綠化更是受到嚴重破壞。青桐作為巢湖市樹又為肉質根系植物，水分脅迫對青桐生長及生理特性的影響相關研究還鮮見報道，因此對其耐水程度亟待研究。水分是影響植物生長發(fā)育的重要影響因子，科學有效地管理更加有利于減少干旱及澇漬的影響。目前，國內對青桐的研究更多在于對其育苗栽培技術方面的探索，對青桐幼苗在生長季初、旺盛期、末期受到自然性災害的生理生化響應機制及應對措施鮮有研究。

水分脅迫的發(fā)生時間、持續(xù)時間、發(fā)生強度等均會對植物體的生長發(fā)育有較大的影響[1]。張婷等[1]研究指出，在生長季末期刺槐幼苗受到干旱脅迫后，NSC（非結構性碳水化合物）含量顯著降低對刺槐幼苗休眠期代謝、應對其他環(huán)境脅迫以及春季葉片萌發(fā)產(chǎn)生嚴重的不良影響。Anderegg等[2]研究發(fā)現(xiàn)，生長季初期干旱脅迫會顯著增加喬木NSC含量。Galvez等[3]發(fā)現(xiàn)，生長季旺盛時期干旱脅迫對喬木NSC含量沒有顯著影響。目前對植物體的生長季初期與生長季旺盛期進行的研究較多，植物體在此階段下生長代謝旺盛，當其受到脅迫后表現(xiàn)也更為顯著；相比之下，植物在生長季末期生長代謝變慢，脅迫后的表現(xiàn)也較不明顯，但對植物體生長季末期受脅迫后的反應機制研究是必要的，有利于構建植物體生長季各階段受脅迫后的響應機制完整藍圖。因此，本研究以一年生實生青桐苗為材料進行持續(xù)性水淹脅迫，設置4個水分梯度，模擬自然水分脅迫條件進行控水栽培，通過研究青桐幼苗對不同水分脅迫下的生長指標、生物量分配和光合指標等的響應，探尋青桐幼苗應對水分脅迫的生長及生理響應機制，為篩選抗?jié)晨购档木G植提供參考依據(jù)[4]。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況及試驗設計

試驗樣地位于安徽省合肥市安徽農(nóng)業(yè)大學農(nóng)萃園，31°48′ N，117°11′ E。北亞熱帶季風氣候，年降水量950 mm，年平均氣溫為15.7～17.1 ℃，7月最高，為28.2～28.6 ℃，1月最低，為2.5～2.9 ℃。2020年6月初，將一年生種子繁殖的青桐幼苗移栽于Φ19 cm×H17 cm的育苗穴盆，每個盆缽土壤選擇1:3比例的營養(yǎng)土與園區(qū)土壤混合物。試驗前保證幼苗水分、光照等條件保持一致，并進行除蟲除草等田間管理，3個月后選取生長良好、生長狀況（株高、徑粗和葉面積）相似的幼苗進行水脅迫試驗。

2020年9月生長季末期開始進行水分脅迫試驗。先從安徽農(nóng)業(yè)大學農(nóng)萃園試驗樣地取1 m以下的土壤，算出田間持水量為0.21 g·g-1，然后設置為4個試驗水分梯度[5]，分別是30%田間持水量（T1）、70%田間持水量（T2）、100%田間持水量（T3）和130%田間持水量（T4），每個處理5盆，重復3次。水分控制的方法采用EM50數(shù)據(jù)采集器[6]進行換算測定。從試驗起（0 d）至試驗結束（30 d），每日6:30和18:30用校準后的EM50對盆栽進行水分測量，保證土壤水分穩(wěn)定；當盆內水分不足時，少量多次的加水至50 mL，等待2 min后再用校準后的EM50確認盆內土壤水分含量，直至達到設定的水分含量。

1.2 試驗方法

1.2.1 生長指標測定 從試驗初期（0 d）起至試驗末期（30 d）止，每5 d于早上7:00—9:00之間測量并記錄1次青桐幼苗各生長指標數(shù)據(jù)，每組處理重復3次，共測定12次。用直尺測量記錄初始株高、試驗后株高，用游標卡尺測量記錄初始莖粗、試驗后莖粗，計算出株高變化量、莖粗變化量；人工計數(shù)出測量的各株幼苗的葉數(shù)后，選取每株具有代表性的3片葉片，用YMJ-C型葉面積測定儀分別測量并記錄葉面積、葉長、葉寬和葉長寬比，并計算出該株幼苗的總葉面積。

1.2.2 光合指標測定 在測量記錄幼苗生長指標后，隨即進行光合指標測定。用Li-COR6400便攜式光合分析儀(Li-6400, Li-Cor, Lincoln, NE, USA)參考李旭[7]的研究，于9:00—11:00測凈光合速率（n）、蒸騰速率（r）、胞間二氧化碳濃度（i）、氣孔導度（s）、蒸汽壓虧缺（VPD）參數(shù)，并計算出瞬時水分利用效率（WUE）=n/r?；谇捌陬A試驗結果，將測定時的光強參數(shù)設定為1 300 μmol·m-2·s-1，葉室溫度設置為26 ℃，CO2濃度設定為500 mg·L-1。記錄數(shù)據(jù)之前，將幼苗葉片在葉室內穩(wěn)定5～10 min，使各個氣體交換參數(shù)穩(wěn)定[7]。

1.2.3 生物量分配測定 在測量記錄幼苗生長指標及光合指標后，隨即進行生物量指標測定。將12株幼苗整株挖出洗凈，將每株幼苗的葉、莖、根3個部分分別裝入牛皮紙袋內并對應標記，105 ℃殺青30 min后，在80 ℃下烘干至少72 h至恒重后稱重記錄[2]，并計算葉生物量比（LBR，葉重/總生物量）、莖生物量比（SBR，莖重/總生物量）和根生物量比（RBR，根重/總生物量）。根據(jù)生長指標得出該株幼苗的葉片總面積，計算出比葉面積（SLA，總葉面積/葉重）。

1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 用Excel整理數(shù)據(jù)，用SPSS20分析，Origin2019進行繪圖。

2 結果與分析

2.1 生長指標對水分脅迫的響應

不同水脅迫下青桐幼苗生長及其形態(tài)特征存在著明顯差異（圖1），隨著脅迫時間不斷增加，各生長指標的增幅逐漸減少。其中，在T2和T3條件下，青桐幼苗隨脅迫時間增加，株高變化量、莖粗變化量、葉寬、葉長以及葉面積均呈現(xiàn)上升趨勢；在T1條件下，青桐幼苗隨著水分脅迫時間增加，其生長指標趨勢均呈下降趨勢，且受脅迫20 d的株高、莖粗指標顯著低于（< 0.05）0 d；在T4條件下，青桐幼苗隨著水分脅迫時間增加，其生長指標趨勢均呈先上升后下降的趨勢，且受脅迫20 d的葉面積指標顯著低于（< 0.05）0 d。造成這種情況可能是，在T1條件下的土壤水分含量低極，不適宜青桐幼苗的生長發(fā)育；而T4條件下的土壤水分含量過高，青桐幼苗在受到極端水淹脅迫5 d內，因土壤水分充足，有利于促進幼苗生長發(fā)育，但隨著脅迫時間超過5 d后，土壤透氣性發(fā)生變化進而影響青桐幼苗根系呼吸，導致隨著脅迫時間增加青桐幼苗生長受限。

圖中數(shù)據(jù)均為平均值±標準誤, n=3。

Figure 1 The changes of the growth morphology ofseedlings during the whole experiment periods

單因素方差分析結果表明（表1），在4種水分脅迫條件下青桐幼苗生長情況出現(xiàn)較大差異。T1條件下，幼苗各生長指標受影響程度較大，株高變化量、莖粗變化量均顯著低于（< 0.05）其他3種條件，分別為（–0.16±0.33）cm與（–0.13±0.01）cm，說明當幼苗長期處于T1條件下時，土壤水分含量不足，極不適宜青桐幼苗生長發(fā)育；T2、T3條件下生長指標綜合表現(xiàn)較佳，其中株高變化量、葉長顯著高于（< 0.05）其他兩種條件，其中T2條件葉面積指標顯著高于（< 0.05）其他3種條件，說明在T2、T3條件下時土壤水分含量較適宜幼苗生長發(fā)育；T4條件下，其莖粗變化量、葉長、葉寬、長寬比均顯著低于（< 0.05）T2、T3條件，但顯著高于（< 0.05）T1條件，而葉面積指標顯著低于（< 0.05）其他3種條件，說明青桐幼苗長期處于T4條件下會影響其正常生長發(fā)育。從幼苗生長指標綜合結果來看，青桐幼苗最適的條件從高到低為T2>T3>T4>T1。

表1 不同水分處理的青桐幼苗生長指標比較

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標準誤，= 3，經(jīng)過Duncan多重比較，不同字母表示差異顯著（< 0.05）。下同。

表2 不同水分處理的青桐幼苗光合指標比較

表3 不同水分處理生物量累計及其分配指標比較

2.2 光合指標對水分脅迫的響應

植物氣孔導度在光合作用中起著重要的調節(jié)作用，它在控制水分損失和獲得碳素即生物量產(chǎn)生之間的平衡中起著關鍵的作用[9]。影響植物氣孔導度的因素有很多，其中土壤水分是重要影響因素之一[10]，在植物受到輕度至中度的干旱脅迫的條件，氣孔關閉是對干旱最早的響應[11]。由表2可知，青桐幼苗受脅迫后，其氣孔導度從高到低一次表現(xiàn)為T4 > T3 > T2 > T1。試驗末期，T1水分條件的n、r、s與WUE均顯著低于（< 0.05）其他3種水分條件，s與VPD顯著高于（< 0.05）其他3種水分條件；可以得出，在T1水分條件下，青桐幼苗處于缺水階段不利于生長發(fā)育和生物量積累；T3與T4兩種水分條件幼苗光合指標之間無明顯差異（> 0.05），但對比總結發(fā)現(xiàn)，土壤水分含量較高的條件（T3與T4水分條件）幼苗的n、r、i、s與VPD含量均顯著高于（< 0.05）土壤水分含量低的條件（T1與T2水分條件）。

從幼苗光合指標綜合看出，青桐有較好的耐短期水澇的特性。在4種處理條件下，T1水分條件最不適合青桐幼苗生長，T2水分條件最適宜幼苗生長，T3水分條件稍次于T2水分條件，T4水分條件較一般。

2.3 生物量指標對水分脅迫的響應

不同的水分脅迫顯著影響了青桐幼苗的生物量累積及其分配情況。由表3可知，4種處理下，總生物量在12.35 ～ 17.14 g之間，表現(xiàn)為T2 > T4 > T3 > T1，其中T1水分條件下幼苗總生物量與莖生物量顯著低于（< 0.05）其他3種水分處理條件，分別為12.35 g與6.10 g；在青桐幼苗的葉生物量表現(xiàn)上，T2水分條件與T3水分條件顯著高于（< 0.05）T1水分條件與T4水分條件；由于土壤過于干旱導致大量側根失水死亡，使得T1水分條件根生物量與RBR均表現(xiàn)出顯著低于（< 0.05）其他3種水分條件；隨著水分脅迫程度的增加，LBR、RBR與SLA表現(xiàn)為先增加后降低的趨勢，T2與T3水分條件下，LBR顯著高于T1與T4水分條件；SBR表現(xiàn)為隨著水分脅迫程度增加而增加，其中T4水分條件SBR表現(xiàn)最優(yōu)，顯著高于（< 0.05）其他3種水分條件，達到0.62。

3 討論與結論

土壤水分條件直接影響了植物的生長情況，植物通過調節(jié)生長形態(tài)來適應土壤水分脅迫。T1（30%田間持水量）水分條件下，生長形態(tài)表現(xiàn)為須根發(fā)達的特點，但隨著脅迫時間加強，側根與須根多表現(xiàn)干枯死亡，幼苗受影響情況最為明顯，生長狀況不佳，最不適宜青桐幼苗生長發(fā)育；青桐幼苗在T2（70%田間持水量）水分條件下與T3（100%田間持水量）水分條件下的整體生長表現(xiàn)良好，其生長狀態(tài)及生長指標隨著脅迫時間增加均呈現(xiàn)上升趨勢，土壤水分供應充足、葉子較多且葉面積大、光能利用效率較高，一定程度上維持了較高的碳獲取能力；T4（120%田間持水量）水分條件下，幼苗生長狀態(tài)發(fā)生變化，表現(xiàn)為部分葉片出現(xiàn)萎蔫且露出水面的部分萌生出部分氣生根。結果為青桐幼苗在受到持續(xù)性水淹脅迫時的應對機制提供了新的思路。

水分條件顯著影響青桐幼苗的氣體交換和資源利用效率[8]。在T1（30%田間持水量）水分條件，為減少蒸騰作用葉片氣孔關閉，凈光合速率（n）顯著降低，極大地影響青桐幼苗的總生物量積累；青桐幼苗受到極端水淹脅迫T4條件時，根的呼吸受到影響，幼苗通過改變其根部生長形態(tài)應對淹水脅迫，通過觀察此階段葉片的光合指標，凈光合速率（n）、蒸騰速率（r）、胞間二氧化碳濃度（i）、氣孔導度（s）以及蒸汽壓虧缺（VPD）參數(shù)，與T2水分條件（70%田間持水量）有明顯差異，但相互之間總生物量的積累無明顯差異?？梢酝茢喑?，青桐幼苗在受到持續(xù)淹水脅迫時，通過一定的響應措施尋求新的生存途徑[12]。

土壤水分含量直接（光合原料減少）或間接（氣孔關閉、酶失活等）影響了植物的光合作用，進而影響生物量的積累。在T1（30%田間持水量）水分條件下，土壤水分缺乏直接影響幼苗進行光合作用，導致幼苗總生物量累計較少；T2（70%田間持水量）水分條件下總生物量積累最多，株高與基徑比例的降低有利于增加光能的利用效率[13]，幼苗主要表現(xiàn)為對根生物量的積累；T3（100%田間持水量）水分充足條件下幼苗狀態(tài)較好，生物量分配主要是對于葉生物量的累計；T4（120%田間持水量）水分條件過高的土壤濕度影響根系正常呼吸作用，進而影響幼苗正常的光合作用，使幼苗的總生物量積累受影響，此條件下幼苗生長狀態(tài)表現(xiàn)為株高增長量受限，莖粗增長量影響不大，與Wang等[14]水分脅迫明顯限制了幼苗的縱向生長、但對徑向生長影響相對較小的結論相一致。因此，青桐對水分脅迫的強度和持續(xù)時間的有一定的響應規(guī)律，進而形成了不同的應對策略。

綜上所述，幼苗受到極端干旱脅迫時，其生長指標及其生理指標均受顯著影響。一方面幼苗通過改變自身形態(tài)來響應脅迫，說明青桐幼苗有適應干旱環(huán)境的潛力[15]；另一方面，隨著干旱脅迫時間的延長，幼苗根部、苗高、生物量分配以及光合指標等顯著低于正常情況T2（70%田間持水量）水分條件，說明青桐幼苗抗旱性有限，需要在幼苗栽培過程中注意保水或補水。同理，青桐幼苗受也具有一定的抗?jié)衬芰Γ軌驅λ兔{迫做出相應的適應性變化，可以在輕度淹水地區(qū)種植，但是長期受澇會對其根部產(chǎn)生影響，從而造成傷害[16]?？梢酝ㄟ^加強良種選育與推廣，選擇耐澇品種；澇害發(fā)生后及時排水補救，恢復根系呼吸，同時補充肥料，加速代謝；推進青桐抗?jié)郴蛐丸b定與篩選的分子層面研究，有望培育出抗旱又抗?jié)车男缕贩N[17]。

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Growth and photosynthetic characteristics of the seedlings ofunder water stress

ZHU Mengyi1, FU Songling1, MENG Ran1, NI Zheng1, ZHANG Rong2, REN Jie3

(1. School of Forestry and Landscape Architecture, Anhui Agricultural University, Hefei 230036; 2. Forestry Science and Technology Extension Center of Chaohu City, Chaohu 238008;3. Institute of Agricultural Engineering, Anhui Academy of Agricultural Sciences, Hefei 230031)

is an important tree species for afforestation, but the lack of research on its response mechanism after water stress limits the development of its downstream industry. In order to explore the water tolerance degree and mechanism of, we analyzed the growth indexes of seedlings (plant height, stem diameter and leaf area), biomass allocation (leaf biomass ratio, stem biomass ratio, root biomass ratio, root biomass ratio and root biomass ratio) and photosynthetic index (net photosynthetic rate, transpiration rate, intercellular CO2concentration and stomatal conductance) under 30% field capacity (T1), 70% field capacity (T2), 100% field capacity (T3) and 130% field capacity (T4). The results showed that with the increase of water stress degree, all indexes of the seedlings firstly increased and then decreased, and the seedlings had best performance under T2 condition; the net photosynthetic rate was the highest under T3 condition, and the above-ground biomass allocation was 4% higher than that under T2 condition; under T2 condition, the leaf area and specific leaf area of the seedlings reached the maximum of 196.186 mm2and 512.48, respectively, and the total biomass accumulation reached the maximum of 17.14 g. T2 condition was the most suitable for the biomass accumulation of the seedlings, which could provide sufficient carbon reserve for the seedlings to successfully survive the winter; under T4 condition, the seedlings grew rapidly within 10 days and the growth trend weakened after 10 days, meanwhile, the aerial root emerged in response to flooding; T1 was the most unsuitable condition for the development ofseedling. This study provides a theoretical basis for the responding mechanism of the seedlings under water stress.

; water stress; growth index; biomass allocation; photosynthetic indexes

S718.43;S792.37

A

1672-352X (2021)06-0883-06

10.13610/j.cnki.1672-352x.20220106.016

2022-1-6 20:43:34

[URL] https://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1162.s.20220106.1254.032.html

2021-03-12

安徽省科技重大專項項目（18030701187）資助。

朱孟一，碩士研究生。E-mail：mengyizhu@ahau.edu.cn

通信作者:傅松玲, 教授，博士生導師。E-mail：fusongling@ahau.edu.cn