李果，張馳，黃銘，胡衛(wèi)紅

（華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院檢驗科，湖北 武漢430030）

尿路感染（urinary tract infection,UTI）是尿道內(nèi)大量微生物繁殖而引起尿頻、尿急、尿痛、發(fā)熱、腎區(qū)不適等癥狀的一種臨床綜合癥,不及時治療常會導致慢性感染。它的檢測“金標準”是尿液培養(yǎng)，但從尿液標本的留取到獲得細菌培養(yǎng)的報告，需要3～4d時間,不能及時的對臨床診斷提供參考意見。本研究運用UF-1000i檢測細菌數(shù)與中段尿細菌培養(yǎng)結(jié)果的比較,旨在找到一個靈敏度與特異度均佳的菌值區(qū)間,為臨床早期診斷尿路感染提供更準確的信息。

1 材料和方法

1.1 一般材料265份來自我院的疑似UTI的患者尿樣（被懷疑的條件：第一次尿沉渣檢查WBC≥20/μl，細菌計數(shù)≥1000/μl），其中男性5名，女性260名，年齡18～80歲，留取中段尿，女性均要求清潔外陰后留取標本,按照無菌操作原則將患者的標本留于無菌杯中并送檢。

1.2 試劑與儀器SYSMEX公司生產(chǎn)的UF-1000i自動尿液分析儀及配套試劑和質(zhì)控品、Cled培養(yǎng)基。

1.3 標本采集 按照無菌操作原則，留取清潔中段尿于無菌杯中送檢,留取標本前女性均要求清潔外陰。

1.4 UF-1000i細菌計數(shù) 通過UF-1000i自動尿液分析儀對標本進行細菌定量計數(shù),所有標本在3h內(nèi)完成檢測。

1.5 細菌培養(yǎng) 充分混勻標本后，用一次性定量接種環(huán)取標本中的尿液10μl,采用3區(qū)劃線法劃到XLD選擇性培養(yǎng)基中,置于37℃孵育24h，通過檢驗人員對細菌形態(tài)、菌落狀況、生化反應進行菌種鑒定，無細菌生長的標本延遲培養(yǎng)24h。

1.6 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,應用ROC曲線確定男性和女性細菌計數(shù)的cut-off值。運用卡方χ2檢驗判斷兩種方法之間差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 細菌培養(yǎng)結(jié)果 臨床上泌尿系統(tǒng)感染診斷的“金標準”是中段尿培養(yǎng)，革蘭氏陽性菌（G+）以菌落計數(shù)≥104CFU/ml為陽性，而革蘭氏陰性菌（G-）以計數(shù)≥105CFU/ml為陽性。如果標本的培養(yǎng)結(jié)果有三種以上的細菌,則判定為雜菌污染，標本不合格，則剔除該數(shù)據(jù)。培養(yǎng)結(jié)果顯示，陽性結(jié)果有64例，陽性率為29.4%（G+菌24例，G-菌有40例），陰性結(jié)果為154例,檢出三種以上細菌的標本47例，則被剔除。

2.2 UF-1000i自動尿液分析儀細菌計數(shù)結(jié)果對尿路感染的診斷評價 將上述218份標本用UF-1000自動尿液分析儀檢測細菌計數(shù)和白細胞計數(shù)。將尿細菌培養(yǎng)結(jié)果為金標準，與UF-1000i分析儀檢測的白細胞計數(shù)繪制ROC曲線,其下面積為0.712，見圖1，利用約登指數(shù)最大值來確定白細胞計數(shù)對尿路感染診斷的cut-off值為30.56 cell/μl。采用相同方式，細菌計數(shù)的ROC曲線下的面積為0.849，見圖2，得到細菌量的cut-off值為細菌量≥710.43/μl。在WBC≥30.56/μl和細菌量≥710.43/μl，對218份標本進行評價，與細菌培養(yǎng)結(jié)果,見表1,其對尿路感染的診斷性能，見表2。

圖1 儀器WBC計數(shù)與細菌培養(yǎng)結(jié)果的比較

圖2 儀器細菌計數(shù)與細菌培養(yǎng)結(jié)果的比較

表1 儀器WBC與細菌計數(shù)雙陽與細菌培養(yǎng)結(jié)果的比較

3 討論

目前，診斷尿路感染必須依據(jù)對中段尿的細菌定量培養(yǎng)的結(jié)果。然而，一份尿液標本從采集到獲取報告需要3d的時間，另外，被懷疑為尿路感染并被送檢細菌培養(yǎng)的標本有很大部分培養(yǎng)結(jié)果陰性，給病人帶來不必要的經(jīng)濟損失和資源浪費。有研究顯示[1-4],UF-1000i尿液分析儀對尿路細菌性感染疾病的診斷有一定臨床意義。本研究以細菌定量培養(yǎng)結(jié)果作為金標準,另外應用UF-1000i尿液分析儀對中段尿標本進行了細菌定量計數(shù)，以期找到一個靈敏度與特異性度均佳的細菌值區(qū)間，能夠快速的篩查陰性結(jié)果。

表2 WBC與細菌計數(shù)的臨界值評價

本研究采用UF-1000i自動尿液分析儀對218份中段尿進行了細菌計數(shù),并與公認的診斷尿路感染（UTI）的金標準細菌培養(yǎng)結(jié)果進行了比較，細菌培養(yǎng)陽性結(jié)果為真菌時，未納入此次研究。細菌培養(yǎng)是確診UTI的可靠并且普遍的方法,但費時且費用較高，因此如何早期預見并篩查出UTI，是臨床期待實驗室急需解決的問題[5]。UF-1000i采用半導體激光流式細胞/核酸熒光染色計數(shù)、細胞和細菌計數(shù)雙檢測通道、特異性核酸熒光染色，能準確快速地對尿液中紅、白細胞以及細菌進行定量分析[6],已成為大多數(shù)醫(yī)院進行尿液分析的檢測手段。本研究運用UF-1000i尿液分析儀對中段尿進行檢測，選擇了與尿路感染關系緊密、與炎癥產(chǎn)生密切相關的參數(shù)（細菌計數(shù)、白細胞計數(shù)）進行了對比分析，并與診斷尿路感染的“金標準”細菌培養(yǎng)進行了比較，共檢出64份陽性標本，其中大腸埃希菌有24例，占很大一部分，與文獻報道一致[7]，其次為變形桿菌8例、葡萄球菌5例和糞腸球菌2例和其他菌種。

UF-1000i對WBC計數(shù)、細菌計數(shù)的檢測值與細菌培養(yǎng)結(jié)果呈正相關關系。通過ROC曲線分析，結(jié)合特異性和靈敏度兩者之和最大原則，計算出WBC計數(shù)的cut-off值為30.56個/μl,細菌計數(shù)的cut-off值為710.43個/μl（P<0.05）。所以當WBC計數(shù)和細菌計數(shù)為雙陽性時，UF-1000i診斷尿路感染的真陽性率為42.9%，其不能夠準確篩選陽性標本，而其真陰性率為91%，因此能夠準確的篩選陰性標本。

本研究中假陽性有52例，發(fā)生率較高，這可能與尿液成分復雜，干擾因素較多有關，如儀器攜帶污染過高[8-10]；儀器對染色后的活菌和死菌均能不加區(qū)別的計數(shù)[11]，而培養(yǎng)只針對活菌；尿中過多的結(jié)晶超過了儀器的鑒別能力,其將部分非晶型結(jié)晶誤認為細菌；患者在培養(yǎng)前服用了抗生素；患者使用了非潔凈容器留取尿標本等。假陰性有11例,經(jīng)鏡檢有7例為細菌體積增大或聚集成團,可能被儀器誤認為其他顆粒,有4例鏡下見細菌體積微小且數(shù)量少，可能為尿液儲留時間過短，導致菌群數(shù)量不足，未達到儀器檢出限。

綜上所述,本次實驗雖未找到可靠的篩查陽性標本的證據(jù)，但卻發(fā)現(xiàn)當細菌計數(shù)與WBC計數(shù)均為陰性時，能夠快速的篩查陰性標本。對于癥狀較為明顯的患者和疑似為陽性的標本,就算細菌計數(shù)與WBC計數(shù)沒有達到閾值，也應結(jié)合其他指標如亞硝酸鹽，尿白細胞酯酶[12-14]等綜合判斷，必要時做尿培養(yǎng)，UF-1000i尿液分析儀主要用于尿路感染的篩查，不能替代尿培養(yǎng)，尿培養(yǎng)仍是診斷尿路感染的金標準。