楊金玲，黃 誠(chéng)，陸碧玉，黃李霜，黃麗華，陳大宇

柳州市婦幼保健院醫(yī)學(xué)遺傳科/柳州市出生缺陷預(yù)防與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西柳州 545001

抗核抗體譜(ANAs)包括最常見(jiàn)的自身免疫性抗體，ANAs中的抗體與細(xì)胞核中的大分子物質(zhì)，如核糖體、DNA、RNA、組蛋白或這些物質(zhì)的分子復(fù)合物結(jié)合，對(duì)機(jī)體造成損傷。有研究認(rèn)為，ANAs中的各種自身抗體可與核成分結(jié)合，從而影響受精卵細(xì)胞的分裂，導(dǎo)致妊娠失??；多種妊娠不良事件，如反復(fù)自然流產(chǎn)、不孕、胚胎植入失敗與ANAs密切相關(guān)[1-3]。ANAs是診斷和評(píng)價(jià)自身免疫性疾病預(yù)后的重要指標(biāo)，而自身免疫性疾病常見(jiàn)于女性，因此，對(duì)成年女性進(jìn)行ANAs檢測(cè)具有重要意義。本文通過(guò)流式熒光免疫法檢測(cè)柳州地區(qū)成年女性ANAs，并進(jìn)行結(jié)果分析，以期為臨床診斷治療提供依據(jù)[4]。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2017年8月至2020年2月在柳州市婦幼保健院就診的2 863例成年女性的血清。按年齡分為3個(gè)組：19～30歲組、>30～40歲組和>40歲組。按疾病類(lèi)型分為9個(gè)組：可疑自身免疫性疾病組、易栓癥組、其他不良妊娠疾病組、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)組、不孕癥組、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組、其他婦科疾病組、孕期其他疾病組、其他類(lèi)型流產(chǎn)組。

1.2儀器與試劑 流式熒光免疫法采用宙斯公司AtheNA Multi-Lyte抗核抗體檢測(cè)試劑盒，檢測(cè)儀器為美國(guó)Luminex公司生產(chǎn)的Luminex200TM流式點(diǎn)陣儀。

1.3方法 受檢者空腹采血后分離血清，進(jìn)行流式熒光免疫法檢測(cè)。ANAs包括的項(xiàng)目有：抗SSA、SSB、Sm、RNP、Scl 70、Jo-1、Cent B、Histone、dsDNA共9種不同抗原IgG類(lèi)抗體及其他抗核抗體[5]。

1.4檢測(cè)步驟 標(biāo)本處理后進(jìn)入Luminex200TM流式點(diǎn)陣儀檢測(cè)和數(shù)據(jù)處理。正常值為0～<100 U/mL，≥100～<120 U/mL為灰區(qū)，≥120 U/mL為異常。臨床上ANAs項(xiàng)目檢測(cè)值達(dá)到灰區(qū)值時(shí)，就需要密切觀察隨訪，因此，以≥100 U/mL為篩查陽(yáng)性切值[4]。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1不同年齡組間ANAs陽(yáng)性率分析 柳州地區(qū)成年女性ANAs陽(yáng)性率為15.75%，隨著年齡增長(zhǎng)，ANAs陽(yáng)性率呈逐漸升高趨勢(shì)，ANAs陽(yáng)性率在24歲與46～47歲女性中出現(xiàn)升高趨勢(shì)，見(jiàn)圖1。3個(gè)年齡組ANAs陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.723，P=0.423)，見(jiàn)表1。

注:虛線表示群體平均篩查陽(yáng)性率，實(shí)線表示各年齡篩查陽(yáng)性率；短橫線表示各年齡篩查陽(yáng)性率趨勢(shì)線。

表1 不同年齡組間ANAs陽(yáng)性率比較

2.2各種抗核抗體陽(yáng)性率及異常率分析 各種抗核抗體的陽(yáng)性率有差異，其中抗SSA、RNP和dsDNA抗體陽(yáng)性率分別為3.18%、3.07%和3.63%；其他ANAs抗體陽(yáng)性率均<3.00%，抗Sm抗體陽(yáng)性率最低，為0.07%?？筍SA、SSB、RNP抗體異常率均>80.00%，抗Scl-70、Cent B抗體異常率均>70.00%，其余ANAs抗體異常率<70.00%，其中抗Sm抗體異常率最低，為0.00%。見(jiàn)表2。

表2 各種抗核抗體陽(yáng)性率及異常率

2.3ANAs在疾病中的陽(yáng)性分布 可疑自身免疫性疾病組的ANAs陽(yáng)性率最高，為24.23%，與其他組陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其他類(lèi)型流產(chǎn)組ANAs陽(yáng)性率(7.80%)最低，與可疑自身免疫性疾病、易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組各組間的ANAs陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；其他婦科疾病、孕期其他疾病和其他類(lèi)型流產(chǎn)組各組間ANAs陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。其他婦科疾病組與可疑自身免疫性疾病、易栓癥、其他不良妊娠疾病組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。孕期其他疾病組與可疑自身免疫性疾病、易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥組比較，ANAs陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 ANAs在疾病中的陽(yáng)性分布

續(xù)表3 ANAs在疾病中的陽(yáng)性分布

3 討 論

研究表明，與健康女性相比，患有自身免疫性疾病的女性生殖能力下降，新生兒的出生率下降12%～16%[6]。導(dǎo)致不孕癥和不良妊娠結(jié)局常見(jiàn)的原因是自身免疫抗體異常。自身免疫性疾病與不孕、反復(fù)流產(chǎn)和體外受精失敗密切相關(guān)。本研究對(duì)成年女性ANAs結(jié)果進(jìn)行分析，為臨床診斷治療提供依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，ANAs的陽(yáng)性率隨年齡增加而逐漸升高，在>40歲組最高，但各年齡組ANAs陽(yáng)性率差異不明顯，與LI等[7]研究結(jié)果相同。有研究者認(rèn)為，ANAs陽(yáng)性率與年齡有關(guān)[8]，但這與本研究結(jié)果不一致。本研究結(jié)果顯示，柳州地區(qū)成年女性ANAs陽(yáng)性率為15.75%，這與之前報(bào)道的中國(guó)人(5.92%)[9]、日本人(9.50%)[10]和印度人(2.30%)[11]的ANAs陽(yáng)性率差異較大，這些差異可能與研究的人群及檢測(cè)方式等相關(guān)。本研究結(jié)果提示，各年齡階段的成年女性均應(yīng)行ANAs檢測(cè)，其有助于早期診斷并判斷疾病的嚴(yán)重程度，早期積極采取治療措施，對(duì)降低并發(fā)癥及改善預(yù)后、提高患者生存質(zhì)量具有重要意義。

本研究結(jié)果顯示，成年女性各種抗核抗體陽(yáng)性率及異常率均不相同，抗SSA、RNP、dsDNA抗體檢出率均>3.00%，異常率均>50.00%；大部分ANAs異常率均達(dá)到50.00%以上；可疑自身免疫性疾病組的ANAs陽(yáng)性率最高，為24.23%。臨床醫(yī)生根據(jù)抗核抗體陽(yáng)性的類(lèi)型，結(jié)合其他診斷指標(biāo)和臨床癥狀綜合判斷，可有針對(duì)性地進(jìn)行治療。對(duì)于達(dá)到灰區(qū)值但無(wú)典型臨床癥狀的病例，要進(jìn)行定期復(fù)查，并隨訪觀察。不同自身免疫性疾病中抗核抗體陽(yáng)性率情況不同，即不同的抗核抗體陽(yáng)性可能提示不同的自身免疫性疾病。如系統(tǒng)性紅斑狼中抗Sm、dsDNA抗體陽(yáng)性率均較高；抗SSA、SSB抗體陽(yáng)性多見(jiàn)于干燥綜合征；抗RNP抗體陽(yáng)性多提示混合型結(jié)締組織疾?。豢筍cl-70抗體陽(yáng)性提示硬皮病的可能等。ANAs檢測(cè)是目前臨床常用的自身免疫性疾病輔助診斷指標(biāo)，不同種類(lèi)自身免疫性疾病可形成特征性的ANAs[12-13]。ANAs檢測(cè)應(yīng)用于成年女性人群是非常必要的，因?yàn)榭购丝贵w陽(yáng)性對(duì)自身免疫性疾病具有重要的預(yù)警作用，各種抗核抗體陽(yáng)性率及異常率對(duì)自身免疫性疾病的早期診斷、控制、預(yù)后有重要意義。

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)指孕婦兩次或多次的自發(fā)性流產(chǎn)，約3%的孕婦在妊娠前28周可能發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)[14]。ANAs導(dǎo)致妊娠失敗的機(jī)制仍不清楚，但有研究表明一些流產(chǎn)中涉及患者的免疫機(jī)制[15-16]。在本研究中，不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女性ANAs陽(yáng)性率為14.71%。我國(guó)有研究報(bào)道，自身免疫型復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女性ANAs的陽(yáng)性率為8%～50%，對(duì)照組則為5%[17]，與本文結(jié)果相近。 近年來(lái)，越來(lái)越多的研究開(kāi)始關(guān)注抗核抗體對(duì)不良妊娠結(jié)局的影響。在TICCONI等[2]的研究中，反復(fù)自然流產(chǎn)女性ANAs陽(yáng)性率達(dá)50%；KIKUCHI等[18]報(bào)道的反復(fù)自然流產(chǎn)女性ANAs陽(yáng)性率為28.7%。本研究提示易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組ANAs陽(yáng)性率較高，均高于其他婦科疾病、孕期其他疾病、其他類(lèi)型流產(chǎn)組的ANAs陽(yáng)性率，可見(jiàn)血清ANAs檢測(cè)可評(píng)估免疫因素女性生殖方面的影響。目前有研究結(jié)果表明，免疫性不孕、卵巢早衰和移植失敗可能與ANAs陽(yáng)性有關(guān)，但很少有研究報(bào)告體外受精-胚胎移植群體的ANAs陽(yáng)性率[19-20]。TANIGUCHI等[21]研究表明，在進(jìn)行體外受精-胚胎移植出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局的人群中，血清ANAs陽(yáng)性率為25.1%；體外受精-胚胎移植人群中，血清ANAs陽(yáng)性組臨床妊娠率低于ANAs陰性組，早期流產(chǎn)率高于ANAs陰性組，可見(jiàn)ANAs陽(yáng)性可能是體外受精-胚胎移植的負(fù)性因素。李穎等[22]研究指出，因不明原因不孕、子宮內(nèi)膜異位癥、多次人工授精失敗、排卵期障礙等原因而進(jìn)行外受精-胚胎移植的人群中，ANAs陽(yáng)性率較對(duì)照組高，提示有可能是因?yàn)槊庖咭蛩貙?dǎo)致其不孕。本研究結(jié)果顯示，其他婦科疾病及孕期其他疾病組中，ANAs陽(yáng)性率也大于5.00%，說(shuō)明ANAs檢測(cè)對(duì)于女性生殖生育評(píng)估預(yù)測(cè)具有重要意義，對(duì)這一部分成年女性人群進(jìn)行ANAs篩查也非常必要，可早診斷和早治療自身免疫性疾病，在一定程度上亦可防治自身免疫性疾病。

綜上所述，ANAs檢測(cè)可為成年女性自身免疫性疾病的早期診斷和治療及自身抗體譜檢驗(yàn)信息咨詢(xún)提供可靠的參考依據(jù)，對(duì)自身免疫性疾病的早期診斷、控制、預(yù)后有重要意義；同時(shí)血清ANAs檢測(cè)可評(píng)估免疫因素在女性生殖方面的影響，根據(jù)不同的抗核抗體類(lèi)型進(jìn)行針對(duì)性治療，以期提高臨床妊娠率，降低流產(chǎn)率，進(jìn)而改善妊娠結(jié)局。