顏昊,賈永偉,*,翟偉峰

(1.上海中醫(yī)藥大學(xué),上海 200000;2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬光華醫(yī)院脊柱外科,上海 200052)

椎間盤退變是臨床上常見的疾病,其發(fā)病機(jī)制尚不明確,且給社會(huì)勞動(dòng)力帶來沉重負(fù)擔(dān),對(duì)社會(huì)經(jīng)濟(jì)造成一定影響[1]。隨著我國(guó)人口老齡化程度的加劇以及人們生活方式的改變,其發(fā)病率逐漸增多,椎間盤退變已經(jīng)成為脊柱外科醫(yī)生研究的熱點(diǎn)問題。動(dòng)物模型是研究椎間盤退變的病因、發(fā)病規(guī)律和病理學(xué)變化的重要手段,目前椎間盤退變模型已有數(shù)十種構(gòu)建方法,然而,至今仍未有一種公認(rèn)的理想模型,本文結(jié)合國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的差異和優(yōu)缺點(diǎn)作一綜述,為今后動(dòng)物模型的選擇與構(gòu)建提供參考。

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

目前用于構(gòu)建椎間盤退變模型的動(dòng)物主要分為大型動(dòng)物與小型動(dòng)物。常用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的排名如下:小鼠腰椎(12%),大鼠腰椎(15%),小鼠尾巴(18%),狒狒(19%),牛尾巴(22%),兔子(26%),綿羊(31%)以及大鼠尾巴(46%)[2]。

1.1 大型動(dòng)物

1.1.1 靈長(zhǎng)類

靈長(zhǎng)類動(dòng)物的生活特性和人類相近,脊柱的生理構(gòu)造和生物力學(xué)環(huán)境與人類有很高的相似度[3]。Lauerman等[4]通過對(duì)平均年齡為15.7歲的狒狒進(jìn)行影像觀察,發(fā)現(xiàn)狒狒的駝背程度及椎間盤退變程度與年齡呈正相關(guān),與人類的椎間盤退變規(guī)律相似。郭常安等[5]以恒河猴為對(duì)象進(jìn)行纖維環(huán)切開,發(fā)現(xiàn)恒河猴生理特性與人類較接近。雖然靈長(zhǎng)類動(dòng)物在椎間盤退變實(shí)驗(yàn)中是最理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?其椎間盤的解剖結(jié)構(gòu)與人類較類似,且存在自發(fā)性退變、直立行走應(yīng)力等相同因素,但造模的價(jià)格昂貴,不適合大數(shù)量的實(shí)驗(yàn)要求,且倫理難以通過。

1.1.2 牛、羊

牛、羊脊柱的解剖結(jié)構(gòu)、大小與人類相似,且取材方便。Paul等[6]發(fā)現(xiàn)成年山羊椎間盤中只有軟骨細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞,并未發(fā)現(xiàn)脊索細(xì)胞,這一點(diǎn)與人類相似。另一方面,山羊椎間盤中所測(cè)到的水、糖胺聚糖以及膠原蛋白含量與成人椎間盤高度吻合[7],因此可作為一種理想的研究對(duì)象,相比于其他動(dòng)物,牛羊類較為強(qiáng)壯,對(duì)一些手術(shù)類造模方式易于耐受,但是應(yīng)用?；蜓蜃鳛閯?dòng)物模型,實(shí)驗(yàn)的經(jīng)濟(jì)成本會(huì)有所提高。

1.1.3 豬

國(guó)內(nèi)將豬作為動(dòng)物模型的研究較少,在國(guó)外比較早期文獻(xiàn)中獲知,豬與綿羊脊椎單個(gè)節(jié)段的左右軸轉(zhuǎn)向程度與人類較相似(C1-C2運(yùn)動(dòng)度最大),但在豬、牛、綿羊等大型動(dòng)物中,從頸椎到腰椎骨性終板的前后直徑是幾乎相同的,而人類的前后直徑呈逐步增加[8]。脊索細(xì)胞在椎間盤退變的情況下具有保護(hù)作用,而豬椎間盤內(nèi)的脊索細(xì)胞在出生后長(zhǎng)期或者終身存在[9]。豬由于在生理學(xué)方面與人類極為相似,且其體型較大,易于操作,在國(guó)外作為模型動(dòng)物得到了廣泛的應(yīng)用[10-11]。

1.1.4 犬類

犬類應(yīng)用于椎間盤動(dòng)物模型主要有軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬和非軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬。在軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬的幼犬(<1歲)中發(fā)現(xiàn)了退化的跡象,如比格犬與臘腸犬從出生時(shí)脊索細(xì)胞開始減少,到成年期完全喪失,而非軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬中老年犬(5～7歲)才出現(xiàn)退化的跡象[12]。其次犬在自發(fā)性椎間盤退變中的相對(duì)糖胺聚糖含量和基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)活性與人相似:隨著椎間盤退變嚴(yán)重程度的提高,MMP活性增加而糖胺聚糖含量降低[13]。所以在自發(fā)性退變模型上,犬類是不錯(cuò)的選擇,但會(huì)因此提高實(shí)驗(yàn)成本,相對(duì)的動(dòng)物培育周期延長(zhǎng),且在其他造模方式上,犬類椎間盤的大小與人類形成差異。

1.2 小型動(dòng)物

1.2.1 鼠類

目前最常用的主要為大、小鼠,沙鼠。Lim等[14]對(duì)SD大鼠取出部分脊柱運(yùn)動(dòng)段,在體外進(jìn)行14 d培養(yǎng),所培養(yǎng)的纖維環(huán)、髓核、終板存活率保持95%以上。Ariga等[15]對(duì)小鼠椎間盤進(jìn)行了機(jī)械應(yīng)力實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)軟骨終板中軟骨細(xì)胞凋亡與機(jī)械應(yīng)力有關(guān),且該過程與椎間盤退變存在一定聯(lián)系。Gruber等[16]發(fā)現(xiàn)沙鼠的椎間盤退變與年齡相關(guān),其主要原因與沙鼠的高鹽含量、低水飲食習(xí)慣有關(guān),從而引發(fā)椎間盤的營(yíng)養(yǎng)障礙,但高鹽、低水飲食因素是否能普遍代表人類椎間盤疾病特點(diǎn)仍存在爭(zhēng)議。大小鼠作為動(dòng)物模型可以控制經(jīng)濟(jì)成本;且品系培養(yǎng)方便,培養(yǎng)周期短,基因純合度高,但大小鼠椎間盤大小與人類差異較大,對(duì)實(shí)驗(yàn)的操作有一定技術(shù)要求,其較小的椎間盤會(huì)給影像學(xué)及病理學(xué)等檢測(cè)帶來困難。

1.2.2 兔類

兔類作為動(dòng)物模型用于體內(nèi)模型較多,Lipson等[17]發(fā)現(xiàn)造模前兔椎間盤含水量及蛋白聚糖單體大小與人類相似,損傷后兔椎間盤含水量在前兩天短暫恢復(fù),透明質(zhì)酸含量則迅速下降,但蛋白聚糖含量未見明顯改變。Bayliss等[18]研究表明隨著兔的衰老,其纖維軟骨細(xì)胞代謝及蛋白聚糖分泌量的變化,進(jìn)一步導(dǎo)致生物化學(xué)成分發(fā)生改變,這點(diǎn)與人類的椎間盤退變過程也較類似。Kroeber等[19]發(fā)現(xiàn)相比于嚙齒類動(dòng)物的尾巴模型,兔模型與包含小關(guān)節(jié)、椎旁肌肉和韌帶的人椎間盤同源性更高。作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,兔類的飼養(yǎng)方便,品系及遺傳學(xué)控制較好,能縮減成本,且相對(duì)于鼠類,兔類的椎間盤較大易于實(shí)驗(yàn)操作。

總體來說,由于在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中需比較動(dòng)物環(huán)境要求、遺傳學(xué)控制、飼養(yǎng)特點(diǎn)、經(jīng)濟(jì)成本、是否易于操作以及倫理要求等因素,目前鼠類和兔類暫時(shí)是比較適合進(jìn)行椎間盤退變實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。

2 動(dòng)物模型的建立

椎間盤退變的動(dòng)物模型根據(jù)造模方法不同分為體內(nèi)模型與體外模型。體內(nèi)模型包括:力學(xué)改變模型、結(jié)構(gòu)改變模型、自發(fā)退變模型、全身疾病模型。體外模型包括:體外細(xì)胞模型、體外器官模型。

2.1 體內(nèi)模型

2.1.1 力學(xué)改變模型

在長(zhǎng)時(shí)間不正確姿勢(shì)或者過度承受壓力下,椎間盤退變的風(fēng)險(xiǎn)明顯增高,因此部分學(xué)者采用機(jī)械應(yīng)力等手段模擬出椎間盤退變模型,主要有:尾部折彎模型、雙足直立模型、軸向加壓模型和脊柱失穩(wěn)模型。

(1)尾部折彎模型:早在1957年,Lindblom等[20]將老鼠尾巴彎曲成“U”型以增加髓核、纖維環(huán)壓力,誘發(fā)椎間盤退變,發(fā)現(xiàn)凹面的結(jié)締組織出現(xiàn)損傷以及椎間盤細(xì)胞質(zhì)減少。Court等[21]發(fā)現(xiàn)對(duì)尾部加壓彎曲后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,蛋白聚糖基因表達(dá)降低且II型膠原蛋白表達(dá)對(duì)稱性降低。但是,尾部折彎模型因鼠類尾部生理結(jié)構(gòu)、壓力結(jié)構(gòu)與人類椎間盤存在明顯差異,且彎曲部會(huì)存在結(jié)締組織損傷、細(xì)胞數(shù)目減少等現(xiàn)象,目前應(yīng)用較少。

(2)雙足直立模型:Cassidy等[22]對(duì)21只新生大鼠進(jìn)行去前肢模擬椎間盤退變的實(shí)驗(yàn),研究發(fā)現(xiàn)所有大鼠腰椎發(fā)生楔形變,且腰大肌中I型肌纖維轉(zhuǎn)變?yōu)镮I型肌纖維,多裂肌中II型肌纖維轉(zhuǎn)變?yōu)镮型肌纖維。Moravec等[23]研究雙足模型并未發(fā)現(xiàn)四足與兩足大鼠之間存在明顯的直立姿勢(shì)差異。Bailey等[24]對(duì)雙足直立模型再次進(jìn)行研究后發(fā)現(xiàn):四足和雙足大鼠在站立次數(shù)或直立水平姿勢(shì)移動(dòng)量上較接近,認(rèn)為直立姿勢(shì)可能不是導(dǎo)致椎間盤退變的因素。因此,目前雙足模型不被推薦作為椎間盤退變模型。

(3)軸向加壓模型:Iatridis等[25]應(yīng)用Ilizarov型器械對(duì)16只大鼠尾巴進(jìn)行持續(xù)加壓,實(shí)驗(yàn)顯示大鼠尾部椎間盤厚度、角度及松弛度降低,尾部椎間盤的機(jī)械性質(zhì)及結(jié)構(gòu)組成發(fā)生變化,與人類較相似,但實(shí)驗(yàn)椎間盤中蛋白聚糖含量增加,這與人類椎間盤退變蛋白聚糖含量降低恰恰相反。Kroeber等[19]對(duì)此模型進(jìn)行了改進(jìn):在兔子腰椎上安裝可控的靜態(tài)軸向加壓裝置,14 d及28 d時(shí)發(fā)現(xiàn)椎間盤高度降低、終板纖維化且凋亡細(xì)胞增多,在卸載裝置4周后,這些變化表現(xiàn)為不可逆轉(zhuǎn)。因軸向加壓模型可控性及可重復(fù)性較高,且造模周期相對(duì)較短,其在國(guó)內(nèi)外研究椎間盤退變中應(yīng)用較多,但軸向加壓模型通常采用手術(shù)方式來構(gòu)建,存在一定技術(shù)要求,實(shí)際操作中需注意對(duì)感染的控制。

(4)脊柱失穩(wěn)模型:主要是通過椎體結(jié)構(gòu)、椎旁肌刺激、脊柱融合的手段造成脊柱不穩(wěn),從而引發(fā)椎間盤退變的方法。Miyamoto等[26]通過切除小鼠棘突、棘上韌帶、棘間韌帶及剝離相應(yīng)的椎旁肌使脊柱失穩(wěn)引發(fā)椎間盤退變,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)造模后椎間盤高度下降、軟骨細(xì)胞增生,骨贅形成。Wada等[27]對(duì)兔的斜方肌反復(fù)電刺激使兔的頸椎反復(fù)伸展屈曲,造成頸椎失穩(wěn),研究發(fā)現(xiàn)纖維環(huán)出現(xiàn)了嚴(yán)重的分層以及骨贅形成。但是該模型造模時(shí)間相對(duì)過長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)成本較高,且其退變因素是否包含手術(shù)的應(yīng)激反應(yīng)仍存在爭(zhēng)議。

2.1.2 結(jié)構(gòu)損傷模型

結(jié)構(gòu)損傷模型通過物理或化學(xué)的方式使椎間盤結(jié)構(gòu)破壞引發(fā)退變,目前分為物理損傷模型以及化學(xué)損傷模型。

(1)物理損傷模型:

纖維環(huán)損傷模型:Keyes等[28]首次通過對(duì)纖維環(huán)的損傷引發(fā)椎間盤退變。此模型在后人不斷的發(fā)展下主要分為纖維環(huán)局部損傷以及累及髓核的纖維環(huán)全層損傷。Osti等[29]對(duì)21只山羊在不損傷內(nèi)層纖維環(huán)的情況下進(jìn)行纖維環(huán)切開,在術(shù)后4～12月中所有纖維環(huán)均發(fā)生破裂,術(shù)后18月所有纖維環(huán)切開模型出現(xiàn)退變:椎間盤高度下降且髓核中蛋白聚糖含量減少,他們認(rèn)為纖維環(huán)在椎間盤退變中發(fā)揮了重要作用。為進(jìn)一步增加該方法的可控性和可重復(fù)性,近年來,部分學(xué)者采用針刺法來誘導(dǎo)椎間盤退變,獲得了滿意的結(jié)果[30-31]。纖維環(huán)損傷模型是目前比較常用的造模方式,可短期內(nèi)大量重復(fù),但與人類自然退變的時(shí)間有明顯差異,且對(duì)實(shí)驗(yàn)者的操作有一定技術(shù)要求。

終板損傷模型:該模型主要是應(yīng)用物理或化學(xué)的手段損傷軟骨終板以減少椎間盤血供及營(yíng)養(yǎng)誘發(fā)椎間盤退變。Cinotti等[32]對(duì)豬進(jìn)行了多處終板穿刺與單處終板穿刺,實(shí)驗(yàn)顯示兩者均能引起椎間盤退變,但多處穿刺方法退變效果較明顯,且髓核中尿酸含量與終板損傷程度呈負(fù)相關(guān)。Hutton等[33]對(duì)犬的上下終板之間注入骨水泥,結(jié)果發(fā)現(xiàn)造模的椎間盤并未出現(xiàn)明顯的退變現(xiàn)象,髓核與纖維環(huán)中蛋白聚糖的含量顯著增加。終板損傷模型對(duì)操作要求較高,可重復(fù)性較差,難以保證終板損傷程度一致,且也存在與椎間盤自然退變的差異的問題,目前應(yīng)用較少。

髓核損傷模型:在纖維環(huán)穿刺基礎(chǔ)上,劉航濤等[34]經(jīng)纖維環(huán)對(duì)髓核直接穿刺并抽吸髓核制作退變模型,造模后模型椎間盤間隙明顯變窄,且II型膠原及蛋白多糖含量明顯降低。Kim等[35]用鉆頭對(duì)大鼠椎間盤穿刺并抽吸髓核,在術(shù)后第9周觀察到椎間盤損傷變性,伴隨蛋白聚糖含量下降以及椎間盤高度變窄。對(duì)比纖維環(huán)穿刺方法,此方式操作相對(duì)簡(jiǎn)單、椎間盤退變時(shí)間更短,且影像學(xué)表現(xiàn)及病理結(jié)果與人類椎間盤退變較相似,但此方法會(huì)合并纖維環(huán)損傷,加速椎間盤退變過程,與人類椎間盤退變時(shí)間較緩慢形成差異。

(2)化學(xué)損傷模型其主要方式是通過向椎間盤內(nèi)注射酶類(軟骨素酶ABC、木瓜凝乳蛋白酶、腫瘤壞死因子α等)或非酶類藥物(博來霉素等),使髓核細(xì)胞死亡、基質(zhì)減少,誘發(fā)椎間盤退變[36-38]?；瘜W(xué)損傷模型操作相對(duì)簡(jiǎn)單,能夠短期內(nèi)誘發(fā)椎間盤退變,但退變方式同樣與自然退變存在差異,對(duì)椎間盤造成一定程度損害,且可能影響一些實(shí)驗(yàn)生化指標(biāo)。

2.1.3 自發(fā)退變模型

(1)自發(fā)退變動(dòng)物模型:沙鼠是一種伴隨年齡增長(zhǎng)逐步出現(xiàn)腰椎退變的動(dòng)物,其椎間盤退變具有出現(xiàn)早、發(fā)生率高、遺傳性相對(duì)較高的特點(diǎn),在最近研究中部分學(xué)者對(duì)其椎間盤形態(tài)學(xué)特征有了新的發(fā)現(xiàn)[39]。犬類中軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬和非軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬均會(huì)出現(xiàn)椎間盤自然退變現(xiàn)象,軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬出現(xiàn)退變時(shí)間較非軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬早,且軟骨營(yíng)養(yǎng)不良犬椎間盤內(nèi)的脊索細(xì)胞變化、組織病理特點(diǎn)與蛋白多糖含量與人類較相似。靈長(zhǎng)類中狒狒與獼猴是不錯(cuò)的自發(fā)退變模型動(dòng)物選擇,其活動(dòng)姿勢(shì)主要為直立或半直立,在生物力學(xué)角度上是最貼近于人類椎間盤退變的模型動(dòng)物。

(2)營(yíng)養(yǎng)阻斷模型:椎間盤營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)主要來源于上下軟骨終板以及終板外周血管,部分學(xué)者通過相應(yīng)手段阻斷椎間盤營(yíng)養(yǎng)來誘發(fā)椎間盤退變。Gullbrand等[40]給新西蘭白兔喂服尼莫地平或尼古丁,通過藥物干預(yù)來研究終板內(nèi)微血管的變化。石芳芳等[41]通過結(jié)扎兔腰椎單側(cè)或雙側(cè)血管誘導(dǎo)椎間盤退變,研究表明兔腰椎間盤退變與缺血程度、缺血時(shí)間成正比。營(yíng)養(yǎng)阻斷模型目前的應(yīng)用并不廣泛,主要因其操作相對(duì)復(fù)雜,造模時(shí)間較長(zhǎng),且部分學(xué)者對(duì)營(yíng)養(yǎng)阻斷誘發(fā)退變的因素存在一定質(zhì)疑。

(3)基因敲除模型:基因敲除模型近年來成為研究的熱門方向,Beierfuss等[42]在對(duì)兔子進(jìn)行APOE基因敲除后,發(fā)現(xiàn)兔子體內(nèi)的炎癥因子不斷增加,從而出現(xiàn)了椎間盤退變晚期癥狀。最近的研究中,一些學(xué)者發(fā)現(xiàn)敲除小鼠的Tenomodulin(Tnmd)基因后其椎間盤出現(xiàn)了退變[43]。在早期的研究中,基因敲除模型因?yàn)槌晒β实?、技術(shù)要求高、經(jīng)濟(jì)成本高等缺點(diǎn)而不被推薦。而CRISPR-Cas9這一技術(shù)出現(xiàn)后,對(duì)生化以及分子結(jié)構(gòu)研究提供新的框架[44]。使得大量且低廉的制造退變模型成為可能。基因敲除模型所表現(xiàn)出來的自然退變與人類較相似,目前有多種基因能誘發(fā)椎間盤退變,對(duì)單一基因誘發(fā)退變的情況需探討是否存在其他基因影響因素。

2.1.4 全身疾病模型

Wang等[45]將3月大的小鼠暴露于煙霧中以模擬人類長(zhǎng)期吸煙的情況,研究發(fā)現(xiàn)小鼠椎體終板孔隙度增加,椎間盤細(xì)胞衰老加速,出現(xiàn)了蛋白聚糖水解以及MMP活性升高的情況。另一部分學(xué)者通過切除大鼠卵巢使骨質(zhì)流失,降低骨密度以誘發(fā)椎間盤退變[46]。全身疾病模型是一種研究椎間盤自然退變的方式,可控性及可重復(fù)性較差而較少應(yīng)用。

2.2 體外模型

2.2.1 體外細(xì)胞培養(yǎng)模型

近年來建立體外模型技術(shù)已較為成熟,體外細(xì)胞模型根據(jù)培養(yǎng)方式不同分為單層細(xì)胞培養(yǎng)模型與三維細(xì)胞培養(yǎng)模型。Shinmei等[47]采用單層培養(yǎng)的方式研究IL-1α對(duì)椎間盤中蛋白聚糖的影響。Gruber等[48]從人體中采集椎間盤細(xì)胞分別用單層培養(yǎng)與三維培養(yǎng)的方法進(jìn)行研究,在三維培養(yǎng)中I型膠原與II型膠原含量明顯增多。相比于單層培養(yǎng)方式,三維培養(yǎng)方式能夠?yàn)榧?xì)胞提供較復(fù)雜的培養(yǎng)環(huán)境,能夠一定程度上減少細(xì)胞活力喪失程度、蛋白表達(dá)不穩(wěn)定等特點(diǎn)。但不論單層培養(yǎng)或三維方式,均不能完全模擬真實(shí)人體環(huán)境,并且一定程度上忽略了力學(xué)等因素對(duì)椎間盤退變的影響。

2.2.2 體外器官培養(yǎng)模型

體外器官培養(yǎng)模型能夠保持椎間盤自身的穩(wěn)定性,較好的表達(dá)細(xì)胞表型。其根據(jù)是否保留椎體分為:椎間盤器官離體模型與脊柱運(yùn)動(dòng)節(jié)段離體模型;而椎間盤器官離體模型根據(jù)有無保留終板又分為:帶終板椎間盤器官離體模型與去終板椎間盤器官離體模型,但是否保留終板以保證椎間盤營(yíng)養(yǎng)供應(yīng),不同學(xué)者之間對(duì)此存在爭(zhēng)議。Haschtmann等[49]認(rèn)為椎間盤器官細(xì)胞活力喪失的因素在于沒有保留器官的完整性,且缺少人體內(nèi)的力學(xué)環(huán)境。與之對(duì)應(yīng)的脊柱運(yùn)動(dòng)節(jié)段離體模型一定程度上保留了力學(xué)因素對(duì)退變的影響,更進(jìn)一步的模擬了人體內(nèi)的生理環(huán)境。體外器官培養(yǎng)模型是一種新型的造模方式,但其缺點(diǎn)也較明顯,器官的體外培養(yǎng)不可避免的會(huì)出現(xiàn)器官、細(xì)胞活力喪失的現(xiàn)象,不利于退變模型的長(zhǎng)期研究,且忽略了缺血、微循環(huán)障礙等因素。

3 結(jié)論

退變模型的建立方式目前已較為完善,其中自發(fā)性退變模型退變機(jī)理與人類較為相似,但自發(fā)性退變的動(dòng)物種類較為局限,其體型以及椎間盤應(yīng)力方式均與人類形成差異,且構(gòu)建退變模型的要求不具有廣泛代表性;體內(nèi)模型中物理損傷模型以及應(yīng)力模型通過應(yīng)力改變來模擬人體退變環(huán)境,但其必然對(duì)實(shí)驗(yàn)機(jī)體構(gòu)成損傷,且部分需通過手術(shù)的方式來改變結(jié)構(gòu)或應(yīng)力,對(duì)操作基礎(chǔ)有一定要求,且存在感染的風(fēng)險(xiǎn),化學(xué)損傷模型同樣存在缺乏代表性的問題;體外模型造模方式近年來逐步走向成熟,但如何解決現(xiàn)器官、細(xì)胞活力的喪失需要進(jìn)一步討論研究。

總的來說,退變模型的建立主要是為了反饋于人體椎間盤退變的研究,經(jīng)過國(guó)內(nèi)外學(xué)者數(shù)十年的努力,椎間盤退變模型已有數(shù)十種構(gòu)建方法,這些造模方式在操作性、重復(fù)性以及經(jīng)濟(jì)性方面各有優(yōu)劣,但是由于椎間盤退變機(jī)制尚不明確,且人體與動(dòng)物之間存在的實(shí)際差異,無法徹底否定任何一種造模方式,因此,在研究中不僅需要根據(jù)實(shí)際的研究目的選擇合適的動(dòng)物及建模方式,更需要充分利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù),不斷完善動(dòng)物模型的構(gòu)建,更好的為臨床服務(wù)。