徐海軍，爨淑楠，王書明，張圣堯，蔣平，佘德勇

(1.皖西學(xué)院 生物與制藥工程學(xué)院，安徽 六安 237012；2.安徽金豐源畜牧科技有限公司，安徽 六安 237010)

鵝沙門氏菌病又稱鵝副傷寒，是由多種沙門氏菌屬引起的疾病總稱。該病對(duì)雛鵝的危害較大，呈急性或亞急性經(jīng)過，臨床表現(xiàn)為腹瀉、腸炎、敗血癥等。成年鵝多呈慢性或隱性感染。鵝副傷寒的主要病原是鼠傷寒沙門氏菌[1]。本文報(bào)道了一例鼠傷寒沙門氏菌引起的雛鵝副傷寒。

1 發(fā)病情況

2020年5月10日，六安市金安區(qū)中店鄉(xiāng)某養(yǎng)鵝戶送檢4只18日齡雛鵝(尚未死亡)。經(jīng)了解，該養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)了200只雛鵝。雛鵝在出殼時(shí)接種過小鵝瘟抗體和痛風(fēng)抗體。4天前出現(xiàn)痛風(fēng)癥狀，就在3天前又皮下注射了1次痛風(fēng)抗體(2 mL/只)，同時(shí)在飲水中添加0.7 %小蘇打。但仍有發(fā)病和死亡。臨床癥狀表現(xiàn)為食欲減退或廢絕，精神萎靡，蹲坐在地或側(cè)躺， 無力行走，拉稀。近幾天已累計(jì)死亡20只。遂于5月10日上午來就診。送檢雛鵝有兩只表現(xiàn)間歇性角弓反張癥狀(2/4)。

2 剖檢病變

剖檢病變主要包括內(nèi)臟痛風(fēng)病變(1/4)；肝臟有大量大小不一的淺黃色壞死灶(1/4)(圖1)；頭部皮下有膠凍樣水腫(2/4)，顱骨有出血點(diǎn)(3/4)(圖2)；胰腺有兩處火山口樣壞死病變(1/4)(圖3)；小腦壞死(1/4)；心內(nèi)膜出血(3/4)(圖4)；心包有少量黃色清亮積液(1/4)；鼻腔有較多稀薄粘液(3/4)。

3 病原分離鑒定

無菌采取肝臟涂布接種、腦組織劃線接種于胰大豆蛋白胨瓊脂平板，37 ℃培養(yǎng)18 h，結(jié)果肝臟和腦組織接種區(qū)長(zhǎng)出大量灰白色、隆起、邊緣整齊、表面濕潤(rùn)的菌落，直徑在0.1～1 mm。挑取單個(gè)菌落分別轉(zhuǎn)接于麥康凱平板和SS平板，37 ℃培養(yǎng)18 h，結(jié)果在麥康凱平板上長(zhǎng)出灰色、隆起、邊緣整齊、表面濕潤(rùn)的菌落；在SS平板上長(zhǎng)出灰色、隆起、邊緣整齊、表面濕潤(rùn)的菌落(圖5)。說明分離到的細(xì)菌為不是大腸桿菌。對(duì)分離菌涂片、革蘭氏染色、鏡檢，結(jié)果為革蘭氏陰性桿菌(圖6)。

4 分離菌16S rDNA測(cè)序鑒定

為對(duì)分離菌進(jìn)行鑒定，取純化的分離菌TSA平板生長(zhǎng)菌落送到生工生物工程(上海)股份有限公司進(jìn)行16S rDNA測(cè)序鑒定，結(jié)果該菌株被鑒定為鼠傷寒沙門氏菌。將保留的菌株重新接種SS平板培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)個(gè)別菌落呈黑色(圖7)，經(jīng)過多次傳代，仍只有少量菌落呈黑色(圖8)。

5 藥敏試驗(yàn)

對(duì)分離菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果表明該菌對(duì)丁胺卡那高敏，對(duì)新霉素、頭孢曲松、恩諾沙星、粘桿菌素中敏，對(duì)氟苯尼考、阿莫西林低敏，對(duì)強(qiáng)力霉素、林可霉素耐藥(表1)。

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

6 治療措施及效果

根據(jù)藥敏結(jié)果，用新霉素和恩諾沙星進(jìn)行治療，分上下午飲水給藥，劑量按使用說明，每日1次，連用4日。5月17日回訪得知，除了個(gè)別病重鵝外，其余鵝已恢復(fù)正常。

7 討論

雛鵝沙門氏菌感染在六安地區(qū)比較少見。沙門氏菌感染比較有特征性的病變包括心肌有白色結(jié)節(jié)、肝臟有灰黃或灰白色壞死灶。本病例中4只病鵝中僅有1只出現(xiàn)肝臟灰黃色壞死灶病變。本病例中還出現(xiàn)顱骨出血和頭皮下膠凍樣水腫、胰腺壞死病變。胰腺火山口樣壞死病變多見于禽流感病毒感染的水禽胰腺。但本病例通過抗菌素治療就控制了病情，因此可以排除感染禽流感的可能。本病例中胰腺的火山口樣壞死病變是否由沙門氏菌引起，還有待進(jìn)一步研究。因此，從流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化上，本病例尚不足以確診為沙門氏菌感染。

為了確診本病，對(duì)病原進(jìn)行了分離鑒定。本病例分離菌初次在SS平板上傳代培養(yǎng)時(shí)，沒有出現(xiàn)黑色菌落，所以開始時(shí)排除了沙門氏菌。但接著通過16S rDNA測(cè)序確定分離菌為沙門氏菌。因此將保留的菌種重新劃線接種SS平板，結(jié)果有少量菌落呈黑色。但挑取黑色菌落在SS平板上反復(fù)傳代多次，最終也只有一部分菌落呈黑色。陳朝喜[2]等發(fā)現(xiàn)從不同動(dòng)物(牦牛、禽類和犬)糞便中分離的沙門氏菌在SS 瓊脂平板上大多數(shù)為無色透明菌落，部分菌株在菌落中央呈黑色或黑褐色，與本研究有相似之處。但本研究還發(fā)現(xiàn)即使是中央呈黑色的單菌落進(jìn)行劃線傳代培養(yǎng)后，又會(huì)長(zhǎng)出大量無色透明菌落和少量中央呈黑色的菌落。沙門氏菌在SS培養(yǎng)基上的菌落表現(xiàn)為中央黑色，是因?yàn)楫a(chǎn)生的硫化氫與培養(yǎng)基內(nèi)的鐵發(fā)生反應(yīng)生成黑色的硫化亞鐵。但是要產(chǎn)生足夠的硫化氫，需要該菌落發(fā)育良好，硫化氫能夠在其中聚集，這樣才能形成黑色的硫化亞鐵。因此發(fā)育不良的小菌落或者剛剛形成的小菌落，往往是觀察不到菌落中央黑色的，成片的菌苔也因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)過于激烈而往往不能產(chǎn)生黑色。本研究說明沙門氏菌產(chǎn)生硫化氫的生化特性非常不穩(wěn)定，對(duì)這一現(xiàn)象在分離鑒定沙門氏菌時(shí)應(yīng)特別注意，以免發(fā)生誤判。