遼寧省撫順市疾病預(yù)防控制中心 （遼寧 撫順 113006）

內(nèi)容提要： 目的：探究分析生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下空氣細(xì)菌污染監(jiān)測(cè)效果。方法：2019年8月～2019年11月，本中心通過平板自然沉降法獲取生物安全柜外區(qū)域的消毒空氣與柜內(nèi)消毒凈化空氣，在工作狀態(tài)下、靜止?fàn)顟B(tài)下每隔10min采集相關(guān)樣本，并統(tǒng)計(jì)細(xì)菌的數(shù)量，根據(jù)檢測(cè)實(shí)際情況，比較不干預(yù)以及干預(yù)（限制環(huán)境內(nèi)人員的活動(dòng)）狀態(tài)下的細(xì)菌濃度，并采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)比分析細(xì)菌數(shù)量。結(jié)果：生物安全柜操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空氣中的細(xì)菌數(shù)量小于生物安全柜外區(qū)域的細(xì)菌數(shù)目（P＜0.05）。干預(yù)狀態(tài)下操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空氣中的細(xì)菌數(shù)目均小于不干預(yù)狀態(tài)下的細(xì)菌數(shù)目（P＜0.05）。結(jié)論：生物安全柜處于工作狀態(tài)時(shí)，對(duì)空氣中的細(xì)菌污染監(jiān)測(cè)更為穩(wěn)定，不容易被人員活動(dòng)、工作狀態(tài)影響，細(xì)菌數(shù)量、細(xì)菌種類的監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確性比較高。

近年來，空氣中的細(xì)菌污染現(xiàn)象越發(fā)嚴(yán)重，嚴(yán)重影響人類身體健康的同時(shí)，也給臨床醫(yī)療工作造成了不小的影響。為提高臨床診斷、檢測(cè)技術(shù)，生物安全柜在各大醫(yī)療機(jī)構(gòu)、各大檢測(cè)中心的微生物實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用，而很多具有高度傳染性特點(diǎn)的微生物操作均在生物安全柜中完成[1]。比如培養(yǎng)皿、標(biāo)本接種、標(biāo)本混勻等，這些可形成液體薄膜、可誘發(fā)明顯壓力差的相關(guān)操作均可演變?yōu)楦腥拘詺馊苣z，并隨著氣溶膠在空氣中的擴(kuò)散導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室爆發(fā)感染[2]。而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室爆發(fā)感染的主要原因與實(shí)驗(yàn)室操作人員的不當(dāng)操作、錯(cuò)誤操作密切相關(guān)，一旦爆發(fā)感染，很容易形成交叉感染，增加臨床治療難度。基于此，本研究探究分析生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下空氣細(xì)菌污染監(jiān)測(cè)效果，現(xiàn)研究報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

2019年8月～2019年11月，本中心通過平板自然沉降法獲取生物安全柜外區(qū)域的消毒空氣與柜內(nèi)消毒凈化空氣，空氣中的細(xì)菌便是本次研究對(duì)象。本次研究納入的生物安全柜屬于Ⅱ級(jí)設(shè)備，研究前均對(duì)生物安全柜進(jìn)行充分消毒，達(dá)到無菌標(biāo)準(zhǔn)后投入研究。根據(jù)本次研究的特點(diǎn)，比較生物安全柜柜中以及柜外區(qū)域空氣中細(xì)菌的數(shù)量。

1.2 方法

在生物安全柜柜中、柜外的中心點(diǎn)以及四個(gè)角落放置平板培養(yǎng)皿，不能存在過遠(yuǎn)偏離，應(yīng)選擇規(guī)格為90mm的平板培養(yǎng)皿，讓空氣中的菌落能夠自然沉降，細(xì)菌的培養(yǎng)環(huán)境是36°C，細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間是48h，分別在不同操作時(shí)間點(diǎn)記錄相應(yīng)的細(xì)菌數(shù)量。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）生物安全柜中、柜外區(qū)域操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空氣中的細(xì)菌數(shù)量；

（2）干預(yù)狀態(tài)下與不干預(yù)狀態(tài)下生物安全柜中、柜外區(qū)域操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空氣中的細(xì)菌數(shù)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2.結(jié)果

2.1 生物安全柜中、柜外區(qū)域的細(xì)菌數(shù)目比較

進(jìn)行操作后，生物安全柜中的細(xì)菌數(shù)目無明顯變化，操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空氣中的細(xì)菌數(shù)量基本相當(dāng)（P＞0.05）；進(jìn)行操作后，生物安全柜外區(qū)域的細(xì)菌數(shù)目變化明顯，操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空氣中的細(xì)菌數(shù)目均不同，有升有降，存在顯著差異（P＜0.05）；生物安全柜中各個(gè)操作時(shí)間點(diǎn)的細(xì)菌數(shù)目均小于生物安全柜外區(qū)域（P＜0.05），見表1。

表1. 生物安全柜中、柜外區(qū)域的細(xì)菌數(shù)目比較(CFU/m3)

2.2 干預(yù)狀態(tài)下與不干預(yù)狀態(tài)下的細(xì)菌數(shù)目比較

干預(yù)狀態(tài)下操作10min、操作20min、操作40min、操作60min后空氣中的細(xì)菌數(shù)目均小于不干預(yù)狀態(tài)下的細(xì)菌數(shù)目（P＜0.05），見表2。

表2. 干預(yù)狀態(tài)下與不干預(yù)狀態(tài)下的細(xì)菌數(shù)目比較(CFU/m3)

3.討論

在微生物實(shí)驗(yàn)室中同時(shí)進(jìn)行多種類型的試驗(yàn)，會(huì)進(jìn)一步增加試驗(yàn)操作的壓力差，會(huì)導(dǎo)致氣溶膠在實(shí)驗(yàn)室空氣中進(jìn)一步擴(kuò)散，繼而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室中的菌落失衡，造成二次感染，尤其是本身感染性比較高的細(xì)菌，屬于實(shí)驗(yàn)室一級(jí)危險(xiǎn)生物。所以必須有更安全的地方存儲(chǔ)這些危險(xiǎn)生物[3]。

現(xiàn)今，各大檢測(cè)中心、微生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院檢驗(yàn)科等機(jī)構(gòu)均采用生物安全柜來乘裝、儲(chǔ)存高感染性細(xì)菌。臨床有大部分研究文獻(xiàn)[4]認(rèn)為，生物安全柜本身具有強(qiáng)大的保護(hù)性，可妥善儲(chǔ)存高感染性細(xì)菌，不會(huì)增加試驗(yàn)操作的壓力差，可降低氣溶膠擴(kuò)散現(xiàn)象，可減少實(shí)驗(yàn)室感染現(xiàn)象。再者，生物安全柜本身的空氣污染監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確性比較高，即便是在生物安全柜工作狀態(tài)下就是生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下，雖然柜中空氣與柜外空氣的質(zhì)量存在明顯差異，但是柜中空氣中的細(xì)菌數(shù)量明顯小于柜外空氣中的細(xì)菌數(shù)量。

生物安全柜柜內(nèi)本身是由特殊氣流組織結(jié)構(gòu)與高效空氣過濾器組成的一種具有箱型屬性特點(diǎn)的凈化功能負(fù)壓裝置，本身具有強(qiáng)大的空氣凈化功能。而生物安全柜柜外則是實(shí)驗(yàn)室，本身是空氣污染易感區(qū)域與高發(fā)區(qū)域，也是人流量大、人員流動(dòng)頻繁區(qū)域，難以維持潔凈空氣，只能通過消毒、殺菌等操作凈化空氣，減少空氣中的細(xì)菌數(shù)量。而生物安全柜中可通過負(fù)壓引流，讓污染物跟隨壓力順著通道在壓力通風(fēng)口環(huán)繞。而生物安全柜操作臺(tái)中的氣凝膠也可順著氣流與污染物一起進(jìn)入后排網(wǎng)柵，其中70%可通過進(jìn)風(fēng)過濾器再次過濾后回到工作區(qū)，30%則會(huì)順著過濾器進(jìn)入房間內(nèi)或是房間外，保護(hù)級(jí)別、保護(hù)功能比較強(qiáng)大。因此，生物安全柜中的細(xì)菌數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于柜外。

由上可知，生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下空氣細(xì)菌污染監(jiān)測(cè)效果顯著。