劉天奇， 雷 彬， 徐首紅， 劉洪來

（華東理工大學上海多級結構納米材料工程技術研究中心，化學與分子工程學院，上海 200237）

為了實現藥物的靶向輸送和可控釋放，各種能夠響應環(huán)境刺激如pH[15-16]、溫度[17-18]、光[19-20]、氧化還原電位[21-22]、超聲波[23-24]、酶[25]等的刺激響應型聚合物膠束被不斷發(fā)展起來。由于腫瘤細胞的惡性增殖、營養(yǎng)缺乏導致糖酵解和乳酸積累，使腫瘤部位具有不同于正常組織的pH 值，如相比于正常的組織環(huán)境（pH=7.2～7.4），腫瘤組織的pH 為6.4 左右，并且腫瘤細胞內從早期核內體（pH=6.0～6.5），晚期核內體（pH=5.0～6.0）到溶酶體（pH=4.5～5.0）也存在著pH 梯度變化，所以pH 刺激常被作為設計刺激響應型藥物載體的內源刺激[26-28]。聚甲基丙烯酸二異丙胺基乙酯（PDPA）就是能夠響應pH 刺激的聚合物，在不同的pH 環(huán)境下能夠發(fā)生質子化或去質子化，從而使親疏水性發(fā)生改變。光是一種非接觸式的外源刺激，波長和強度都能夠被遠程控制，也常被應用于藥物載體的設計中。偶氮苯（AZO）是光響應型的官能團，偶氮苯分子存在順式和反式兩種異構體，在紫外或可見光照射下能夠發(fā)生可逆的光異構化反應，從而引起空間結構或親疏水性的變化[29-32]。

多重刺激響應型聚合物能夠對兩種或多種刺激敏感，能夠適應腫瘤部位復雜的生理環(huán)境，在癌癥的藥物遞送和治療中顯示出了巨大的潛能。本文設計、合成了3 種具有不同聚合度的pH 和光雙重敏感的聚合物C10-AZO-C10-PDPAn-聚乙二醇（PEG45）（n=30,50,80），并探究聚合物的雙重敏感性以及聚合物形成的膠束的基本性質，進而篩選出適合腫瘤部位藥物遞送的聚合物C10-AZO-C10-PDPA30-PEG45，研究此聚合物包載抗癌藥物阿霉素的體外釋放行為以及其生物相容性。

1 實驗部分

1.1 實驗試劑及設備

甲基丙烯酸二異丙胺基乙酯（DPA，w=98%，百靈威科技有限公司）；聚乙二醇單甲醚(mPEG2000,w=98%，百靈威科技有限公司)；2-溴代異丁酰溴(w=98%,百靈威科技有限公司); N,N,N',N″,N″-五甲基二亞乙基三胺(PMDETA, 分析純,上?；晒I(yè)發(fā)展有限公司)；CuBr(分析純，經冰醋酸、乙醇洗滌3 次,干燥后待用)；芘（w=99%，上海阿拉丁生化科技股份有限公司）; 鹽酸型阿霉素（DOX·HCl，w=98%，百靈威科技有限公司）；四氫呋喃（THF，分析純，上海泰坦試劑有限公司，使用前重蒸除水）；甲醇（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；二氯甲烷(分析純, 上海泰坦試劑有限公司，使用前經氫化鈣處理)；中性三氧化二鋁（200～300 目（75～48 μm），上海蓮花有限公司），堿性三氧化二鋁（200～300 目（75～48 μm），上海蓮花有限公司）；人肝癌細胞株（Huh7 細胞，美國菌種保藏ATCC），人腎上皮細胞系（HEK-293T，美國菌種保藏ATCC），細胞毒性試劑盒（CCK-8, 日本同仁化學研究所）、無血清培養(yǎng)基(DMEM, 美國Gibco 公司)、熱滅活胎牛血清（FBS, 美國Gibco 公司）。

動態(tài)光散射儀（DLS, Zetasizer Nano ZS90，英國馬爾文公司）；紫外-可見分光光度計（UV-2450，日本島津公司）；熒光分光光度計（F-4500，日本日立公司）；凝膠滲透色譜儀（GPC，PL-GPC50，英國馬爾文公司）；透射電子顯微鏡（TEM，JEM-1400，日本電子株式會社）；核磁共振測定儀(NMR, AVANCEⅢ 500，德國 Bruker 公司)；倒置顯微鏡（EVOS x1，美國AMG公司）；熒光顯微鏡（EVOS FL，美國AMG 公司）；微孔板分光光度計（xMark Microplate Spectrophotometer，美國Bio-Rad 公司）。

1.2 分子引發(fā)劑C10-AZO-C10-OBr 的合成

在干燥的單口燒瓶中加入0.4211g C10-AZOC10-OH（8.6×10?4mol），用14 mL 二氯甲烷溶解，在冰水浴攪拌的條件下用注射器逐滴加入300 μL 三乙胺和300 μL 2-溴異丁酰溴，停止冰水浴，避光室溫反應30 h。反應結束后，向反應液中加入少量活性炭，攪拌30 min 進行抽濾，濾餅用二氯甲烷沖洗3 遍，取濾液，用旋蒸法除去其中的二氯甲烷溶劑，得到黃色黏稠狀產物。

1.3 C10-AZO-C10-PDPAn-Br 的合成

通過原子轉移自由基聚合（ATRP）聚合的方法接枝聚合物。以C10-AZO-C10-OBr 作為引發(fā)劑，PMDETA作為配體，CuBr 作為催化劑，用MgSO4處理過的CH2Cl2作為溶劑，按照物質的量之比n(DPA)∶n(C10-AZOC10-OBr)∶n(CuBr)∶n(PMDETA)=m∶1∶1∶1.1（ m=30、50、80，合成3 種PDPA 鏈長不同的聚合物）的比例將藥品分別放入Schlenk 瓶中，加6 mL 溶劑CH2Cl2。經過3 次液氮冷凍-抽真空-溶解，在冷凍、氮氣保護的條件下加催化劑CuBr，于室溫避光條件下反應12 h。反應結束后，通入空氣，無水無氧體系被破壞，反應停止，此時溶液呈深綠色。將反應液通過裝有中性氧化鋁的柱子，用THF 作洗脫液除去CuBr。通過旋蒸和在冷凍的無水甲醇中沉降的方法除去溶劑以及未反應的單體DPA、配體PMDETA，收集產物，得黃色黏稠狀聚合物，通過1H-NMR 以及 GPC 檢測產物純度。

1.4 C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45 的合成

首先將1.00 g mPEG45溶解在10 mL 新蒸的THF中，在冰水浴條件下，加入0.04 gNaH 并反應3 h，活化PEG 中的羥基，再加入新蒸的THF 溶解的C10-AZO-C10-PDPAn-Br，室溫避光反應2.5 h。反應完全后旋蒸，無水甲醇沉降3 次，得到黃色黏稠狀產物。用1H-NMR 確定產物的結構，用GPC 檢測聚合物的相對分子量（Mn）和分布系數（PDI）

毛澤東同志說，正確的政治路線確定之后，干部就是決定的因素。在高等教育大變革和大發(fā)展的態(tài)勢之下，地方高校怎樣抓住“黃金發(fā)展期”，將改革與發(fā)展推上一個新的高度，刻不容緩地擺在了各級各類地方高校的黨委面前。筆者認為從中觀層面入手，就是要選好用好中層領導干部，以此為抓手，不斷提升地方高校的核心競爭力。

1.5 嵌段聚合物的物性表征

1.5.1 聚合物pH 敏感點的測定 配制質量濃度為0.3 mg/mL，pH 3.0 的酸性聚合物溶液C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80）。用一定濃度的NaOH溶液調節(jié)溶液的pH，用DLS 和紫外-可見分光光度計測定溶液在不同pH 下的電位、透射率的變化，以電位或透射率值為縱坐標，pH 值為橫坐標作圖。

1.5.2 聚合物光敏感性的測定 配制質量濃度為0.3 mg/mL，pH 3.0 的酸性聚合物溶液C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80），置于紫外分光光度計的比色皿中，用365 nm 的紫外光每隔5 s 或10 s 照射（至曲線不再變化），然后再用470 nm 的可見光照射至曲線不再發(fā)生變化，在此過程中實時檢測溶液的紫外吸收值。

以芘作為熒光探針測定聚合物在水溶液中的臨界膠束濃度（CMC）。首先配制芘在水中的飽和溶液，然后把一定量的C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80）的THF溶液置于玻璃試管中，用吹風機使THF 揮發(fā)干凈，然后加入2 mL 芘的飽和溶液，使聚合物芘溶液的初始質量濃度為0.2 mg/mL，接下來用芘飽和溶液不斷稀釋，在此過程中，設定熒光分光光度計的激發(fā)波長為334 nm，檢測不同質量濃度的聚合物芘溶液在373 nm以及384 nm 處的熒光強度，以熒光強度比值（I373/I384）為縱坐標，聚合物芘溶液質量濃度的對數值為橫坐標作圖，其突變點即為CMC 值。

1.6 聚合物膠束的制備

使用溶劑揮發(fā)法制備聚合物膠束。首先配制6 mg/mL 的聚合物C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80）的THF 溶液，取100 μL 到棕色小瓶中，在攪拌下逐滴加入2 mL、pH 7.4 的磷酸鹽緩沖溶液（PBS）（1 mmol/L），繼續(xù)攪拌12 h，使溶液中的THF 揮干，得到質量濃度為0.3 mg/mL 的膠束溶液。對于載藥的聚合物膠束，在把聚合物的THF 溶液轉移到棕色小瓶后，加入鹽酸型阿霉素（DOX·HCl）和適量三乙胺，攪拌1 h，使親水性鹽酸型阿霉素轉變?yōu)槭杷腄OX，以便包載在膠束的疏水核中，再逐滴加入pH 7.4 的PBS 緩沖溶液，使藥物的最終質量濃度為0.5 mg/mL，繼續(xù)攪拌12 h，用分子截留量為14000g/mol的透析袋透析除去未被包載的DOX。所形成聚合物膠束的粒徑、電位用DLS 表征，形貌特征用TEM 表征。檢測包裹在膠束中的DOX 在480 nm 處的吸收值，得到DOX的包載量（DLC）及包封率（DLE）。公式如下：

其中：mB1為膠束中的藥物質量，mg；mC1為總膠束質量，mg；mC2為總藥物質量，mg。

1.7 C10-AzO-C10-PDPA30-mPEG45 膠束的藥物釋放

把8mL 包 載 DOX 的 C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45膠束溶液分別取1 mL 裝入6 個透析袋中，然后分別放入裝有25 mL PBS 緩沖液（pH 分別為5.0、6.4、7.4）的兩組離心管中，其中一組預先用365 nm的紫外光照射60 s，之后把兩組離心管一起放入恒溫振蕩箱中振蕩，每隔一定時間用紫外-可見分光光度計測定離心管中緩沖液在480 nm處的紫外吸收值，從而確定藥物釋放量。8 mL 中剩余的2 mL 膠束溶液加入HCl 溶液解離，用以測定膠束中包載的總藥量。DOX 累計釋放量以I1/I2×100%表示，其中：I1為不同時間膠束中釋放出DOX 的紫外吸收強度；I2為膠束包載的總DOX 的紫外吸收強度。

1.8 細胞存活率實驗

人肝癌細胞系Huh7 和人腎上皮細胞系HEK-293T 均來自于美國ATCC 細胞庫，這兩款細胞都在DMEM 培養(yǎng)液中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中同時加入100 U/mL青霉素、100 U/mL 硫酸鏈霉素和10%（體積分數）FBS，并將細胞放在37 ℃、含5%（體積分數）二氧化碳的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

空膠束的細胞毒性：在96 孔板上接種人肝癌細胞系Huh7 或人腎上皮細胞系HEK-293T 細胞（104個細胞/孔），培養(yǎng)過夜。然后加入不同質量濃度的空膠束（7.5～225 μg/mL），共孵育8 h 后換成新鮮培養(yǎng)液再繼續(xù)培養(yǎng)16 h，在每個孔中加入10 μL CCK-8 中的試劑，將培養(yǎng)板置于培養(yǎng)箱中孵育1 h，然后用酶標儀檢測450 nm 處的吸光度。

2 結果與討論

2.1 嵌段聚合物的合成及表征

嵌段聚合物的合成路線如圖1 所示。首先用C10-AZO-C10-OH 和2-溴異丁酰溴反應合成C10-AZOC10-OBr，然后將其作為引發(fā)劑，用ATRP 法合成聚合物C10-AZO-C10-PDPAn（n=30,50,80），最后接枝親水性的mPEG2000，得到具有pH 和光雙重敏感的兩親性聚合物C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80）。

每一步合成產物的1H-NMR 如圖2 所示，圖中(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ) 分 別 為C10-AZO-C10-OBr，C10-AZOC10-PDPAn和C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45的1H-NMR譜圖。(Ⅰ)中a 處對應于AZO 上苯環(huán)的特征峰，b（δ=1.96）處的峰歸屬于Br?C?（CH3）2上的質子。(Ⅱ)中 c（δ=1.01）處的強峰歸屬于異丙基的甲基質子，是PDPAn的特征峰，表明了PDPAn的成功連接。(Ⅲ)中d（δ=3.63）處出現了mPEG45中重復單元?CH2CH2O?上質子的特征峰，說明mPEG45的成功修飾。綜上，說明成功制備了嵌段聚合物。

圖1嵌段聚合物合成路線Fig.1Synthesis route of C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45 block copolymer

圖2(Ⅰ) C10-AZO-C10-OBr、(Ⅱ) C10-AZO-C10-PDPAn 和(Ⅲ) C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45 在CDCl3 中的1H-NMR 譜圖Fig.21H-NMR spectra of (Ⅰ) C10-AZO-C10-OBr, (Ⅱ) C10-AZO-C10-PDPAn and (Ⅲ) C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45 in CDCl3

同時，GPC 檢測結果進一步證明了嵌段聚合物的成功合成。表1 列出了合成聚合物C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80）的組成、數均分子量和分散系數（PDI）。從表1 可以看到，隨著PDPA 聚合度的增加，數均分子量增大。聚合物的PDI 值偏大，可能是合成聚合物時，存在少量未反應的C10-AZO-C10-PDPAn-OBr，且不溶于無水甲醇，導致PDI 偏大。

通過測定嵌段聚合物在不同pH 環(huán)境下的透射率和電位的變化來確定pH 敏感點，結果如圖3 所示。當pH<5.5 時，嵌段聚合物溶液澄清透明，透過率近乎100%；隨著NaOH 溶液的滴加，PDPA 逐漸開始脫質子化，由親水性變成疏水性，溶液逐漸變得渾濁，從而確定pH 敏感點。如圖3（a）所示，pH 敏感點為6.3～7.2，且隨著PDPA 聚合度的增加，嵌段聚合物的pH 敏感點略有增大。這可能是因為PDPA 鏈段越長，其從親水性轉變?yōu)槭杷愿鼮槔щy，需要更多的OH?用以脫質子化。另一方面，隨著pH 的升高，Zeta電位開始下降，這是由于在pH<5.5 時，存在大量H+，因而溶液為正電性；隨著NaOH 的量逐漸增多，電位由正轉為負（如圖3（b）所示）。Zeta 電位的結果和透過率法測出的嵌段聚合物pH 敏感點基本一致。

表1C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45 共聚物的分子量和分散系數Table1Molecular weight and dispersity index(PDI) of C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45 copolymers

嵌段聚合物的光敏感性可以通過測定聚合物溶液在不同光照下的紫外吸收值來確定。其中偶氮苯以反式（trans-）構型存在，在350 nm 處有一個強的特征吸收峰，順式（cis-）偶氮苯在440 nm 處有較強的吸收峰。從圖4（a）、4（c）、4（e）的實驗結果看出，當用365 nm 的紫外光照射0.3 mg/mL 的各聚合物C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80; pH=3）溶液時，隨著光照時間的增加，350 nm 處的紫外吸收值逐漸減小，440 nm 處的峰值略有增高，反式構型的AZO 逐步向順式構型轉變，當光照時間約為20 s 以上時，紫外吸收曲線均不再發(fā)生變化，說明反式偶氮苯向順式偶氮苯轉化已達到平衡。之后再用470 nm 的可見光照射，結果如圖4（b）、4（d）、4（f）所示，在350 nm左右處的吸收峰強度逐漸增強，440 nm 處的吸收峰強度逐漸減弱，順式構型的AZO 逐步向反式構型轉變。實驗發(fā)現3 種聚合物在可見光分別照射5、10、35 s之后，順式偶氮苯又向反式偶氮苯轉化并且達到平衡，其中，C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45反異構化速度最快，表明連接較大尺寸的聚合物可能會阻礙反異構化的進行。同時，與紫外光照前相比，光照后350 nm處的吸收值有所降低，440 nm 處的吸收值略有升高，表明偶氮苯不能完全回復到紫外光照前的狀態(tài)，這可能是由于PDPA 嵌段對AZO 基團的異構化具有一定的阻礙作用[33]。以上結果說明聚合物具有可逆的光敏感性。

2.2 嵌段聚合物膠束的物性

CMC 值是嵌段聚合物形成膠束最基本的物性參數。本文利用芘作為熒光探針，測得各聚合物C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80）的CMC值分別為1×10?1、1×10?2、1×10?2mg/mL（圖5（a）），且隨著PDPA 聚合度的增加而減小。這可能是由于PDPA 鏈長越長，形成膠束時疏水聚集能力越強，越容易形成膠束，因此CMC 值越小。通過DLS、TEM表征所形成膠束的粒徑以及形貌，結果如圖5（b）、5（c）所示，可見各聚合物形成球狀且粒徑分布均勻的膠束，PDPA 聚合度為30、50、80 的聚合物膠束平均直徑分別在140、200、220 nm 左右。在pH=7.4 的PBS（1 mmol/L）緩沖液中，嵌段聚合物所形成膠束的平均直徑隨著PDPA 聚合度的增加而增大。原因可能在于PDPA 疏水嵌段越長，所形成膠束疏水內核越大，膠束直徑就越大。通過TEM 所觀察到的粒徑大小和DLS 的測定結果基本一致。

2.3 聚合物膠束的體外模擬釋藥

圖3不同pH 環(huán)境下聚合物膠束溶液的（a）透射率及（b）Zeta 電位的變化（聚合物膠束溶液質量濃度0.1 mg/mL）Fig.3(a) Transmittance and (b) Zeta potential of polymeric micelle solution in different pH environments(Mass concentration of copolymeric micelle solution: 0.1 mg/mL)

圖4反式 (a) C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45, (c) C10-AZO-C10-PDPA50-mPEG45, (e) C10–AZO-C10-PDPA80-mPEG45 受到不同時間紫外光（365 nm）照射后的紫外吸收譜圖; 順式 (b) C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45, (d) C10-AZO-C10-PDPA50-mPEG45,(f) C10-AZO-C10-PDPA80-mPEG45 受不同時間可見光（470 nm）照射后的紫外吸收譜圖Fig.4Ultraviolet absorption spectra after irradiation of ultraviolet (365 nm) after different time intervals of trans-(a) C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45, (c) C10-AZO-C10-PDPA50-mPEG45, (e) C10-AZO-C10-PDPA80-mPEG45; Ultraviolet absorption spectra after irradiation of visible light (470 nm) after different time intervals of cis-(b) C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45, (d) C10-AZO-C10-PDPA50-mPEG45,(f) C10-AZO-C10-PDPA80-mPEG45

人體正常生理環(huán)境的pH 約為7.4，腫瘤微環(huán)境為弱酸性，pH 約為6.5，腫瘤細胞內部環(huán)境的pH 更低，約為5.5～6.5[34]。本文選取了pH 敏感點為6.3 左右的嵌段聚合物C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45制備膠束，作為抗癌藥物DOX 的載體進行體外模擬釋藥，載藥量為12.1%±1%。

選取pH 為5.0、6.4 和7.4 這3 種pH 環(huán)境進行藥物釋放研究。DOX 的釋藥結果如圖6 所示，累計釋藥量隨著環(huán)境pH 值的降低而增大。在pH=7.4 時，25 h 后的累計釋藥量約為11.3%±4%，說明在人體正常生理環(huán)境下，聚合物膠束能夠有效地包載DOX，藥物泄漏量少。在pH=6.4 和pH=5.0 條件下，相應的DOX 最終平衡累計釋藥量分別約為59.6%±5%，81.0%±5%。這是因為溶液酸性越強，聚合物PDPA 嵌段越容易發(fā)生質子化，從疏水性逐漸變成親水性嵌段，引起膠束結構動搖從而釋放包裹在膠束疏水層內的DOX。

圖5(a)聚合物C10-AZO-C10-PDPAn-mPEG45（n=30,50,80）的臨界膠束濃度隨熒光強度比值I373/I384 變化曲線（pH=7.4）；(b)聚合物膠束的粒徑分布圖（pH=7.4）；(c) 聚合物膠束的透射電鏡圖（pH=7.4）Fig.5(a) Florescence intensity ratio (I373/I384) versus logarithm of critical micelles concentrations（ C10-AZO-C10-PDPAnmPEG45（n=30,50,80））; (b) Size distribution of the copolymer micelles; (c) Transmission electron micrographs of copolymer micelles(pH=7.4)

圖6聚合物C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45 在不同pH 和紫外光照射條件下的累計釋放曲線Fig.6Accumulated release curves of C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45 in different pH under irradiation of UV light

同時，考察了紫外光刺激后的釋藥效果。在開始釋藥前，用365 nm 的紫外光照射各個pH 下的載藥樣品，發(fā)現其釋藥率都增加了約10%左右。這是因為部分疏水性DOX 包裹在C10-AZO-C10嵌段所形成的疏水層中，紫外光照使AZO 由反式構象變?yōu)轫樖綐嬒?，導致膠束的疏水層發(fā)生擾動，促進了DOX 的釋放。

2.4 聚合物C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45 空白膠束的細胞毒性

為了檢測聚合物C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45膠束本身的生物相容性，分別用人肝癌細胞系Huh7和人腎上皮細胞系HEK-293T 與不同質量濃度的C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45膠束共孵育8 h，然后換成新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)孵育16 h，用細胞毒性試劑盒（CCK-8）檢測細胞的存活率。實驗結果如圖7 所示，與不同質量濃度的空白膠束作用后這兩個細胞系的細胞存活率依然很高，即使空白膠束質量濃度高達225 μg/mL，Huh7 和HEK-293T 細胞的存活率仍保持在90%以上，這說明聚合物C10-AZO-C10-PDPA30-mPEG45膠束無論是對肝癌細胞還是對正常細胞其毒性都極小，表明此聚合物膠束具有良好的生物相容性，適合作為藥物載體。

圖7不同質量濃度的聚合物空白膠束對Huh7 和 HEK-293T 的細胞毒性Fig.7Cytotoxicity to Huh7 and HEK-293T cells at different mass concentrations of copolymer micelle

3 結 論

（1）利用腫瘤細胞微環(huán)境的特點，設計合成了同時具有pH 響應和紫外光響應的嵌段共聚物，通過自組裝過程制備pH/光可控釋藥載體。

（2）首先測得了各聚合物C10-AZO-C10-PDPAnmPEG45（n=30,50,80）的各項物理化學性質，其CMC 值分別1×10?1、1×10?2、1×10?2mg/mL，而 其粒徑也在140～220 nm之間，滿足EPR 效應的基本要求。

（3）嵌段聚合物在不同pH 環(huán)境下表現出不同的親、疏水性，且受到聚合物嵌段長度的影響而具有不同的pH 敏感點，其敏感點在6.3～7.2 之間。

（4）通過對嵌段聚合物的紫外光響應性能考察，證實了AZO 基團的順反結構可以在365 nm 的紫外光和470 nm 的可見光照射下發(fā)生可逆轉換，照射下具有良好的光響應性能。

（5）驗證了聚合物在水相中具有優(yōu)良的pH/光雙敏感可控性，通過照射可使原先pH 敏感的聚合物膠束的釋藥率提高10%左右，而細胞毒性實驗表明所獲得的聚合物膠束不論是在低質量濃度（7.5 μg/mL）下還是在較高質量濃度（225 μg/mL）下都有較高的生物相容性，可以預見該pH/光雙敏感的聚合物膠束在靶向藥物載體研制領域具有良好的應用前景。