宮瑞澤，陸雨順，張 磊，李志滿，李珊珊，孫印石

基于中藥質(zhì)量標志物（Q-Marker）的鹿茸質(zhì)量控制標準體系構(gòu)建

宮瑞澤，陸雨順，張 磊，李志滿，李珊珊，孫印石*

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林 長春 130112

鑒于鹿茸質(zhì)量控制存在基原復(fù)雜、品種混亂，質(zhì)量評價標準匱乏等問題，鹿茸質(zhì)量控制標準體系建設(shè)亟待加強。中藥質(zhì)量標志物（quality marker，Q-Marker）的提出及鹿茸中一些相對特異的化學(xué)成分逐漸被科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，為鹿茸質(zhì)量評價提供了新的契機。詳細概括了目前鹿茸質(zhì)量控制存在的問題，深度辨析了鹿茸Q-Marker的篩選原則，確定其Q-Marker為羥脯氨酸、硫酸軟骨素和γ-氨基丁酸，系統(tǒng)構(gòu)建了鹿茸質(zhì)量評價標準體系，為推動鹿茸質(zhì)量控制標準提升和規(guī)范鹿業(yè)市場提供了保障，有利于鹿業(yè)的健康、有序發(fā)展。

鹿茸；質(zhì)量控制；質(zhì)量標志物；五原則；羥脯氨酸；硫酸軟骨素；γ-氨基丁酸；生產(chǎn)全過程質(zhì)量控制；質(zhì)量控制標準體系

動物藥素有“血肉有情之品”的美譽，且多具“行走通竄之功”，自古以來便是醫(yī)家必備之良藥。但由于動物藥成分復(fù)雜，多數(shù)動物藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確，以致動物藥的質(zhì)量控制水平較低、品控指標與藥效關(guān)聯(lián)不強問題尤為突出[1]?！吨袊幍洹?020年版一部共收載動物藥50余種，其中僅30種載有鑒定方法，但多以顯微和薄層鑒定為主，專屬性、特異性較差；僅十幾種載有含量測定項；鹿角、鹿角霜、蛇蛻等常用動物藥項下無任何鑒定和含量測定方法[2-3]。總體而言，動物藥的品質(zhì)評價、有效成分和藥理活性等研究亟待加強。

鹿茸系“東北三寶”之一，位居動物藥之首，是臨床廣泛使用的補益類貴細中藥材。鹿茸是鹿科動物梅花鹿Temminck或馬鹿Linnaeus雄鹿未骨化密生茸毛的幼角，具有壯腎陽、益精血、強筋骨、調(diào)沖任、托瘡毒的功效[2-3]?！吨袊幍洹?020年版中收錄含鹿藥味藥品47種；原衛(wèi)生部藥品標準中收錄含鹿藥味藥品198種；國家藥品監(jiān)督管理局登記含鹿藥味藥品911種，含鹿藥味保健食品222種。鹿茸每年在中藥大品種進出口貿(mào)易額中占比超過60%，鹿茸在中藥產(chǎn)業(yè)及國民經(jīng)濟中占據(jù)重要地位。

近年來，隨著新西蘭赤鹿茸、俄羅斯馴鹿茸等國外大量魚龍混雜鹿茸源源不斷輸入國內(nèi)，中國鹿產(chǎn)業(yè)受到了嚴重的沖擊；北鹿南引進一步擴大了梅花鹿的養(yǎng)殖范圍，道地產(chǎn)區(qū)概念逐漸模糊；部分養(yǎng)殖戶打著半野生半散養(yǎng)的概念高價銷售家養(yǎng)鹿茸。國內(nèi)鹿茸不規(guī)范的養(yǎng)殖、采收、加工、炮制和管理，導(dǎo)致市售鹿茸摻假使假現(xiàn)象時有發(fā)生，嚴重動搖了鹿茸動物藥之首的行業(yè)地位。因此規(guī)范鹿產(chǎn)業(yè)市場已成為行業(yè)廣泛共識。但一直以來困擾業(yè)界最大的難題便是鹿茸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確，以何指標評價鹿茸質(zhì)量尚無定論。數(shù)十年來科學(xué)家們并未發(fā)現(xiàn)鹿茸中的特異性成分，這已然成為影響鹿產(chǎn)業(yè)發(fā)展“卡脖子”的問題。

2016年劉昌孝院士[4]創(chuàng)新性地提出中藥質(zhì)量標志物（quality marker，Q-Marker）的概念，即中藥材和中藥產(chǎn)品中固有的或加工制備過程中形成的、與中藥功能屬性密切相關(guān)的化學(xué)物質(zhì)，能反映中藥安全性和有效性的標示性物質(zhì)，Q-Marker具有中醫(yī)藥理論相關(guān)性、特有性、有效性、可測性和傳遞與溯源性等特征[5-6]。此外，鹿茸中一些相對特異的化學(xué)成分逐漸被科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，這給鹿茸質(zhì)量評價提供了非常好的契機。因此加快鹿茸質(zhì)量控制標準體系構(gòu)建已成為當(dāng)務(wù)之急。

本文概括了目前鹿茸質(zhì)量控制存在的問題，深度辨析了鹿茸Q-Marker的篩選原則，系統(tǒng)構(gòu)建了鹿茸質(zhì)量評價標準體系，為鹿茸質(zhì)量控制標準提升和規(guī)范鹿業(yè)市場提供了保障，有利于鹿業(yè)健康有序發(fā)展。

1 鹿茸質(zhì)量控制存在的問題

1.1 基原復(fù)雜，品種混亂

《中國藥典》2020年版一部中明確規(guī)定正品鹿茸的基原為鹿科動物梅花鹿和馬鹿雄鹿未骨化密生絨毛的幼角[3]，但目前市場上鹿茸的基原混雜，一些偽品充斥市場，包括赤鹿Zimmermann、馴鹿Linnaeus、駝鹿Linnaeus、白唇鹿Przewalski和水鹿Kerr等，其中尤以赤鹿、馴鹿和駝鹿最多[7]。造成這種亂象的主要原因是鹿科動物物種豐富，包括梅花鹿、馬鹿、馴鹿等在內(nèi)的55種鹿科動物均長有大小、形狀不一的鹿角，然而鹿茸的基原鑒別研究滯后。近年來，特異性多聚酶鏈式反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）鑒別手段為鹿茸的基原鑒別提供了新思路，魏藝聰?shù)萚8]采用分子生物學(xué)技術(shù)建立了基于和序列的梅花鹿、馬鹿和雜交鹿鹿茸的分析鑒別方法。但鹿茸系高溫煮炸、烘烤加工后的中藥，DNA在加工過程中受熱易降解，易產(chǎn)生假陽性且易受偽品遺傳物質(zhì)的干擾難于鑒別。

另一方面，養(yǎng)殖梅花鹿和馬鹿品種混亂，良種登記體系不健全。鹿科動物在我國分布廣泛，其中梅花鹿包括東北亞種、四川亞種、華北亞種、華南亞種、山西亞種和臺灣亞種6個種，馬鹿包括天山亞種、塔里木亞種、阿爾泰亞種、東北亞種、阿拉善亞種、甘肅亞種、四川亞種和西藏亞種8個種。家養(yǎng)梅花鹿有地方品種吉林梅花鹿1個種和培育品種雙陽、西豐、東豐、四平、東大、敖東、興凱湖梅花鹿7個，這些品種大多具有遺傳性能穩(wěn)定、產(chǎn)茸性能高的特點[1]。但近年來，不規(guī)范的引種、繁育、雜交，不透明的鹿種交換，不健全的良種登記體系，致使大部分品種及品系已失去傳統(tǒng)的遺傳特性，梅花鹿養(yǎng)殖業(yè)面臨無種可用的窘境。更有甚者，為片面追求經(jīng)濟效益，枉顧政策法規(guī)，鉆質(zhì)量評價標準體系不完善的漏洞，私自將梅花鹿和馬鹿雜交，嚴重影響了鹿茸遺傳品質(zhì)的穩(wěn)定性。

1.2 引種和飼養(yǎng)管理不規(guī)范

民國時期《增訂偽藥條辨》中明確記載：“鹿茸……東三省產(chǎn)及青海、新疆均佳。須顏色紫紅明潤有神，頂圓如饅頭式者佳”?！端幬锍霎a(chǎn)辨》亦載：“鹿茸產(chǎn)中國邊境，長白山為最佳，關(guān)東亦佳”。因此，自古以來東三省尤其是長白山地區(qū)便是公認的鹿茸道地產(chǎn)區(qū)。但近年來，全國各地大力發(fā)展中藥材人工栽培、馴養(yǎng)和引種，由于未充分考慮藥材的道地性和藥用植物、動物生長環(huán)境（氣候、溫度、光照等因素）的適宜性，致使一些偽劣品進入中藥材市場。這些偽劣品嚴重影響了中藥質(zhì)量和臨床療效，損害了中藥聲譽，是影響中藥現(xiàn)代化和國際化的重要原因之一。

雖然梅花鹿和馬鹿經(jīng)過長期的人工馴化已最大程度適應(yīng)圈養(yǎng)環(huán)境，但其目前仍是半馴化家養(yǎng)動物。不科學(xué)的圈舍結(jié)構(gòu)、不規(guī)范的飼養(yǎng)管理仍會造成鹿茸生產(chǎn)性能降低，品質(zhì)下降。與此同時，梅花鹿和馬鹿在飼養(yǎng)過程中受布魯氏桿菌、結(jié)核桿菌等多種病原微生物的困擾，致使四環(huán)素等抗生素被廣泛使用，抗生素的濫用進一步增加了鹿茸中的風(fēng)險因子；在摸清鹿茸生茸機制是孕酮與雄激素相互拮抗調(diào)控的基礎(chǔ)上，不少養(yǎng)殖戶為片面追求經(jīng)濟效益，在二茬茸生長階段非法使用醋酸氯地孕酮等激素拮抗雄性激素和孕酮，抑制組織骨化，增加二茬茸產(chǎn)量[9]，但這種激素催生的二茬茸成分和功效與正常二茬茸是否一致未見報道，非法使用的激素在二茬茸中的殘留量及對人體的危害尚不明晰。

1.3 采收、加工和炮制夠不科學(xué)

1.3.1 采收 傳統(tǒng)鹿茸采收采用的是人工吊圈的方式，即以物理器械對梅花鹿和馬鹿進行固定后直接鋸取鹿茸，吊圈收茸費時費力且易造成鹿茸及動物損傷。近年來，考慮到動物福利等因素，目前國內(nèi)大部分鹿場均采用先麻醉后鋸茸的方式采收鹿茸，黃勝廣等[10]報道了鹽酸賽拉嗪等麻醉劑在鹿茸中的殘留，但其對鹿茸功效及安全性的影響未見報道，究竟應(yīng)當(dāng)采取何種方式采收鹿茸有待進一步研究。

1.3.2 加工 目前主產(chǎn)區(qū)最常采用的初加工方法仍然是熱水煮炸法。熱水煮炸法是一種傳統(tǒng)的鹿茸產(chǎn)地初加工技術(shù)，包括水煮、烘烤、風(fēng)干等步驟，重復(fù)多次直至干燥。煮炸能有效消除鹿茸中的病原微生物，使茸頭飽滿有型、茸皮光鮮亮麗，但煮炸過程繁瑣且耗時較長，稍有不慎易造成茸皮破裂、茸頭干癟等問題，影響成品茸品質(zhì)[11]。近年來隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，個別企業(yè)采用冷凍干燥技術(shù)生產(chǎn)凍干茸，凍干技術(shù)能實現(xiàn)快速干燥且最大程度地保留鹿茸中的成分，但其也易保留茸體內(nèi)的病原微生物，存在一定的安全隱患。此外，根據(jù)消費者需求的不同，排血茸和帶血茸也是常見的產(chǎn)地初加工方式。本課題組前期對比分析了不同加工方式鹿茸中蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、礦質(zhì)元素、多糖、膠原蛋白、硫酸軟骨素、核苷、生物胺等成分含量差異發(fā)現(xiàn)，不同加工方式能在不同程度上影響鹿茸中的上述成分[12-20]。但不同加工方式對鹿茸藥理作用及臨床療效的影響未見報道，有待進一步研究。

1.3.3 炮制 《中國藥典》2020年版一部收載的鹿茸炮制品包括鹿茸粉和鹿茸片2種，鹿茸粉系鹿茸直接劈成塊后研成細粉，鹿茸片炮制工藝相對復(fù)雜，具體工藝如下：鹿茸燎去茸毛，刮凈，以布帶纏繞茸體，自鋸口面小孔灌人熱白酒，并不斷添酒，至潤透或灌酒稍蒸，橫切薄片，壓平，干燥[3]。目前市面多以鹿茸片形式流通和使用，鹿茸片又根據(jù)鹿茸切制部位不同分為蠟片、粉片、紗片和骨片，不同部位鹿茸價格差異幾十倍乃至上百倍。本課題組分析了不同炮制品及不同部位鹿茸中化學(xué)成分含量差異發(fā)現(xiàn)，與鹿茸粉相比，鹿茸片中脂肪酸、礦質(zhì)元素等含量未見減少，多糖、核苷等成分略有減少；蠟片比其他部位含有更多的蛋白質(zhì)、氨基酸、硫酸軟骨素等成分[12-19,21]。此外，目前市場上還存在鹿茸超微粉、鮮鹿茸片等多種商品規(guī)格，規(guī)范鹿茸炮制工藝及商品等級勢在必行。

1.4 包裝規(guī)格、儲運條件不明確

鹿茸中含有豐富的蛋白質(zhì)和油脂，存儲不當(dāng)極易腐敗變質(zhì)，現(xiàn)代冷鏈倉儲及物流為鹿茸的保存提供了便利。但部分養(yǎng)殖戶無意識地將新鮮鹿茸、鹿副產(chǎn)品等與成品鹿茸共同存儲，容易造成微生物污染等問題。本課題組曾抽取市售鹿茸中微生物含量檢測發(fā)現(xiàn)，鹿茸中大腸桿菌等微生物含量超標現(xiàn)象普遍，系不規(guī)范加工、儲運等因素導(dǎo)致。因此明確鹿茸及其制品包裝規(guī)格、儲運條件對保障鹿茸品質(zhì)及安全具有重要意義。

1.5 質(zhì)量評價體系不完善，產(chǎn)業(yè)支撐不足

《中國藥典》2020年版鹿茸項下無檢查和含量測定項，鑒別項下僅采用茚三酮、斐林試劑定性檢測氨基酸和還原糖，薄層色譜法以甘氨酸對照品和鹿茸對照藥材在相應(yīng)位置顯相同顏色斑點為鑒別標準，無特異性指標成分，專屬性差[3]。該標準自《中國藥典》1977年版收載且一直沿用至今，40多年一直未作修訂和補充，已不能適應(yīng)當(dāng)下快速發(fā)展的產(chǎn)業(yè)需求。鹿茸質(zhì)量控制指標成分的缺失和質(zhì)量標準體系的不完善，在很大程度上導(dǎo)致市售鹿茸摻假使假現(xiàn)象的發(fā)生，嚴重阻礙了鹿業(yè)的深度發(fā)展。

此外，話語權(quán)最重的國家標準中沒有鹿茸質(zhì)量評價標準，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所等單位負責(zé)起草的國家標準《梅花鹿茸分等質(zhì)量》《馬鹿茸分等質(zhì)量》《鹿茸加工技術(shù)規(guī)程》3項國家標準已通過國家標準委批復(fù)，待發(fā)布實施。在現(xiàn)行的其他標準中，中華中醫(yī)藥學(xué)會團體標準DB 22/T 1055-2011和T/CACM 1021.58-2018均以外觀性狀為依據(jù)進行品質(zhì)等級劃分；NY/T 1162-2006和DB 22/T 1143-2009以水分、鈣、氨基酸、重金屬和微生物作為限量指標。這些標準普遍存在標準覆蓋范圍窄、質(zhì)量評價指標專屬性差且不合理、重金屬和微生物含量限量標準不一致等問題，鹿茸藥材質(zhì)量控制成分篩選和品質(zhì)評價標準亟待提高。

1.6 市場監(jiān)督管理缺位

梅花鹿和馬鹿屬于野生動物（家養(yǎng)梅花鹿和馬鹿屬于特種家養(yǎng)畜禽），歸國家林業(yè)和草原局和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部監(jiān)管；在梅花鹿養(yǎng)殖主產(chǎn)區(qū)吉林省，歸畜牧業(yè)部門監(jiān)管。對于第二產(chǎn)業(yè)來說，鹿茸、鹿角屬于藥品原料，歸國家藥品監(jiān)督管理局監(jiān)管；鹿胎、鹿骨屬于保健食品原料，歸國家市場監(jiān)督管理局特殊食品安全監(jiān)督管理司監(jiān)管；鹿肉、鹿筋屬于食品原料，歸國家市場監(jiān)督管理局食品生產(chǎn)安全監(jiān)督管理司等部門監(jiān)管；鹿皮可以制作服飾，歸國家發(fā)展和改革委員會監(jiān)管。因此鹿是一個典型的多頭管理的產(chǎn)業(yè)，多頭管理、監(jiān)管責(zé)任不清及質(zhì)量評價體系不完善導(dǎo)致鹿茸市場監(jiān)督管理存在缺位。對生產(chǎn)管理的不重視，導(dǎo)致品質(zhì)較差的老鹿、病鹿和淘汰鹿鹿茸及鹿制品流入市場；濫用麻醉劑、增茸素、抗生素及重金屬超標等問題屢屢發(fā)生。上游生產(chǎn)管理的缺位導(dǎo)致中下游中藥材、中藥飲片和中成藥產(chǎn)品質(zhì)量堪憂，同時也限制了鹿皮、鹿尾、鹿鞭、鹿胎等鹿副產(chǎn)品的精深開發(fā)和利用。

總而言之，鹿茸質(zhì)量控制方面存在的問題較多，其中基原復(fù)雜、品種混亂，質(zhì)量評價標準體系不完善等問題尤為突出。鹿茸質(zhì)量控制標準體系建設(shè)任重而道遠。

2 基于“五原則”的鹿茸Q-Marker辨識分析

Q-Marker由劉昌孝院士于2016年創(chuàng)新性地提出，即中藥材和中藥產(chǎn)品中固有的或加工制備過程中形成的、與中藥功能屬性密切相關(guān)的化學(xué)物質(zhì)，能反映中藥安全性和有效性的標示性物質(zhì)。Q-Marker需同時滿足中醫(yī)藥理論相關(guān)性、特有性、有效性、可測性和傳遞與溯源性5大基本原則[22-26]。基于“五原則”的Q-Marker辨識分析對鹿茸Q-Marker的篩選具有重要意義。

2.1 鹿茸中Q-Marker的有效性

有效性是Q-Marker的核心要素，有效性主要體現(xiàn)在藥性、藥效和入血成分及其代謝產(chǎn)物等。鹿茸始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，位列中品，謂：“鹿茸味甘，性溫……主漏下惡血，寒熱驚癇，益智強智，生齒不老”，歷代本草及藥典中均有收載?！吨袊幍洹?020年版鹿茸項下描述包括“味甘、咸；歸腎、肝經(jīng)；具有壯腎陽，益精血，強筋骨，調(diào)沖任，托瘡毒的功效，主治腎陽不足，精血虧損，陽痿滑精，宮冷不孕，羸瘦，神疲，畏寒，眩暈，耳鳴，耳聾，腰脊冷痛，筋骨痿軟，崩漏帶下，陰疽不斂”[3]。

通過對古籍及《中國藥典》的考察不難發(fā)現(xiàn)，藥性方面，鹿茸性溫，具有補腎壯陽之功效，鹿茸可以通過興奮下丘腦-垂體-性腺內(nèi)分泌軸使血液中性激素含量升高。味甘、咸，甘味系其中豐富的多糖、氨基酸等成分，與調(diào)節(jié)機體免疫力、抗骨質(zhì)疏松等藥理功能密切相關(guān)；咸味系其中的礦質(zhì)元素，具有抗菌、抗炎等功效。歸腎、肝經(jīng)，具有壯腎陽功效的鹿茸入腎經(jīng)，符合中醫(yī)認為腎主生殖的理論[27]。藥效方面，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，鹿茸具有抗骨質(zhì)疏松、抗衰老、抗氧化、抗疲勞、抗腫瘤、抗抑郁、抗肝損傷、增強記憶力、提高機體免疫力及性激素樣作用等多種藥理活性[28-35]。呂經(jīng)緯等[36]通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究獲得了鹿茸中的17β-雌二醇、氨基葡萄糖、雌酮、-葡萄糖醛酸等14個成分及306個靶點，發(fā)現(xiàn)了甲狀腺受體相互作用蛋白2、腺苷酸環(huán)化酶1型等26個關(guān)鍵靶點蛋白，進一步揭示了鹿茸在治療骨質(zhì)疏松和抗腫瘤方面具有潛在的優(yōu)勢。

然而，鹿茸中入血成分及其代謝產(chǎn)物的研究相對較少，Yu等[37]通過體外模擬鹿茸胃腸道消化反應(yīng)，采用LC-MS/MS鑒定分析了鹿茸水提物、胃液消化物和胰液消化物中23、387、417個肽段，研究表明膠原蛋白是鹿茸中的主要蛋白質(zhì)，在胃消化物中釋放了34種多肽，在胰消化物中釋放了146種多肽。關(guān)于鹿茸中入血成分及其代謝產(chǎn)物的研究有待進一步加強。

2.2 鹿茸中Q-Marker與中醫(yī)藥理論的相關(guān)性

中藥配伍是中醫(yī)藥理論的核心內(nèi)容，中藥配伍后能顯著影響藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機制，同一藥材在不同處方中以“君、臣、佐、使”發(fā)揮不同的藥效[26]。Q-Marker的篩選要求延伸到臨床應(yīng)用層面，應(yīng)基于中藥臨床應(yīng)用最終效應(yīng)成分及其功效的臨床表達形式確定Q-Marker。林賀等[38]系統(tǒng)整理了自漢至清的中醫(yī)藥典籍發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥古籍和傳統(tǒng)方劑中含鹿茸的方劑包括800余首，充分扮演了“君、臣、佐、使”的角色，鹿茸用量在1分～2斤8兩，大部分用量在2錢～4兩，用法上常與肉蓯蓉、菟絲子、附子、當(dāng)歸、牛膝、人參、五味子等配伍使用，發(fā)揮壯腎陽、益精血、強筋骨之功效。

鑒于中藥方劑“君、臣、佐、使”的配伍原則，鹿茸中Q-Marker的篩選需充分考慮其配伍環(huán)境，一方面應(yīng)與鹿茸“壯腎陽、益精血、強筋骨”的臨床療效密切相關(guān)，另一方面鹿茸中的Q-Marker含量應(yīng)相對較高，避免其在復(fù)方中用量較低時難于檢測。

2.3 鹿茸中Q-Marker的特有性

特有性是中藥鑒別、質(zhì)量控制和評價的核心，具有專屬性，主要體現(xiàn)在2個層次：（1）能代表和反映同一類藥材的共有性并區(qū)別于其他藥材的特征性成分；（2）能反映同一類、不同種藥材之間的差異性成分[25]。鹿茸Q-Marker特有性的內(nèi)涵包含系統(tǒng)演化、親緣關(guān)系學(xué)、生物學(xué)特性和特異性成分等，又與道地產(chǎn)區(qū)，不同形態(tài)、生長階段和產(chǎn)地初加工方式等密切相關(guān)。

2.3.1 鹿茸的共性及區(qū)分于其他物種的特異性

（1）基于系統(tǒng)演化和親緣關(guān)系學(xué)分析的鹿茸Q-Marker篩選：《中國藥典》2020年版一部中明確規(guī)定鹿茸基原為鹿科動物梅花鹿和馬鹿雄鹿未骨化密生絨毛的幼角[3]，但目前市場上鹿茸基原混雜，大量偽品充斥市場，主要包括赤鹿茸、馴鹿茸和駝鹿茸。由于遺傳物質(zhì)的差異，不同物種形態(tài)及化學(xué)成分均會表現(xiàn)出差異，最終影響中藥的療效。

現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展為鹿科動物系統(tǒng)演化和親緣關(guān)系分析提供了可靠的技術(shù)手段，鞠妍等[39]以線粒體DNA序列差異為依據(jù)分析了鹿科動物的系統(tǒng)進化關(guān)系（圖1），研究表明以線粒體DNA為依據(jù)能將梅花鹿、馬鹿、馴鹿、駝鹿等20多種鹿科動物系統(tǒng)分為鹿亞科、麂亞科、空齒鹿亞科和獐亞科，其中梅花鹿和馬鹿為親緣關(guān)系最近的姐妹群，并能與馴鹿、駝鹿等明顯區(qū)分開。賈靜等[40]以DNA條形碼對71份市售鹿茸粉藥材進行鑒定，其中38%為《中國藥典》2020年版規(guī)定的基原，62%為其他基原，以馴鹿為主。

圖1 鹿科動物線粒體DNA系統(tǒng)發(fā)生樹

截止目前，《中國藥典》2020年版中采用PCR法進行基原鑒別的藥材包括蘄蛇、烏梢蛇和川貝母[3]，應(yīng)用DNA分子鑒別中藥基原得到了業(yè)界廣泛的認可，《中國藥典》中將PCR法應(yīng)用于中藥基原的鑒別有逐漸增加的趨勢。以分子生物學(xué)技術(shù)篩選梅花鹿、馬鹿中的特異性DNA片段構(gòu)建鹿茸基原的鑒別方法具有較好的應(yīng)用前景。

此外，在物種遺傳物質(zhì)不同的基礎(chǔ)上，其調(diào)控體內(nèi)所表達的蛋白質(zhì)等具有高度特異性。《中國藥典》2020年版采用液質(zhì)聯(lián)用的方法分析阿膠、龜甲膠和鹿角膠中特異性肽段，進而控制中藥基原[3]。中國食品藥品檢定研究院最新的研究表明，梅花鹿茸、馬鹿茸和馴鹿茸中有明顯的特異性多肽，可以通過主成分和偏最小二乘法等分析方法進一步篩選、鑒別[41]。

（2）生物學(xué)特性結(jié)合化學(xué)成分分析的鹿茸Q-Marker篩選：藥用植物能夠在體內(nèi)通過乙酸-丙二酸途徑、甲戊二羥酸途徑、莽草酸途徑、氨基酸途徑及其復(fù)合途徑等生源途徑代謝產(chǎn)生苯丙素類、醌類、黃酮類、萜類和生物堿類等成千上萬的次生代謝產(chǎn)物，其在植物中的生成和分布通常具有種屬、組織器官和生長發(fā)育期的特異性[42]。對藥用植物次生代謝產(chǎn)物及其生源途徑特異性分析有助于Q-Marker的篩選。然而，動物藥中通常無特異性次生代謝產(chǎn)物，次生代謝產(chǎn)物代謝路徑研究少且不深入導(dǎo)致動物藥中Q-Marker的篩選較為困難。但鹿茸因其由軟骨組織發(fā)育且具有周期性脫落等獨特的生物學(xué)特性（圖2），為鹿茸中Q-Marker的篩選提供了較好的切入點[43]。

圖2 鹿茸的生物學(xué)特性及特異性化學(xué)成分

首先，鹿茸為典型的動物藥，膠原蛋白是動物異于植物的重要結(jié)構(gòu)蛋白，主要存在于動物結(jié)締組織（皮膚、肌肉）、骨骼、軟骨等，具有促進傷口愈合、潤滑關(guān)節(jié)等功能[43-46]。其中羥脯氨酸是構(gòu)成膠原蛋白的特異性氨基酸，不參與其他蛋白質(zhì)的合成，系膠原蛋白合成過程中已合成肽鏈中的脯氨酸被羥化酶轉(zhuǎn)化而成。《中國藥典》2020年版采用異硫氰酸苯酯柱前衍生HPLC法對阿膠、龜甲膠和鹿角膠中羥脯氨酸進行含量測定，并對3種膠類中藥中羥脯氨酸含量提出限量標準[3]。本課題組采用氨基酸自動分析儀對鹿茸中羥脯氨酸進行含量測定發(fā)現(xiàn)，梅花鹿茸和馬鹿茸中均能檢出羥脯氨酸且含量差異不顯著，不同加工和炮制方式鹿茸中羥脯氨酸含量最低為2.49%[14]。

其次，鹿茸不同于其他動物藥，系軟骨組織發(fā)育而來，硫酸軟骨素是高等動物軟骨組織中特有的酸性黏多糖，具有抗關(guān)節(jié)炎、抗骨質(zhì)疏松和抗腫瘤等生物學(xué)活性[47-49]，能夠部分代表鹿茸的臨床療效，是鹿茸中相對特異的化學(xué)成分。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，鹿茸中硫酸軟骨素存在形式以硫酸軟骨素A、B和C為主，梅花鹿茸和馬鹿茸中均能檢出硫酸軟骨素且含量差異不顯著，不同部位和規(guī)格鹿茸中硫酸軟骨素含量存在顯著差異，鹿茸中硫酸軟骨素質(zhì)量分數(shù)最低為960 mg/kg，鹿角僅為410 mg/kg[19,50]。呂經(jīng)緯等[36]通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，鹿茸中硫酸軟骨素的重要組成單元氨基葡萄糖能夠協(xié)同其他多個化學(xué)成分通過腺苷酸環(huán)化酶1型等10個關(guān)鍵靶點作用于癌癥信號通路，提示氨基葡萄糖具有抗腫瘤和增強免疫力的作用。因此，以生物學(xué)特性、化學(xué)成分特異性、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和藥理作用為考量因素，硫酸軟骨素是鹿茸中Q-Marker的不錯選擇。

此外，鹿茸是迄今為止發(fā)現(xiàn)的哺乳動物中唯一可再生的器官[43]，其中含有豐富的血管、神經(jīng)等組織，γ-氨基丁酸是一種非蛋白組成氨基酸，在哺乳動物中僅存在于神經(jīng)組織中，具有抗疲勞、促睡眠等作用[51-54]。本課題組對鹿茸、鹿角、鹿角霜及鹿角膠等鹿制品中γ-氨基丁酸進行含量測定發(fā)現(xiàn)，梅花鹿茸和馬鹿茸中均能檢出γ-氨基丁酸，且含量差異不顯著，鹿茸中γ-氨基丁酸質(zhì)量分數(shù)最低為350 mg/kg，鹿角中γ-氨基丁酸顯著低于鹿茸，為130 mg/kg，鹿角霜中幾乎不含γ-氨基丁酸[55]。γ-氨基丁酸廣泛存在于植物、動物及微生物中，作為鹿茸中Q-Marker特異性較差，但可以考慮以γ-氨基丁酸含量為輔結(jié)合其他化學(xué)成分綜合評價鹿茸質(zhì)量。

最后，鹿茸奇特的生物學(xué)特性還包括周期性的脫落與再生，鹿茸在春季萌生，初秋長成后褪去茸皮變成鹿角，用于交配中競爭配偶，鹿角于冬季或早春脫落?，F(xiàn)代研究表明，鹿茸的生長和再生與動物體內(nèi)性激素水平密切相關(guān)，孕酮和雄激素相互拮抗調(diào)節(jié)鹿茸的發(fā)生、生長、骨化和脫落[8]。激素的生理功能也與鹿茸“補腎陽，調(diào)沖任”的功效密切相關(guān)。李春燕等[56]建立了鹿茸中18種性激素的提取技術(shù)。Lu等[57]采用GC-MS法測定了不同產(chǎn)地鹿茸中18種激素含量，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)區(qū)及部位鹿茸中性激素含量差異顯著。激素作為鹿茸中Q-Marker具有一定的特異性，但因激素具有微量、高效的特點，其在鹿茸及鹿制品中含量低且難于檢測，鹿茸以貴細藥材在中藥復(fù)方中少量使用時更加難于檢測。

綜上所述，基于系統(tǒng)演化和親緣關(guān)系學(xué)分析的DNA及特異性肽段為鹿茸基原真?zhèn)蔚蔫b別提供了保障，生物學(xué)特性結(jié)合化學(xué)成分分析的羥脯氨酸、硫酸軟骨素、γ-氨基丁酸和激素等多指標相結(jié)合的Q-Marker為鹿茸質(zhì)量控制提供了新的思路。

2.3.2 不同鹿茸種內(nèi)的特異性

（1）不同基原鹿茸特有性：宋代《夢溪筆談》記載：“鹿茸利補陰。凡用茸，無樂太嫩，世謂之茄子茸，但珍其難得耳，其實少力，堅者又太老，唯長數(shù)寸，破之肌如朽木，茸端如瑪瑙、紅玉者最善”。說明古代本草記述的鹿茸和現(xiàn)今所用的梅花鹿茸相吻合。梅花鹿茸為主流品種，歷史悠久，馬鹿與梅花鹿同屬且親緣關(guān)系近，但本草文獻中少有記載，有學(xué)者認為馬鹿茸在我國被應(yīng)用至少有二三百年以上的歷史，有關(guān)梅花鹿茸和馬鹿茸藥理活性差異的報道較少。

現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)梅花鹿茸和馬鹿茸的鑒別。魏藝聰?shù)萚8]建立了基于和序列的梅花鹿、馬鹿和雜交鹿鹿茸的分析鑒別方法，該方法穩(wěn)定、可靠，能用于梅花鹿、馬鹿和雜交鹿鹿茸的鑒別。地方標準DB22/T 2600-2016也建立了PCR鑒別梅花鹿、馬鹿茸片的方法。本課題組對梅花鹿茸和馬鹿茸中蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、礦質(zhì)元素、核苷、硫酸軟骨素、生物胺等化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究及分析，未發(fā)現(xiàn)二者有顯著性差異[58]。楊秀偉等[59-60]研究表明，梅花鹿茸中次黃嘌呤含量較馬鹿茸低，但梅花鹿茸對單胺氧化酶的抑制作用比馬鹿茸高2倍。

（2）不同形態(tài)鹿茸化學(xué)成分特有性：《本草圖經(jīng)》載：“鹿茸……今有山林處皆有之、四月角欲生時，取其茸，陰干，以形如小紫茄子者為上?；蛟魄炎尤滋?，血氣猶未具，不若分岐如馬鞍形者有力。茸不可嗅，其氣能傷人鼻”?！侗静輬D經(jīng)》插圖（圖3）中鹿茸呈茄子形，又無分叉等形態(tài)，結(jié)合文中“形如小紫茄子”“馬鞍形者有力”等描述，可見歷代沿用的鹿茸與今商品鹿茸的梅花鹿二杠茸相吻合。

圖3 《本草圖經(jīng)》中鹿茸插圖

《中國藥典》2020年版收載的不同形態(tài)鹿茸包括梅花鹿二杠茸、三岔茸和馬鹿三岔茸、四岔茸[3]，此外，梅花鹿初次生長的毛桃茸也在市場上廣泛流通。同一鹿茸藥材，不同形態(tài)之間化學(xué)成分的差異是Q-Marker特有性的重要體現(xiàn)。本課題組前期對梅花鹿毛桃茸、二杠茸和三岔茸中蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、礦質(zhì)元素、多糖、生物胺、核苷、硫酸軟骨素等化學(xué)成分進行了系統(tǒng)的含量測定及分析，發(fā)現(xiàn)不同形態(tài)鹿茸中硫酸軟骨素、氨基酸等9類成分均呈現(xiàn)出二杠茸含量最高，三岔茸其次，毛桃茸含量最低的規(guī)律[61]。原因可能是毛桃茸源于未成年雄鹿，其生長發(fā)育不完全，營養(yǎng)物質(zhì)率先滿足身體生長發(fā)育所需不能為鹿茸的生長提供充足的養(yǎng)分，因此毛桃茸上述成分含量較低。由此可見，借助特異性化學(xué)成分Q-Marker的含量測定能夠?qū)⒉煌螒B(tài)鹿茸進行區(qū)分。

（3）不同生長階段鹿茸化學(xué)成分特有性：馬鹿鹿角或鹿角脫盤于每年2、3月份脫落，之后進入快速生茸階段，馬鹿茸1年通常只采收1茬；梅花鹿鹿角或鹿角脫盤于每年4月份脫落，若采收及時，梅花鹿鹿茸1年可采收2茬，但二茬茸茸型及品質(zhì)較差。梅花鹿頭茬茸和二茬茸在《中國藥典》2020年版中均有收載[3]，然而暫無文獻報道頭茬茸和二茬茸在化學(xué)成分、藥理作用和臨床療效等方面的差異。本課題組通過對梅花鹿頭茬茸和二茬茸中9類化學(xué)成分研究發(fā)現(xiàn)，頭茬茸中硫酸軟骨素、膠原蛋白、脂肪酸和核苷4類化合物含量顯著高于二茬茸[62]。希望未來能夠借助特異性化學(xué)成分Q-Marker的含量差異將不同生長階段鹿茸進行區(qū)分。

（4）不同產(chǎn)地初加工方式鹿茸化學(xué)成分特有性：適宜的產(chǎn)地初加工及炮制方法是保證中藥藥效的基礎(chǔ)，市售鹿茸根據(jù)產(chǎn)地初加工方式的不同可以分為煮炸茸、凍干茸、排血茸和帶血茸，《中國藥典》及各級標準中均未明確規(guī)定鹿茸的產(chǎn)地初加工方式，導(dǎo)致養(yǎng)殖戶以客戶要求為由任意加工，一定程度上影響了鹿茸的品質(zhì)。本課題組圍繞不同加工方式鹿茸中化學(xué)成分差異做了大量的工作，系統(tǒng)分析了不同加工方式鹿茸中蛋白質(zhì)、氨基酸等9大類成分中百余個組分發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地初加工方式對鹿茸中化學(xué)成分含量影響顯著，凍干茸對蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪酸等的保留優(yōu)于煮炸茸，帶血茸對蛋白質(zhì)、氨基酸、礦質(zhì)元素等的保留顯著優(yōu)于排血茸[12-19]。

此外，雖然在外觀上凍干茸易于與煮炸茸區(qū)分，但切片、粉碎后難于分辨。本課題組建立了鹿茸中美拉德反應(yīng)產(chǎn)物標志性成分5-羥甲基糠醛（5-hydroxymethyl furfural，5-HMF）、羧甲基賴氨酸、羧乙基賴氨酸和糠氨酸等分析方法，通過對不同加工方式鹿茸中上述成分含量測定發(fā)現(xiàn)，煮炸茸中5-HMF等美拉德反應(yīng)產(chǎn)物顯著高于凍干茸，帶血茸顯著高于排血茸[63-65]。導(dǎo)致上述結(jié)果的原因為鹿茸熱加工過程中高溫加劇了美拉德反應(yīng)產(chǎn)物產(chǎn)生更多5-HMF等物質(zhì)，帶血茸中富含能發(fā)生美拉德反應(yīng)的氨基化合物和羰基化合物，其易反應(yīng)生成更多5-HMF等物質(zhì)。未來期望在規(guī)范鹿茸產(chǎn)地初加工標準方法的基礎(chǔ)上篩選不同加工方式鹿茸中Q-Marker，加強對鹿茸產(chǎn)地初加工的監(jiān)管和檢查。

2.4 鹿茸中Q-Marker的可測性

Q-Marker的可測性是基于點-線-面-體的質(zhì)量控制模式建立的中藥多元質(zhì)量控制方法，包括指標成分、指示性成分、類成分和全息成分[26]。

指標成分能反映中藥的特異性、區(qū)別于其他藥材的功能屬性，是評價中藥質(zhì)量優(yōu)劣和合格限度的“金標準”?？紤]到鹿茸的構(gòu)效關(guān)系及功效發(fā)揮多靶點、多途徑的特點，硫酸軟骨素、羥脯氨酸等成分十分契合指標成分的篩選原則，在此基礎(chǔ)上需建立γ-氨基丁酸等相結(jié)合的多指標含量測定方法。

指示性成分系中藥中含量大、功效類似的代表性成分。目前NY/T 1162-2006和NY/T 1618-2008采用氨基酸自動分析儀對鹿茸中17中氨基酸進行含量測定，進而評價其質(zhì)量。鑒于氨基酸自動分析儀對氨基酸分析的普適性，建議增加羥脯氨酸和γ-氨基丁酸等特異性指標，加強對鹿茸質(zhì)量控制的科學(xué)性、合理性。

類成分指結(jié)構(gòu)相似的一類成分。不同于人參等植物藥可用總皂苷等類成分對其總體功效進行評價，鹿茸中無結(jié)構(gòu)明晰、功能明確的類成分。鑒于課題組前期研究成果，現(xiàn)階段建議以總蛋白、總多糖、總脂肪酸、總灰分等指標在“面”的層面對鹿茸質(zhì)量進行控制。

全息成分是在所用分析方法下顯現(xiàn)成分及其理化和波譜學(xué)信息，指紋圖譜技術(shù)是常用的基于全息成分的模式識別方法，目前多用于評價質(zhì)量的一致性。孫偉杰等[66]建立了鹿茸中6種核苷類成分的指紋圖譜，該方法對鹿茸飲片質(zhì)量控制具有一定的指導(dǎo)意義和參考價值。

2.5 鹿茸中Q-Marker的傳遞與溯源性

2.5.1 鹿茸不同炮制品中Q-Marker的傳遞與溯源性 《中國藥典》2020年版中收載的鹿茸炮制品包括鹿茸粉和鹿茸片，本課題組分析了鹿茸不同炮制品中化學(xué)成分含量差異發(fā)現(xiàn)，鹿茸粉與鹿茸片中均能檢測到前文多次提到的鹿茸中Q-Marker的備選成分硫酸軟骨素、羥脯氨酸、γ-氨基丁酸等，體現(xiàn)了鹿茸中Q-Marker由中藥材向中藥飲片的傳遞與溯源性，但與鹿茸粉相比鹿茸片中多糖、核苷等成分略有減少[21,50,67]。

2.5.2 鹿茸不同飲片切制部位中Q-Marker的傳遞與溯源性 鹿茸片是市售鹿茸的主要流通形式，根據(jù)飲片切制部位的不同又被分為蠟片、粉片、紗片和骨片。本課題組對不同部位鹿茸中化學(xué)成分含量進行了細致的比對分析，發(fā)現(xiàn)不同部位鹿茸中化學(xué)成分含量差異明顯，蠟片中蛋白質(zhì)、氨基酸等含量顯著高于其他部位，其他部位無明顯差異；不同部位鹿茸中硫酸軟骨素和糖類物質(zhì)表現(xiàn)出蠟片含量最高，粉片、紗片和骨片含量依次遞減的規(guī)律；不同部位鹿茸中礦質(zhì)元素（尤其是鈣和鎂）呈現(xiàn)出蠟片含量最低，粉片、紗片和骨片含量依次增高的規(guī)律[12-19]。鹿茸系軟骨組織分化而來，越靠近頂部分生組織越活躍，蛋白質(zhì)、氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)越豐富；基部逐漸鈣化，鈣、鎂等礦質(zhì)元素含量逐漸增加。不同飲片切制部位鹿茸中化學(xué)成分差異性分布是Q-Marker傳遞與溯源性的體現(xiàn)。

2.5.3 不同鹿制品中Q-Marker的傳遞與溯源性 《中國藥典》2020年版一部收載的鹿制品包括鹿茸、鹿角、鹿角膠和鹿角霜[12-19]。鹿茸系幼嫩的軟骨組織，若不及時采收組織骨化后便形成鹿角，采收后的角基于次年春季脫落形成鹿角脫盤。鹿角膠系鹿角或鹿角脫盤經(jīng)粉碎、熬制、濃縮而成的膠塊，鹿角霜系鹿角膠熬制后剩余的殘渣。整體而言，鹿制品的質(zhì)量控制標準均相對匱乏，鹿茸及鹿制品的質(zhì)量控制標準亟待提高。本課題組曾對不同鹿制品中的硫酸軟骨素、羥脯氨酸和γ-氨基丁酸含量測定發(fā)現(xiàn)，不同鹿制品中上述成分含量差異顯著，鹿茸中硫酸軟骨素含量最高，鹿角膠中羥脯氨酸含量最高，鹿角和鹿角霜中γ-氨基丁酸含量最低[50,55,67]。鹿茸、鹿角、鹿角膠和鹿角霜均是鹿茸生長不同階段的產(chǎn)物及制品，不同鹿制品中化學(xué)成分含量差異是Q-Marker傳遞與溯源性的體現(xiàn)，硫酸軟骨素、羥脯氨酸和γ-氨基丁酸在不同鹿制品中的差異分布是其具備作為鹿茸中Q-Marker備選的良好體現(xiàn)。

綜上所述，鹿茸由軟骨組織發(fā)育而來，其中富含豐富的血管和神經(jīng)組織，硫酸軟骨素、羥脯氨酸和γ-氨基丁酸等是其中相對特異性的化學(xué)成分（特有性），具有抗關(guān)節(jié)炎、抗骨質(zhì)疏松、抗疲勞等生物活性（有效性），與中醫(yī)藥理論認為的“壯腎陽、強筋骨”等功能主治非常吻合（中醫(yī)藥理論相關(guān)性），在鹿茸飲片及炮制品中均能被檢測到（可測性、傳遞與溯源性），符合Q-Marker的5大基本原則。

3 構(gòu)建鹿茸質(zhì)量控制標準體系

3.1 生產(chǎn)全過程質(zhì)量控制體系建立

2019年6月國家藥品監(jiān)督管理局頒布的《中藥質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中明確提出要加強中藥材源頭質(zhì)量控制，對中藥材種質(zhì)種苗、種植養(yǎng)殖、采收加工、包裝貯藏等環(huán)節(jié)進行生產(chǎn)全過程質(zhì)量控制。具體到鹿茸生產(chǎn)過程中需從種質(zhì)品種、養(yǎng)殖管理、采收加工、包裝貯藏和質(zhì)量評價5個環(huán)節(jié)進行全過程質(zhì)量控制（圖4）。

3.2 鹿茸質(zhì)量控制標準體系

3.2.1 鹿茸分等分級質(zhì)量標準 鹿茸分等分級質(zhì)量標準系根據(jù)鹿茸茸型、感官、質(zhì)量等基礎(chǔ)指標為依據(jù)將鹿茸劃分為一等茸、二等茸、等外茸等不同等級的質(zhì)量評價標準，涵蓋了梅花鹿茸、馬鹿茸，鮮鹿茸、干鹿茸，鋸茸、砍茸，初生茸、再生茸和二杠、三岔等不同形態(tài)鹿茸，見圖5。

圖4 鹿茸生產(chǎn)全過程的質(zhì)量控制環(huán)節(jié)

圖5 鹿茸分等分級質(zhì)量標準

3.2.2 鹿茸加工炮制技術(shù)規(guī)程 產(chǎn)地初加工及炮制方法能影響鹿茸中化學(xué)成分含量進而影響藥效，規(guī)范鹿茸產(chǎn)地初加工及炮制方法勢在必行。按照目前市場主流的鹿茸產(chǎn)地初加工及炮制方式，需制訂《排血茸加工技術(shù)規(guī)程》《帶血茸加工技術(shù)規(guī)程》《煮炸茸加工技術(shù)規(guī)程》《凍干茸加工技術(shù)規(guī)程》4項鹿茸產(chǎn)地初加工技術(shù)規(guī)程，制訂《鹿茸炮制規(guī)程》《鹿茸切制規(guī)程》等炮制技術(shù)標準。

3.2.3 鹿茸包裝、貯藏及運輸技術(shù)規(guī)范 鑒于鹿茸制品易受微生物污染等問題，需進一步規(guī)范鹿茸包裝、貯藏及運輸?shù)拳h(huán)節(jié)，建立《鹿茸包裝、貯藏及運輸技術(shù)規(guī)范》，從中間環(huán)節(jié)保證鹿茸化學(xué)成分及藥效不受影響。

3.2.4 鹿茸提取物及標準湯劑指紋圖譜 鹿茸為補益類貴細藥材，在中成藥制劑過程中往往在靠后工藝流程中添加，但鑒于Q-Marker傳遞和溯源性的要求及配方顆粒等新型中藥劑型的發(fā)展，未來發(fā)展鹿茸提取物可能存在相當(dāng)大的空間。建立《鹿茸提取物》及《鹿茸標準湯劑指紋圖譜》對規(guī)范中成藥生產(chǎn)企業(yè)及市場流通、監(jiān)管具有重要意義。

3.2.5 規(guī)范鹿茸中Q-Marker和風(fēng)險因子檢測方法 含量測定的準確性離不開檢測方法的重復(fù)性、穩(wěn)定性和科學(xué)性。本課題組在參考《中國藥典》2020年版二部硫酸軟骨素鈉、硫酸軟骨素鈉片、硫酸軟骨素鈉膠囊中硫酸軟骨素含量測定方法的基礎(chǔ)上，建立了鹿茸中硫酸軟骨素的含量測定方法；在參考NY/T 1618-2008的基礎(chǔ)上，建立了氨基酸自動分析儀測定鹿茸中羥脯氨酸含量的方法；在參考NY/T 2890-2016的基礎(chǔ)上，建立了柱前衍生UPLC法測定鹿茸中γ-氨基丁酸含量的方法。在此基礎(chǔ)上，需進一步規(guī)范形成《鹿茸中硫酸軟骨素含量測定方法》《鹿茸中羥脯胺酸含量測定方法》《鹿茸中γ-氨基丁酸含量測定方法》等行業(yè)標準或團體標準，為鹿茸中Q-Marker的檢測提供保障。

近年來，風(fēng)險因子監(jiān)控逐漸受中藥監(jiān)管部門的重視，《中國藥典》2020年版征求意見稿中廣泛增加了重金屬和農(nóng)藥殘留在植物藥中的限量標準。動物藥方面，僅有水蛭等個別品種規(guī)定了重金屬限量標準，DB 22/T 1143-2009中規(guī)定了鹿茸中重金屬限量標準但有待商榷。鑒于風(fēng)險因子的重要影響，鹿茸質(zhì)量控制標準體系需建立《鹿茸中重金屬的檢測方法和限量標準》《鹿茸中麻醉劑的檢測方法和限量標準》《鹿茸中增茸素的檢測方法和限量標準》和《鹿茸中獸藥殘留的檢測方法和限量標準》等風(fēng)險因子標準檢測方法和最高殘留量。

4 結(jié)語

雖然目前鹿茸質(zhì)量控制標準研究還存在許多問題和短板，但近年來鹿茸質(zhì)量控制成分篩選及質(zhì)量標準體系建設(shè)逐漸受到關(guān)注，涌現(xiàn)出基于系統(tǒng)演化和親緣關(guān)系學(xué)分析的特異性DNA片段及特異性多肽鏈鑒別，生物學(xué)特性結(jié)合化學(xué)成分分析的質(zhì)量控制成分研究，基于全息成分模式識別方法的鹿茸指紋圖譜技術(shù)等一系列成果，對于推動鹿茸質(zhì)量控制標準提升具有重要意義，為規(guī)范鹿業(yè)市場，促使鹿業(yè)健康、有序發(fā)展提供了保障。未來將篩選出更多鹿茸中的Q-Marker，建立起規(guī)范的鹿茸質(zhì)量控制標準體系，對推動鹿產(chǎn)業(yè)及動物藥的發(fā)展具有重要意義。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Establishment of quality control standard system forbased on quality marker (Q-Marker) of traditional Chinese medicine

GONG Rui-ze, LU Yu-shun, ZHANG Lei, LI Zhi-man, LI Shan-shan, SUN Yin-shi

Institute of Special Animal and Plant Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130112, China

In view of the problems of quality control for(CCP), such as complex origins, chaotic varieties, and lack of quality evaluation standards, the construction of quality control standard system for CCP needs to be strengthened urgently. Introduction of quality marker (Q-Marker) of traditional Chinese medicine and discovery of some relatively specific chemical components inCCP by scientists provide a new opportunity for the quality evaluation of CCP. The current problems of quality control for CCP are summarized in detail, the selection principles of Q-Marker in CCP are deeply analyzed, and a quality evaluation standard system for CCP are systematically established in this paper, which provides a guarantee for the promotion of quality control standards forCCP and the standardization of the deer industry market, and also benefits of the healthy and orderly development of the deer industry.

; quality control; quality marker; five principles; hydroxyproline; chondroitin sulfate; γ-aminobutyric acid; quality control throughout production process; quality control standard system

R284

A

0253 - 2670(2021)09 - 2851 - 12

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.09.032

2020-08-30

國家重點研發(fā)計劃項目（2018YFC1706604）；國家重點研發(fā)計劃項目（2018YFC1706605）；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程項目（CAAS-ASTIP-2016-ISAPS）；吉林省科技發(fā)展計劃項目（20180201076YY）

宮瑞澤（1993—），男，山東青島人，碩士研究生，研究方向為野生動植物保護與利用。E-mail: grz2017caas@163.com

孫印石（1980—），男，內(nèi)蒙古興安盟人，研究員，博士，主要從事特種動植物貯藏與產(chǎn)品開發(fā)。E-mail: sunyinshi2015@163.com

[責(zé)任編輯 崔艷麗]