陳艷艷，于馥銘，于鳳波，曹 宇

(牡丹江醫(yī)學院，黑龍江 牡丹江 157011)

原花青素是目前應用最為廣泛的天然抗氧化成份之一，其具備多方面的藥理活性，包括抗腫瘤活性[1-2]、抗氧化、降脂作用、防治心血管疾病、抗炎等，是功能性食品與化妝品的常用添加成份。近年來，作為活性成分，在國內外被廣泛應用于食品、藥品和化妝品等領域。目前市售原花青素口服制劑主要為膠囊制劑，為提高消費者服用順應性，增強商品的市場競爭力，本課題擬開發(fā)新型、服用更為便捷的，消費者易于接受的原花青素口腔崩解制劑。

1 實驗方法

1.1 實驗試劑與儀器直壓乳糖(L1517，上海品成醫(yī)藥科技有限公司)；葡萄籽原花青素(YS170515，西安普萊特生物工程有限公司)；低取代羥丙基纖維素(L-HPC，泰安瑞泰纖維素有限公司)；交聯(lián)聚乙烯比咯烷酮(PVPP，美國ISP公司)；芒果香精(QS3416 0601 0989，毫州市保華藥業(yè)有限公司)；草莓香精(QS3416 0601 0989，毫州市保華藥業(yè)有限公司)；甜菊粉(2I43L-CP，東京化成工業(yè)株式會社)；硬脂酸鎂(HG 3439-99，天津博迪化工股份有限公司)。CARY-100型紫外分光光度計(美國瓦里安中國有限公司)；硬度儀(YD-20KZ，天大天發(fā)科技有限公司)；脆碎度儀(CS-2，天津市國銘醫(yī)藥設備有限公司)；壓片機(GZPL-620，北京國藥龍立有限公司)。

1.2 原花青素分析方法的建立

1.2.1 標準曲線的繪制 精密稱取葡萄籽原花青素標準品，用95%乙醇配成5 mg/mL的儲備液，分別精密吸取4.0 mL、5.0 mL、7.0 mL、8.0 mL、9.0 mL、11.0 mL，置于25 mL容量瓶中，加95%乙醇準確稀釋定容。以95%乙醇為空白，在287 nm處測吸光度，測定吸光值A，并與相應濃度C進行線性回歸，得到回歸方程。

1.2.2 回收率實驗 分別精密稱取原花青素原料藥24 mg、30 mg、36 mg及相應處方量的輔料，于100 mL容量瓶中用95%溶解稀釋定容，搖勻過濾，取5.0 mL續(xù)濾液至10.0 mL容量瓶中，用95%乙醇溶解稀釋定容，各測定3次，報告已知加入量的回收率(%)。

1.2.3 精密度實驗 將上述測定回收率的溶液在一天內和一周內分別測定5次，獲得日內精密度和日間精密度。

1.2.4 穩(wěn)定性試驗 將原花青素溶液裝于密封的容量瓶中密封保存，4 ℃放置，分別于0 h、24 h、36 h用CARY-100型紫外分光光度計測定其溶液吸光度的值，用以檢測其溶液穩(wěn)定性。

1.3 原花青素口腔崩解片的處方和工藝確定采用單因素考察結合正交實驗方法，以粉末直接壓片作為制備工藝，以口感和崩解時間為考察指標，對原花青素口腔崩解片的處方及制備工藝進行考察。

1.3.1 單因素考察 以流動性、壓縮度、口感等作為考察指標，對填充劑、崩解劑、矯味劑(甜菊粉與香精)用量進行初步考察與確定。

1.3.2 正交實驗確定處方 根據以上單因素考察結果，選擇直壓乳糖和L-HPC的比例、PVPP的用量、壓片硬度、甜菊粉的用量4個參數為因素，以體外方法測得的崩解時間(t)與口感為評價指標，設計3水平4因素L9(34)正交實驗(表1)。

表1 3水平4因素L9(34)正交實驗表

1.4 質量檢查根據《中國藥典2015版》附錄相關檢測要求與標準，對所制備的原花青素口腔崩解片制劑外觀、崩解時限[8](體外測定法，口腔內測定法)、片重差異、硬度和脆碎度以及含量進行測定。

2 結果

2.1 質量檢測結果

2.1.1 繪制標準曲線 結果顯示，原花青素濃度在80～220 μg/mL之間具有良好的線性關系，質量標準曲線為A=0.004C-0.112，r2=0.998[(A：吸光度值；C：濃度(μg/mL)]，見圖1。

圖1 原花青素標準曲線表

2.1.2 回收率結果 回收率測定實驗結果如表2所示，RSD值均小于2%，說明方法回收率符合標準。

表2 原花青素紫外分光光度儀回收率測定結果

2.1.3 精密度實驗結果 精密度測定結果如表3所示，日內和日間精密度的RSD值均小于2%，該方法精密度符合標準。

表3 原花青素日內和日間精密度測定結果

2.1.4 穩(wěn)定性實驗結果 穩(wěn)定性實驗結果如表4所示，原花青素溶液于4 ℃條件下放置36 h內穩(wěn)定性良好。

表4 原花青素穩(wěn)定性實驗結果

2.2 口腔崩解片的處方和工藝確定結果

2.2.1 單因素考察結果 填充劑考察結果顯示，直壓乳糖的休止角小，流動性好。淀粉處方壓力大，粘合性差，易裂片，不容易成型。淀粉的沙礫感強，口感欠佳，故選用填充劑為直壓乳糖。對三種崩解劑PVPP+L-HPC(2:1)、L-HPC、PVPP考察結果顯示，崩解劑選用PVPP/L-HPC(2:1)，崩解時間最短，且對口感無影響。香精考察結果顯示，草莓香精的香味可以掩蓋原花青素的澀味。芒果香精香味比較輕，不能掩蓋原花青素的苦澀口感，故選用草莓香精。

2.2.2 正交實驗確定處方結果 根據正交實驗結果(表5)，最終確定原花青素口腔崩解片的處方為：原花青素口腔崩解制劑片重500 mg，含藥32 mg；填充劑：直壓乳糖，占片劑總重60%。崩解劑組合為：PVPP/L-HPC(2:1)，占片劑總重20%，甜菊粉占3%，香精5%，硬脂酸鎂5%，采用粉末直接壓片，控制片劑硬度在30 N左右。

表5 基本處方篩選的正交實驗設計及結果

2.3 質量檢查結果

2.3.1 外觀 對原花青素口腔崩解片外觀進行檢測，片劑外觀光滑，色澤均勻，有適宜的硬度和耐磨性，符合藥典規(guī)定的要求。

2.3.2 崩解實驗 檢測結果如表6所示，所制的原花青素口崩片口感優(yōu)良，并在口中能迅速崩解。

表6 原花青素口崩片口感及崩解時限評價

2.3.3 片重差異 按照藥典要求，對原花青素口腔崩解片的片重差異進行檢測，結果顯示，取20片原花青素口崩片測得，片重為(500.07±0.12)mg，片重差異均小于5.0%，符合藥典規(guī)定[3]。

2.3.4 硬度和脆碎度 結果如表7所示，片劑硬度RSD小于2%，原花青素口腔崩解片的硬度符合檢測標準。脆碎度<1%，脆碎度復合要求。

表7 原花青素口崩片片重差異檢查

2.3.5 含量測定 結果如表8所示，三批原花青素口崩片的平均標示量百分含量在101.76%～102.42%之間，符合規(guī)定80%～120%的標準。

表8 原花青素口腔崩解片含量測定

3 討論

原花青素是純天然的抗氧化劑，低聚原花青素的抗氧化性能是維生素E的50倍、維生素C的200倍，且吸收迅速，口服20 min即可達到最高血液濃度，代謝半衰期有7 h之久。在人體內，原花青素通過參與磷酸、花生四烯酸的代謝和蛋白質磷酸化來達到保護脂質不被過氧化損傷的作用[4]。近幾年，國內外已開發(fā)出多種原花青素產品，如劍南春生物制品的應用原花青素制成可預防近視，抗疲勞的軟膠囊制劑；美國開發(fā)的含有低聚原花青素的化妝品，利用原花青素中的多羥基結構清除自由基，抑制皮膚氧化損傷[5]；法國Bonnaure公司開發(fā)的以原花青素低聚體或單體為活性成分(≥1%)的治療牙周疾病的制劑[6]；法國Sanofi公司研制的用于血管保護和抗炎[7]的原花青素-大豆卵磷脂復合物等。

目前，國內原花青素類保健品主要以膠囊劑為主，雖然可以掩蓋原花青素苦澀味道，但劑型比較單一?？谇槐澜馄且环N在無水或少量水的情況下，放置在口腔中，遇唾液迅速崩解，溶于唾液，借助自身吞咽能力，進入胃腸而發(fā)揮功能的一種劑型?？梢欢ǔ潭壬蠝p少藥物的首過效應，服用方便，且適用于吞咽有困難的患者(嬰幼兒、老人)，提高患者的順應性，從而有利于疾病的治療。本文采用粉末直接壓片法制備的原花青素口腔崩解片，制備過程簡單，適合工業(yè)化生產，所制備的產品口感適宜，服用方便，既提高了消費者的接受程度，又為原花青素市場產品的開發(fā)提供了新的劑型選擇。