盤錦市中心醫(yī)院檢驗科 （遼寧 盤錦 124010）

內(nèi)容提要： 目的：探討分析應(yīng)用熒光定量PCR儀檢測乙型肝炎病毒（HBV）DNA的結(jié)果。方法：選取2018年8月～2019年9月本院收治的30例乙型肝炎患者，按數(shù)字法隨機分兩組，各15例，對照組儀器采用RLC480儀檢測，觀察組儀器采用熒光定量PCR儀檢測，通過對患者HBV DNA水平的測定，對比分析不同儀器檢測的結(jié)果。結(jié)果：RLC480型熒光定量PCR儀器和ABI7500型熒光定量PCR儀器兩種儀器測定結(jié)果未出現(xiàn)離群值；兩臺儀器的檢測HBV DNA結(jié)果的相關(guān)性良好（r＞0.975）；兩臺PCR檢測儀器檢測結(jié)果的偏倚度百分比為3.18%（＜7.51%），一致性良好，且系統(tǒng)誤差在可接受的范圍內(nèi)。結(jié)論：ABI7500型熒光定量PCR儀器和RLC480型熒光定量PCR儀器檢測HBA DNA的一致性極高，誤差小，測算乙型肝炎DNA結(jié)果偏倚度在可控范圍內(nèi)，兩種儀器運用于乙型肝炎的測量結(jié)果可用于以后的臨床檢測中。

作為一類常見的傳染疾病，HBV感染人數(shù)較多，據(jù)不完全統(tǒng)計，世界上約19.9億人曾感染或是現(xiàn)已感染了HBV，中國是乙型肝炎病毒感染最嚴重的國家之一[1]。乙型肝炎嚴重化會成為肝功能衰竭、肝硬化、肝癌，危及患者的生命安全。在臨床檢驗中，乙型肝炎的DNA能直觀反映HBV的指標(biāo)，可以明確診斷出患者是否患HBV感染，也可實時動態(tài)監(jiān)控HNV的定量變化。為此，本文選擇2018年8月～2019年9月本院收治的30例乙型肝炎患者，分析并對比RLC480型熒光定量PCR儀器和ABI7500型熒光定量PCR儀器這兩者檢測HBV的結(jié)果，報道如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選取2018年8月～2019年9月本院收治的30例乙型肝炎患者，分為觀察組和對照組，各15例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①30例患者均診斷為乙型肝炎；②均簽署知情同意書；③均無HBV DNS超敏癥狀[2]。觀察組男9例，女6例；年齡13～36歲，平均（26.42±3.31）歲。對照組男10例，女4例；年齡14～37歲，平均（26.61±3.42）歲。比較兩組一般資料，無差異（P＞0.05）。

1.2 方法

常見的檢測儀器有RLC480（Roebe Light Cycle）型熒光定量PCR儀器和ABI7500熒光定量PCR儀器，其中，RLC480型熒光定量PCR儀器作為參比儀器，ABI7500熒光定量PCR儀器為實驗儀器[3]。為保證檢測的數(shù)據(jù)真實有效，按照儀器說明書操作兩臺儀器，選擇合適的HBV核酸定量檢測試劑盒為檢測試劑盒；讓患者清晨保持空腹?fàn)顟B(tài)，選擇5mL靜脈血液作為樣本，且保持溶血樣本和含脂肪樣本的最低濃度為5.0×102U/mL，最高濃度為1.0×108U/mL；認真遵循試劑說明書的操作準(zhǔn)則提取且定期檢測血液樣本中HBV DNA中的核酸，并采用雙孔平行檢測；第一次對30例乙型肝炎的患者進行測量后2h再進行第二次測定，然后對兩次測量結(jié)果取平均值[4]。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩種測定儀器的不同結(jié)果；且測定兩種儀器的相對偏倚=（實驗值-參比值）/參比值，取百分值（%）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 19.0分析數(shù)據(jù)，參比儀器測定的結(jié)果設(shè)為X值，實驗儀器測定的結(jié)果設(shè)為Y值，根據(jù)線性方程Y=rX+b計算結(jié)果。

2.結(jié)果

2.1 比較兩臺儀器兩次檢測結(jié)果的離群值

RLC480型熒光定量PCR參比儀器與ABI7500型熒光定量PCR實驗儀器兩次檢測結(jié)果差值的絕對值＜4倍平均絕對值，且未發(fā)現(xiàn)離群值，這充分表明了，RLC480型熒光定量PCR儀器和ABI7500型熒光定量PCR儀器兩次檢測HBV DNA時未出現(xiàn)離群點。

2.2 比較兩種檢測儀器HBV DNA的檢測結(jié)果

經(jīng)過相關(guān)性分析參比儀器和實驗儀器兩次檢測結(jié)果的平均值，發(fā)現(xiàn)檢測結(jié)果均在0.975以上，表明RLC480型熒光定量PCR儀器選定的濃度范圍適合度低于ABI7500型熒光定量PCR儀器，兩臺儀器熒光定量PCR檢測均符合線性回歸要求，詳見表1。

表1. 兩種檢測儀器HBV DNA檢測結(jié)果的比較

2.3 比較兩臺儀器測定的相對偏倚

對比分析，RLC480型熒光定量PCR儀器和ABI7500型熒光定量PCR儀器兩種儀器測定結(jié)果的偏倚度百分比為3.18%（＜7.51%），表明兩種PCR儀定量檢測HBV DNA結(jié)果有著良好的一致性，且系統(tǒng)誤差在可接受的范圍內(nèi)。

3.討論

乙型肝炎病毒感染是全球范圍內(nèi)一項公共性衛(wèi)生問題，若治療不及時，極易引起肝硬化、肝癌，據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計，肝硬化患者61%是由HBV感染，82%肝癌患者是由HBV感染造成的。所以，準(zhǔn)確的檢測結(jié)果有利于醫(yī)師的臨床診斷、選擇治療方案以及判斷預(yù)后。RLC480型熒光定量PCR儀器和ABI7500型熒光定量PCR儀器是臨床中用于檢測HBV DNA的結(jié)果，ABI7500型熒光定量PCR儀器比對分析乙型肝炎病毒DNA的結(jié)果，作為參比儀器的RLC480型熒光定量PCR儀器則借助熱循環(huán)?？朴嫈?shù)和光學(xué)檢測系統(tǒng)完全消除邊緣效應(yīng)[5]。本文研究發(fā)現(xiàn)，RLC480型熒光定量PCR儀器和ABI7500型熒光定量PCR儀器兩種儀器測定結(jié)果未出現(xiàn)離群值；兩臺儀器的檢測HBV DNA結(jié)果的相關(guān)性良好（r＞0.975）；兩臺PCR檢測儀器檢測結(jié)果的偏倚度在可接受范圍內(nèi)，和陳亙志[6]的研究結(jié)果基本一致。這表明，ABI7500型熒光定量PCR儀器和RLC480型熒光定量PCR儀器檢測HBA DNA的一致性極高，誤差小，準(zhǔn)確度較高測量結(jié)果可有效作為臨床依據(jù)，兩種儀器可聯(lián)合運用于乙型肝炎DNA檢測中。

綜上所述，通過判斷RLC480型熒光定量PCR儀器和ABI7500型熒光定量PCR儀器兩種儀器測定結(jié)果的誤差標(biāo)準(zhǔn)，分析兩種儀器的線性回歸相關(guān)性，并測算其結(jié)果的偏倚度在可控的范圍內(nèi)，兩種儀器皆可運用于乙型肝炎DNA檢測中，且結(jié)果的準(zhǔn)確度為以后的臨床檢測提供了有力的保障。