皇培培,熊 陽(yáng),于貴杰,韓慶慶,梅 潔
(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院,湖北 武漢 430070)
截至目前,經(jīng)全國(guó)水產(chǎn)原種和良種審定委員會(huì)審定的黃顙魚新品種有黃顙魚“全雄1號(hào)”(GS-04-001-2010)和雜交黃顙魚“黃優(yōu)1號(hào)”(GS-02-001-2018)。新品種的培育推動(dòng)了黃顙魚產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,其養(yǎng)殖產(chǎn)量從2010 年的18.43 萬(wàn)噸增長(zhǎng)到2019 年的53.69 萬(wàn)噸。隨著黃顙魚產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展,苗種需求量不斷增加,對(duì)苗種質(zhì)量要求也越來(lái)越高,而苗種的好壞與親本的質(zhì)量緊密相關(guān)。但黃顙魚苗種繁殖過(guò)程中所用的母本非?;祀s,沒(méi)有經(jīng)過(guò)系統(tǒng)的選育和培育;部分苗種生產(chǎn)場(chǎng)利用黃顙魚雄魚比雌魚生長(zhǎng)快的特性,直接過(guò)篩將小個(gè)體的黃顙魚作為母本進(jìn)行培育,但其中混雜了20%~30%的雄性黃顙魚,又將生長(zhǎng)快、個(gè)體較大的母本過(guò)篩掉。本文總結(jié)了全雌黃顙魚的培育及繁殖技術(shù),供參考。
首先,通過(guò)群體選育方法獲得生長(zhǎng)速度快,性狀穩(wěn)定的黃顙魚家系,再使用魚類性逆轉(zhuǎn)技術(shù)結(jié)合黃顙魚性別連鎖分子標(biāo)記鑒定技術(shù)獲得XX 偽雄黃顙魚。將XX偽雄黃顙魚與選育的XX雌性黃顙魚繁殖生產(chǎn)全雌黃顙魚。用于人工繁殖的全雌黃顙魚最小年齡為二齡,最小個(gè)體重為50 克,最大允許使用年限為5齡。
親魚培育池應(yīng)水、電、路暢通,水源、水質(zhì)良好,池底較平坦,底部淤泥較少或硬質(zhì)底,池塘3~5畝為宜,水深2.5米左右。池塘每3畝配備1 臺(tái)3 千瓦葉輪式增氧機(jī)和1 臺(tái)投餌機(jī)。網(wǎng)箱每口塘4~5畝配備1臺(tái)2.2千瓦水車式增氧機(jī)。親魚放養(yǎng)前用高錳酸鉀20毫克/升或聚維酮碘(2%)0.75毫升/米3溶液清洗魚體,根據(jù)親魚魚體忍受強(qiáng)度,控制浸洗魚體時(shí)間,一般為10~15 分鐘。每畝放養(yǎng)全雌黃顙魚親魚4 000~6 000尾。此外,每畝親魚池中搭配規(guī)格為80~100 克/尾的鰱魚種160~200尾、鳙魚種60~80尾,用于調(diào)節(jié)池塘水質(zhì)。
黃顙魚“全雌配套系”前期使用商業(yè)浮性顆粒配合飼料,粗蛋白質(zhì)水平在40%左右。越冬后開(kāi)始攝食,日投喂量為魚體重的1%,根據(jù)水溫、天氣及魚攝食情況進(jìn)行調(diào)節(jié)。當(dāng)水溫升至20℃,將白鰱打成魚糜與甲魚料混合連續(xù)投喂4周,第1周魚糜含量為10%,第2~3 周魚糜含量為20%~25%,第4 周魚糜含量又降為10%。投喂時(shí)間過(guò)長(zhǎng),卵子容易過(guò)熟過(guò)早排出。期間使用挖卵器將卵子挖出,將透明液(無(wú)水乙醇和冰醋酸1∶1 混合)滴在卵子上,用顯微鏡觀察卵子的核偏移情況;根據(jù)卵子成熟狀況調(diào)節(jié)魚糜投喂時(shí)間。當(dāng)溫度達(dá)到25℃時(shí),培育好的黃顙魚母本可用于人工繁殖。
YY 超雄黃顙魚作為父本進(jìn)行人工繁殖,挑選二齡以上、個(gè)體重大于100克、體形瘦長(zhǎng)而且生殖突突出、膨大、末端較尖有明顯紅點(diǎn)的YY 超雄黃顙魚。黃顙魚的精巢位于鰾和腎臟的腹面,呈乳白色,精小葉分支較多。也可使用三齡以上、個(gè)體重大于500克的雄性瓦氏黃顙魚作為父本進(jìn)行雜交黃顙魚的人工繁殖。在繁殖季節(jié),性成熟的雄性黃顙魚胸鰭第1根鰭條背面有明顯珠星。
雌性親本挑選二齡以上、個(gè)體重大于100 克、體表色澤正常的黃顙魚,腹部膨大、飽滿、柔軟,卵巢輪廓明顯且有下墜感,生殖孔變圓且微紅。解剖能觀察到卵巢呈淡黃色或橘黃色,挖出來(lái)的卵粒呈橙黃色有光澤、大小均勻,透明液處理后觀察到大部分卵子發(fā)生核偏移。
催產(chǎn)藥物劑量按魚體重計(jì)算,雌魚第1 針為L(zhǎng)RH-A214 微克/千克、鯉魚腦垂體(CPE)2 毫克/千克;第2 針為L(zhǎng)RH-A214 微克+CPE 7 毫克/千克+DOM 8 毫克/千克。雌魚采用胸鰭基部注射,每針每尾各注射0.3~0.6 毫升(0.7%的生理鹽水配制),可根據(jù)親魚的大小和雌魚懷卵量靈活調(diào)整,兩針時(shí)間間隔為8~12 小時(shí)(具體根據(jù)水溫進(jìn)行調(diào)整)。雄魚僅注射第2針,注射劑量為雌魚的一半。
操作過(guò)程要輕柔,盡量減少魚的損傷。擠出的魚卵不得碰水且避免陽(yáng)光照射,擠卵與授精時(shí)間間隔不得超過(guò)10分鐘。
精子準(zhǔn)備:用毛巾擦干雄魚體表水,先用剪刀剪開(kāi)兩側(cè)魚鰓,頭向下傾斜放血,避免取精巢時(shí)血液污染精巢;再沿泄殖孔向上剪開(kāi)腹部用鑷子撥開(kāi)內(nèi)臟,取出精巢后稱重,放入勻漿器或研缽中,加入精子保存液(檸檬酸三鈉34 毫摩/升、葡萄糖146.5 毫摩/升、氯化鉀4 毫摩/升、碳酸氫鈉23.8 毫摩/升、青霉素80 萬(wàn)單位/升、鏈霉素100萬(wàn)單位/升和蒸餾水1升)并研磨成白色漿狀。
人工授精:一般采用1 克精巢配120 萬(wàn)粒卵(1 克卵約500 粒),按照卵子質(zhì)量的好壞可做適當(dāng)調(diào)整。先稱取卵的重量,根據(jù)精卵配比取出相應(yīng)的精液加入魚卵中,快速攪拌10 秒,再加入足量水激活精子并快速攪拌均勻。
黃顙魚的受精卵具有黏性,需要脫黏作業(yè)。脫黏采取先將泥漿倒入盆中加入水(泥漿∶水比例為1∶3),用手?jǐn)嚢杈鶆?,將受精卵倒入脫黏盆中,攪?dòng)3~4 分鐘使魚卵黏性消失?;?qū)⒛酀{水和卵倒入倒錐形脫黏桶中氣動(dòng)脫黏,持續(xù)時(shí)間與前者相同。洗卵:將脫黏的魚卵和泥漿水一同倒入60 目網(wǎng)中的洗卵盆中,反復(fù)清洗,直到魚卵干凈后方可放于孵化桶中進(jìn)行孵化。注意事項(xiàng):黃泥漿制作一定要細(xì)致,黃泥水中不能有泥沙,以免對(duì)魚卵造成損傷。嚴(yán)格控制水與泥漿,泥漿與卵的比例。攪動(dòng)動(dòng)作要輕、均勻且不能有死角,避免魚卵相互黏結(jié);手不要擦到盆底部以免擦破受精魚卵。使用氣動(dòng)脫黏桶時(shí)控制進(jìn)氣量至適宜大小,脫黏后卵上的黃泥水必須清洗干凈,脫黏黃泥水的水溫與受精水溫應(yīng)保持一致。
將清洗干凈的受精卵倒入孵化桶中,每桶可放120萬(wàn)粒卵左右。孵化桶為倒錐形的桶身、桶罩(60 目篩絹布做成)和相關(guān)附件組成,體積約為250升,側(cè)下方進(jìn)水,底部充氣,上端出水。進(jìn)水和充氣應(yīng)以受精卵在桶中輕輕翻滾、底部無(wú)堆積為宜。水流速度一般為0.3 升/秒。孵化管理及其注意事項(xiàng):在孵化過(guò)程中要勤檢查,防止停電、停水、停氣等突發(fā)性的事件。孵化過(guò)程中保證水質(zhì)清新,溶氧充足,無(wú)敵害生物進(jìn)入孵化桶中。孵化水溫變幅不得超過(guò)3℃,否則會(huì)造成畸形和出苗率低。魚苗完全脫膜后應(yīng)減小水流速度,脫膜過(guò)程應(yīng)注意經(jīng)常清洗桶罩,以免卵膜堵塞桶罩而造成魚卵從上面溢出或網(wǎng)罩浮起。
25℃水溫條件下,受精卵脫膜后15~20 小時(shí),觀察魚苗變成灰黑色后即可將魚苗轉(zhuǎn)出暫養(yǎng),過(guò)早或者過(guò)晚轉(zhuǎn)出都將影響魚苗成活率。先關(guān)掉水閥、氣閥待魚苗沉入桶底后,采用虹吸方式將魚苗吸入帶水的容器中。注意虹吸時(shí)裝魚容器水位高度與孵化桶的落差高度為1米最佳。轉(zhuǎn)移時(shí)虹吸工具應(yīng)與裝魚容器貼邊,以減少魚體損傷。
在第1次人工擠卵過(guò)程中,將產(chǎn)和未產(chǎn)的雌魚分開(kāi)放置于不同的暫養(yǎng)池中。暫養(yǎng)池溫度需低于26℃,遮光,避免太陽(yáng)直射。降溫、遮光使黃顙魚活動(dòng)減弱,避免沒(méi)必要的活動(dòng)造成的消耗和二次損傷。水體溶氧不要低于6 毫克/升,防止產(chǎn)后缺氧死亡。水深1.0米左右,調(diào)控好水質(zhì),防止水質(zhì)變壞;微流水,不要猛烈沖水,防止親魚頂水,產(chǎn)后虛弱造成不必要的體力消耗。
對(duì)半產(chǎn)或難產(chǎn)親魚的護(hù)理:要輕壓腹部一段時(shí)間,將卵子擠出,以防卵粒吸水膨脹導(dǎo)致親魚脹死。體表受傷的親魚使用高錳酸鉀或者淡鹽水浸泡15 分鐘,消炎殺菌。產(chǎn)后親魚往往受傷比較嚴(yán)重,還塘后要及時(shí)地進(jìn)行消毒、殺菌,預(yù)防疾病發(fā)生。
還塘后,在黃顙魚母本的二次培育過(guò)程中需投喂高蛋白質(zhì)飼料(粗蛋白質(zhì)水平47%)或參照第一次甲魚料加魚糜培育方式,每天投喂兩次(7:00和18:00),連續(xù)投喂30天即可進(jìn)行第2次人工繁殖。