○劉 穎

鯉魚作為我國(guó)淡水魚的主要養(yǎng)殖品種，飼養(yǎng)量逐漸增多，為了降低養(yǎng)殖成本及蛋白飼料的用量，并緩解蛋白飼料緊缺的狀態(tài)，近年來(lái)逐漸應(yīng)用植物性蛋白替代動(dòng)物性蛋白來(lái)降低飼料成本，提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。但往往會(huì)導(dǎo)致飼料中氨基酸不平衡，影響魚類機(jī)體的生長(zhǎng)及健康。蛋氨酸作為魚類機(jī)體的限制性氨基酸，其添加量對(duì)魚類生長(zhǎng)起著至關(guān)重要的作用。蛋氨酸添加量不足，會(huì)引起魚類機(jī)體的氧化應(yīng)激，進(jìn)而影響蛋白質(zhì)在機(jī)體內(nèi)的沉積。大量研究表明，在魚類日糧中添加外源性蛋氨酸可以顯著提高其生長(zhǎng)性能及抗氧化功能。因此，本研究以鯉魚為研究對(duì)象，探討不同水平的外源蛋氨酸對(duì)其機(jī)體抗氧化功能的影響，并探討低蛋白日糧中蛋氨酸的適宜添加劑量，為蛋氨酸在魚類養(yǎng)殖中的合理應(yīng)用提供一定的理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用外源性蛋氨酸購(gòu)買于EvonikIndustriesAG公司，含量大于等于99%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)日糧

本試驗(yàn)選取100尾健康狀況良好、體重相近的鯉魚隨機(jī)分成4組，（每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5尾）。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組依次添加0.2%、0.4%、0.6%的蛋氨酸，試驗(yàn)預(yù)飼期7天，正式試驗(yàn)期50天。試驗(yàn)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分含量如下表1所示。

表1 試驗(yàn)日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)成分含量

1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

試驗(yàn)結(jié)束后，每組選取10尾鯉魚的血液樣品和肝臟樣品，測(cè)定其SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒購(gòu)買于南京建成生物公司。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)期間水溫為22-24℃，溶氧量大于5.5mg/L，氨氮濃度小于1.0mg/L，每日換水量為25%，每日早晨定時(shí)清除箱內(nèi)糞便。每日早、中、晚飼喂3次。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel2015進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)后，再采用SPSS22.0進(jìn)行單因素的方差分析，并用LSD法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，P<0.05作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤呈現(xiàn)。

2 結(jié)果

不同水平的蛋氨酸對(duì)鯉魚肝臟和血清抗氧化功能的影響見(jiàn)表2。由表2數(shù)據(jù)可知，在鯉魚日糧中添加一定劑量的蛋氨酸可以顯著影響鯉魚肝臟抗氧化功能，且隨著蛋氨酸添加量的增多抗氧化酶活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。0.4%蛋氨酸組的鯉魚肝臟中SOD和CAT活性顯著高于對(duì)照組，分別提高了22.60%、15.57%（P<0.05），0.2%和0.6%蛋氨酸組鯉魚肝臟中SOD和CAT活性有升高的趨勢(shì)，但與對(duì)照組差異不顯著（P>0.05）；蛋氨酸組鯉魚肝臟中MDA含量顯著低于對(duì)照組，分別降低了 49.12%、60.45%、45.59%（P<0.05）；蛋氨酸對(duì)鯉魚肝臟中GSH-Px活性未產(chǎn)生顯著影響（P>0.05）。

表2 不同水平的蛋氨酸對(duì)鯉魚肝臟和血清抗氧化功能的影響

3 討論

活性氧（ROS）在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的含量過(guò)高會(huì)最機(jī)體產(chǎn)生有害作用，引起機(jī)體的氧化應(yīng)激。過(guò)量的ROS會(huì)導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)MDA含量增多，促進(jìn)蛋白和DNA的氧化，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體損傷。動(dòng)物機(jī)體氧化和抗氧化存在動(dòng)態(tài)平衡，其中SOD、CAT、GSH-Px在機(jī)體抗氧化方面起著重要作用。研究表明，在草魚日糧中添加一定劑量的蛋氨酸可以有效地提高草魚腸道中GPx的活性，但蛋氨酸添加量不宜過(guò)高，過(guò)高會(huì)影響GPx的活性，表現(xiàn)出下降的趨勢(shì)，且此研究中蛋氨酸對(duì)草魚肝臟GPx活性未產(chǎn)生顯著影響。在程龍的研究中，蛋氨酸對(duì)松浦鏡鯉腸道和肝臟抗氧化功能產(chǎn)生積極影響，研究表明，一定劑量的蛋氨酸可顯著提高腸道和肝臟中SOD、CAT、GSH-Px的活性，且降低了MDA含量。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，蛋氨酸可顯著提高鯉魚肝臟中SOD和CAT活性；可顯著降低肝臟中MDA含量，且蛋氨酸最適添加量為0.4%，與上述研究結(jié)果類似。蛋氨酸提高魚體抗氧化功能的原因可以與蛋氨酸提高了SOD、CAT等活性，抗氧化酶活性的提高可有效地清除ROS，進(jìn)而降低機(jī)體內(nèi)MDA含量，最終提高機(jī)體的抗氧化功能。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)中，在鯉魚日糧中添加0.4%蛋氨酸可顯著提高鯉魚肝臟中SOD和CAT活性；添加0.2%-0.6%蛋氨酸可顯著降低肝臟中MDA含量，且蛋氨酸最適添加量為0.4%。

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