趙勝杰，趙攀登，盛 敏，崔 沛

（1.河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南鄭州 450000；2.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院，河南鄭州 450046）

病死豬無害化處理是豬產(chǎn)業(yè)鏈和疫病傳播鏈的一個(gè)重要環(huán)節(jié)[1]。病死豬處理不當(dāng)，不僅危害生態(tài)環(huán)境，影響動(dòng)物源性食品質(zhì)量安全，還存在散播動(dòng)物疫病的重大風(fēng)險(xiǎn)[2]。對(duì)病死豬進(jìn)行病原學(xué)監(jiān)測(cè)可以掌握豬群常見疫病流行動(dòng)態(tài)，找出導(dǎo)致豬只死亡的病原種類及其流行特點(diǎn)，可為豬群疫病預(yù)警和防控提供依據(jù)。本研究旨在掌握2017—2019年河南省病死豬常見病原感染情況及其時(shí)間和空間分布特點(diǎn)，以期為河南省豬群疫病防控提供參考。

1 材料

1.1 樣品

采用估計(jì)流行率的抽樣方法，將河南省病死豬作為目標(biāo)群，以上年末存欄量為基數(shù)，按照養(yǎng)殖環(huán)節(jié)8%的死亡率計(jì)算目標(biāo)群個(gè)體數(shù)量；使用Epiinfo軟件，按照計(jì)算設(shè)定的病死豬數(shù)量，設(shè)置信水平95%、可接受誤差5%、預(yù)期流行率50%，計(jì)算抽樣數(shù)量，然后平均分配到47個(gè)備案的病死動(dòng)物無害化處理廠，再將每個(gè)場(chǎng)點(diǎn)所需采集樣品平均分配到各個(gè)季節(jié)。2017—2019年，共采集無害化處理廠病死豬組織樣品1 729份，同一頭病死豬采集淋巴結(jié)、扁桃體、肺臟、脾臟等組織樣品（混合為1份）。其中：2017、2018和2019年各檢測(cè)樣品526、536和667份；春、夏、秋、冬四季分別采樣430、336、574和389份；豫東地區(qū)（開封市、商丘市、周口市）380份，豫西地區(qū)（洛陽市、三門峽市）277份，豫南地區(qū)（駐馬店市、南陽市、信陽市）501份，豫北地區(qū)（新鄉(xiāng)市、焦作、濟(jì)源市、安陽市、濮陽市）287份，豫中地區(qū)（鄭州市、漯河市、平頂山市、許昌市）284份。

1.2 主要儀器

二級(jí)生物安全柜（型號(hào)AC2-6S1），購自新加坡ESCO科技有限公司；組織研磨儀（型號(hào)MM400），購自德國Retsch公司；全自動(dòng)核酸提取儀（型號(hào)NP968），購自西安天隆科技有限公司；熒光PCR儀（型號(hào)7500），購自美國ABI公司。

1.3 主要試劑

核酸提取試劑盒，購自蘇州天隆生物科技有限公司；豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMDV）、豬偽狂犬病病毒（PRV）、豬細(xì)小病毒（PPV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬圓環(huán)病毒3型（PCV3）和副豬嗜血桿菌（HPS）檢測(cè)試劑，均為商品化實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒。

2 方法

2.1 病原檢測(cè)

將同一頭病死豬的不同組織樣品（淋巴結(jié)、扁桃體、肺臟、脾臟等）混樣研磨后提取核酸，進(jìn)行CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、PCV2、PCV3、HPS實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)。核酸提取和檢測(cè)均按照試劑盒說明書進(jìn)行。

2.2 結(jié)果統(tǒng)計(jì)

將檢測(cè)結(jié)果錄入Excel軟件，按年度、區(qū)域、季節(jié)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和描述，找出各病原的時(shí)間和空間分布特征。

3 結(jié)果與分析

3.1 病原分布

共檢測(cè)樣品1 729份，其中PCV2、HPS檢出率較高，分別為73.68%、57.26%，CSFV、FMDV檢出率較低，分別為0.75%、0.81%，而PRV、PRRSV、PCV3、PPV檢出率介于2.20%～13.24%（表1）。

表1 2017—2019年河南省病死豬常見病原檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.2 年度分布

2017—2019年，除FMDV外，其他7種病原在各年度均有檢出；2018年全部8種病原均有檢出，且CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、HPS檢出率均較高；PPV、PCV2、PCV3檢出率呈逐年上升趨勢(shì)，而其他病原大多呈波浪狀變化趨勢(shì)（表2）。

表2 2017—2019年河南省病死豬常見病原不同年度檢出結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.3 季節(jié)分布

春季檢出病原種類最多，所有病原均有檢出，而冬季檢出病原種類相對(duì)較少。春季CSFV、PRRSV、FMDV、PRV檢出率最高，夏季PCV2和HPS檢出率最高，冬季PPV和PCV3檢出率最高（表3）。

表3 2017—2019年河南省病死豬常見病原不同季節(jié)檢出結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.4 區(qū)域分布

除豫南地區(qū)外，CSFV在其他地區(qū)均有檢出，檢出率介于0.70%～1.76%；FMDV主要流行于豫西和豫中地區(qū)，檢出率分別為1.08%和3.87%。其他病原在全省不同地區(qū)均有檢出，其中：PRRSV在豫西地區(qū)檢出率最高（6.50%），PRV豫北地區(qū)檢出率最高（4.18%），PPV豫南地區(qū)檢出率較高（29.94%），PCV3豫南地區(qū)檢出率最高（13.57%）；PCV2、HPS檢出率普遍較高，分別在60.00%、40.00%以上。具體結(jié)果見表4。

表4 2017—2019年河南省病死豬常見病原不同區(qū)域檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3.5 混合感染情況

1 729份樣品中，26.20%的樣品僅檢出1種病原。病原感染以混合感染為主，同一份樣品檢出2種及以上病原的占樣品總數(shù)的60.15%。其中：2種病原混合感染樣品816份，主要為“PCV2+HPS”“PCV2+PPV”“PCV2+PCV3”，占樣品總數(shù)的47.19%；3種病原混合感染樣品187份，主要為“PCV2+HPS+PCV3”“PCV2+HPS+PRRSV”“PCV2+HPS+PPV”，占樣品總數(shù)的10.82%；4種病原混合感染樣品32份，主要為“PCV2+HPS+PCV3+PPV”“PCV2+HPS+PCV3+PRV”“PCV2+HPS+PCV3+PRRSV”，占樣品總數(shù)的1.85%；5種病原混合感染樣品5份，分別為“PCV2+HPS+PCV3+PPV+PRRSV”和“PCV2+HPS+PCV3+PPV+PRV”，占樣品總數(shù)的0.29%。具體結(jié)果見表5。

表5 2017—2019年河南省病死豬常見病原混合感染統(tǒng)計(jì)

4 討論

2017—2019年，共檢測(cè)無害化處理廠病死豬樣 品1 729份，結(jié)果CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、PCV2、PCV3和HPS等8種常見病原均有檢出。不同年度檢測(cè)結(jié)果顯示，大多數(shù)病原的檢出率具有一定的波動(dòng)性，僅PPV、PCV2和PCV3檢出率呈逐年上升趨勢(shì)，因此這3種病原應(yīng)引起生豬養(yǎng)殖場(chǎng)戶高度重視并加強(qiáng)控制。

8種常見病原不同季節(jié)的檢出率有所不同，多數(shù)病原具有一定的季節(jié)分布特征。CSFV、PRRSV、FMDV、PRV春夏季檢出率較高，其中FMDV僅在春季檢出；PPV和PCV3秋冬季檢出率較高；PCV2全年檢出率均較高，不同季節(jié)檢出率均在60%以上；HPS冬季檢出率最低，這符合細(xì)菌病流行特征。

不同地區(qū)病死豬檢測(cè)結(jié)果顯示，8種病原分布范圍較廣，但各病原在不同地區(qū)的檢出情況略有不同。豫南地區(qū)未檢出CSFV，F(xiàn)MDV僅在豫西和豫中地區(qū)檢出，而其他6種常見病原在各個(gè)地區(qū)均有檢出。因此，生豬養(yǎng)殖場(chǎng)戶可依據(jù)不同區(qū)域的病原流行特點(diǎn)，采取相應(yīng)的控制措施，以減少豬群發(fā)病。

在1 729份樣品中，有1 040份樣品檢出2種及以上病原，說明病死豬混合感染情況較嚴(yán)重?；旌细腥緲悠分?，均有PCV2檢出，說明河南省豬群中PCV2感染較為廣泛，應(yīng)引起關(guān)注。PCV2感染豬只后，可引起豬只免疫抑制，從而繼發(fā)感染其他病原，這可能是混合感染樣品中均有PCV2檢出的一種重要因素。

病死豬運(yùn)輸或無害化處理不當(dāng)，將產(chǎn)生散播疫病風(fēng)險(xiǎn)。各地可借鑒、推廣病死豬無害化處理保險(xiǎn)聯(lián)動(dòng)模式[3]，設(shè)置無害化處理設(shè)施設(shè)備配置補(bǔ)助經(jīng)費(fèi)，同時(shí)提高病死動(dòng)物無害化處理補(bǔ)助水平[4]。建議規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)配備與其規(guī)模相應(yīng)的病死豬無害化處理設(shè)施設(shè)備，爭(zhēng)取做到病死豬不出場(chǎng)處理，以降低疫病散播風(fēng)險(xiǎn)[5-6]。

5 結(jié)論

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，河南省病死豬中CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、PCV2、PCV3和HPS等8種常見病原分布范圍廣、檢出率高、混合感染嚴(yán)重，且具有一定的時(shí)間和空間分布特征，表明河南省豬群疫病防控形勢(shì)較為嚴(yán)峻。調(diào)查提示，豬場(chǎng)應(yīng)做好日常監(jiān)測(cè)預(yù)警，掌握疫病流行態(tài)勢(shì)并采取相應(yīng)的防控措施，以保障養(yǎng)豬業(yè)健康穩(wěn)定發(fā)展。